目的:以往研究發(fā)現(xiàn)在過(guò)敏性疾病中,初始T細(xì)胞受到炎癥刺激后,細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子PU-1和IRF4高表達(dá),促使初始T細(xì)胞分化為Th9細(xì)胞并分泌細(xì)胞因子IL-9和IL-10;T細(xì)胞的分化及分泌細(xì)胞因子的過(guò)程受到miRNA的調(diào)控。然而,慢性鼻竇炎伴鼻息肉中是否有初始T細(xì)胞向Th9細(xì)胞分化和相關(guān)細(xì)胞因子的分泌不明,miRNA如何調(diào)控Th9細(xì)胞的分化和分泌過(guò)程也所知甚少。本研究旨在檢測(cè)慢性鼻竇炎伴鼻息肉中Th9細(xì)胞的分化情況和細(xì)胞因子的表達(dá)水平,同時(shí)探索相關(guān)miRNA對(duì)Th9細(xì)胞的調(diào)控作用。方法:我們采用RT-PCR、Westernblot、免疫熒光以及流式細(xì)胞術(shù)方法檢測(cè)了鼻息肉患者息肉組織和對(duì)照組下鼻甲組織中轉(zhuǎn)錄因子PU-1和IRF4、Th9細(xì)胞數(shù)目以及IL-9和IL-10的表達(dá)水平。同時(shí)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)鼻息肉患者外周血Th9細(xì)胞的數(shù)目。體外分離培養(yǎng)初始T細(xì)胞并刺激分化為Th9細(xì)胞,給予miRNA27b的mimic和inhibitor轉(zhuǎn)染觀察miRNA對(duì)Th9細(xì)胞的調(diào)控作用。結(jié)果:與對(duì)照組下鼻甲組織相比,鼻息肉患者息肉組織中轉(zhuǎn)錄因子PU-1和IRF4、Th9細(xì)胞數(shù)目和IL-9表達(dá)水平顯著升高。鼻... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

PU-1和IRF4蛋白和mRNA在鼻息肉中升高Figure1:mRNAandproteinofPU-1andIRF4increasedinnasalpolyps(A)嗜酸性鼻息肉和非嗜酸性鼻息肉組織中Th9轉(zhuǎn)錄因子PU-1和IRF4蛋白表達(dá)水平高于對(duì)照組

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文35及健康對(duì)照組下鼻甲組織中的CD4+PU-1+IL-9+Th9細(xì)胞的表達(dá)情況，結(jié)果顯示在非嗜酸性鼻息肉以及嗜酸性鼻息肉組織中CD4+PU-1+IL-9+Th9細(xì)胞數(shù)目明顯高于健康對(duì)照組下鼻甲組織。但是在兩組鼻息肉組織間表達(dá)無(wú)明顯差異。同時(shí)我們比較了同一鼻息肉患者和對(duì)照組外周血和鼻息肉組織中CD4+PU-1+IL-9+Th9細(xì)胞的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD4+PU-1+IL-9+Th9細(xì)胞在鼻息肉組織中明顯高于外周血表達(dá)水平（圖3）。圖2.IL-9蛋白和mRNA在鼻息肉中升高Figure1:mRNAandproteinofIL-9increasedinnasalpolyps(A)嗜酸性鼻息肉和非嗜酸性鼻息肉組織中Th9細(xì)胞因子IL-9蛋白表達(dá)水平升高，而IL-10蛋白表達(dá)水平在鼻息肉和對(duì)照組無(wú)明顯差異。(B)Th9細(xì)胞的細(xì)胞因子IL-9和IL-10的mRNA表達(dá)水平在鼻息肉組織中高于對(duì)照組表達(dá)水平。

上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文36圖3.鼻息肉患者和對(duì)照組外周血和鼻黏膜中Th9細(xì)胞的表達(dá)情況Figure3:Th9cellsincreasedinnasalpolyps(A)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)方法，以CD4+陽(yáng)性細(xì)胞設(shè)門，再檢測(cè)PU-1+IL-9+雙陽(yáng)性細(xì)胞比例。(B)外周血中Th9細(xì)胞在鼻息肉組和對(duì)照組間無(wú)差異，鼻息肉組織中Th9細(xì)胞表達(dá)高于對(duì)照組。(C)對(duì)照組中Th9細(xì)胞在外周血和鼻黏膜中表達(dá)無(wú)差異，在嗜酸性和非嗜酸性鼻息肉患者中鼻黏膜Th9細(xì)胞高于外周血表達(dá)水平。為了明確Th9細(xì)胞在鼻息肉組織中的定位，我們采用免疫熒光雙染方法檢測(cè)PU-1+IL-9+Th9細(xì)胞在鼻息肉組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示PU-1+IL-9+Th9陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量在鼻息肉組織中明顯高于健康對(duì)照組，且PU-1+IL-9+Th9細(xì)胞主要表

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Modulation of the MAP kinase signaling cascade by Raf kinase inhibitory protein[J]. Nicholas TRAKUL,Marsha R. ROSNER.  Cell Research. 2005(01)



本文編號(hào)：3580711