肺臟是人體的呼吸器官,由氣管、支氣管和肺泡構(gòu)成。來源于肺的上皮性惡性腫瘤稱為肺癌,是目前發(fā)病率和死亡率增長最快,對人類健康影響最大的惡性腫瘤之一。惡性腫瘤的生物學(xué)特性有增殖、浸潤和轉(zhuǎn)移,共同決定腫瘤的惡性程度,因此肺癌首要的治療原則是抑制肺癌細胞的增殖。在中晚期肺癌的治療中,順鉑是一線化療藥物,然而63%左右的肺癌患者在治療中表現(xiàn)著對順鉑的耐藥,這嚴重影響了肺癌患者的預(yù)后和中位生存期。因此闡明腫瘤增殖和順鉑耐藥的機制并研發(fā)具有抑制作用的藥物是肺癌研究的重點。研究表明,腫瘤細胞的增殖與細胞周期的紊亂密切相關(guān),而細胞自噬和凋亡能夠調(diào)節(jié)細胞周期過程并影響腫瘤細胞的增殖。另外化療藥物順鉑的作用機理是通過與細胞內(nèi)的DNA結(jié)合形成化合物,抑制細胞的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制過程,引起腫瘤細胞的凋亡而發(fā)揮作用。由此可知,DNA是順鉑的主要作用靶點,影響順鉑與DNA的結(jié)合或者后續(xù)的細胞凋亡過程都可以導(dǎo)致順鉑耐藥的出現(xiàn)。研究表明,與此相關(guān)的分子通路包括氧化應(yīng)激、細胞凋亡、自噬和鐵死亡等。天然藥物中能夠分離出有明確的化學(xué)結(jié)構(gòu)的單體,同時具有廣泛的生物活性,如抗氧化、抗炎癥和抗腫瘤等。與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)常規(guī)治療手段相比,天然化合物... 

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第1章 文獻綜述
    1.1 非小細胞肺癌的治療
        1.1.1 非小細胞肺癌概述
        1.1.2 非小細胞肺癌治療方法總論
        1.1.3 治療現(xiàn)狀及存在問題
    1.2 腫瘤增殖的分子機制
        1.2.1 細胞自噬與腫瘤增殖
        1.2.2 Nrf2 與腫瘤增殖
        1.2.3 MAPK與腫瘤增殖
        1.2.4 Wnt與腫瘤增殖
        1.2.5 非編碼RNA與腫瘤增殖
        1.2.6 細胞凋亡與腫瘤增殖
    1.3 腫瘤的化療耐藥的分子機制
        1.3.1 鐵死亡與化療耐藥
        1.3.2 細胞自噬與化療耐藥
        1.3.3 細胞凋亡與化療耐藥
        1.3.4 Nrf2 與化療耐藥
        1.3.5 非編碼RNA與化療耐藥
    1.4 中藥治療對腫瘤增殖和化療耐藥的作用
        1.4.1 白藜蘆醇
        1.4.2 紫檀芪
    1.5 冬凌草甲素對腫瘤增殖和化療耐藥的作用
        1.5.1 冬凌草甲素抑制腫瘤增殖
        1.5.2 冬凌草甲素逆轉(zhuǎn)化療耐藥
第2章 冬凌草甲素抑制肺腺癌普通株增殖的機制研究
    2.1 材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 細胞
        2.1.4 主要試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 藥物配制
        2.2.2 細胞培養(yǎng)
        2.2.3細胞活力測定(CCK8)實驗
        2.2.4 提取總蛋白
        2.2.5 蛋白印跡
        2.2.6 免疫熒光
        2.2.7 自噬小體檢測
        2.2.8 吖啶橙染色
        2.2.9 統(tǒng)計學(xué)處理
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 冬凌草甲素可以抑制肺癌細胞A549 的增殖
        2.3.2 冬凌草甲素誘導(dǎo)自噬相關(guān)蛋白的激活
        2.3.3 冬凌草甲素增強CQ對酸性物質(zhì)產(chǎn)生的誘導(dǎo)作用
        2.3.4 冬凌草甲素增強CQ對 LC3B蛋白的誘導(dǎo)作用
        2.3.5 冬凌草甲素增強CQ對 LC3B表達的誘導(dǎo)作用
        2.3.6 冬凌草甲素可引起AMPK/Akt/mTOR通路的激活
        2.3.7 冬凌草甲素可以引起促凋亡蛋白的激活
        2.3.8 冬凌草甲素通過AMPK調(diào)控Akt/mTOR通路
        2.3.9 冬凌草甲素通過AMPK調(diào)控自噬小體的含量
        2.3.10 冬凌草甲素通過AMPK調(diào)控LC3B的表達
        2.3.11 冬凌草甲素通過AMPK調(diào)控自噬相關(guān)蛋白的表達
        2.3.12 冬凌草甲素通過AMPK調(diào)控細胞凋亡過程
        2.3.13 冬凌草甲素通過自噬小體的積累發(fā)揮抗癌作用
        2.3.14 3-MA能夠抑制Ori對自噬相關(guān)蛋白的作用
        2.3.15 3-MA能夠抑制Ori對凋亡相關(guān)蛋白的作用
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第3章 冬凌草甲素增強肺腺癌普通株對順鉑的敏感性的機制研究
    3.1 材料
        3.1.1 主要儀器
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 細胞
        3.1.4 主要試劑配制
    3.2 實驗方法
        3.2.1 AnnexinⅤ/PI雙染法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 冬凌草甲素協(xié)同順鉑顯著抑制A549 細胞增殖
        3.3.2 冬凌草甲素聯(lián)合順鉑顯著增多A549 細胞自噬小體的含量
        3.3.3 冬凌草甲素聯(lián)合順鉑顯著增強A549 細胞LC3B的表達
        3.3.4 冬凌草甲素聯(lián)合順鉑顯著增強A549 細胞自噬相關(guān)蛋白的表達
        3.3.5 冬凌草甲素聯(lián)合順鉑顯著增強A549 細胞AMPK的磷酸化并且抑制Akt/mTOR的磷酸化水平
        3.3.6 冬凌草甲素聯(lián)合順鉑顯著增強A549 細胞中凋亡細胞的比例
        3.3.7 冬凌草甲素聯(lián)合順鉑顯著增強A549 細胞促凋亡蛋白的表達并且抑制抗凋亡蛋白水平
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第4章 肺腺癌耐藥株順鉑耐藥的機制研究
    4.1 實驗材料
        4.1.1 主要儀器
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 細胞
        4.1.4 主要試劑配制
    4.2 實驗方法
        4.2.1克隆形成實驗
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 順鉑對A549和A549/DDP細胞生存率的影響
        4.3.2 鐵死亡的不完全激活與肺腺癌的順鉑耐藥有關(guān)
        4.3.3 自噬的抑制與肺腺癌的順鉑耐藥有關(guān)
        4.3.4 Nrf2 的活化與肺腺癌的順鉑耐藥有關(guān)
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第5章 冬凌草甲素逆轉(zhuǎn)順鉑耐藥的機制研究
    5.1 實驗材料
        5.1.1 主要試劑
        5.1.2 主要試劑配制
    5.2 實驗方法
        5.2.1 免疫熒光染色
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 冬凌草甲素能夠抑制A549/DDP細胞的增殖
        5.3.2 冬凌草甲素顯著抑制A549/DDP細胞克隆數(shù)
        5.3.3 冬凌草甲素對A549/DDP細胞增殖的抑制作用與鐵死亡有關(guān)
        5.3.4 冬凌草甲素調(diào)控A549/DDP細胞鐵死亡相關(guān)蛋白的表達
        5.3.5 冬凌草甲素引起A549/DDP細胞脂質(zhì)過氧化的激活
        5.3.6 冬凌草甲素引起A549/DDP細胞亞鐵離子的激活
        5.3.7 冬凌草甲素引起A549/DDP細胞自噬的激活
        5.3.8 冬凌草甲素抑制A549/DDP細胞Nrf2/HO-1 的表達
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
第6章 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Management of oligometastatic non-small cell lung cancer patients:Current controversies and future directions[J]. Felipe Cou?ago,Javier Luna,Luis Leonardo Guerrero,Blanca Vaquero,María Cecilia Guillén-Sacoto,Teresa González-Merino,Bego?a Taboada,Verónica Díaz,Belén Rubio-Viqueira,Ana Aurora Díaz-Gavela,Francisco José Marcos,Elia del Cerro.  World Journal of Clinical Oncology. 2019(10)
[2]紫檀芪抗腫瘤作用機制研究進展[J]. 張曉雁,張嬌,徐麗群,馬志強,狄守印,高原,李小飛,閆小龍,張紅梅.  中國肺癌雜志. 2018(12)



本文編號：3708455