目的:以往研究發(fā)現(xiàn)在過敏性疾病中,初始T細胞受到炎癥刺激后,細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子PU-1和IRF4高表達,促使初始T細胞分化為Th9細胞并分泌細胞因子IL-9和IL-10;T細胞的分化及分泌細胞因子的過程受到miRNA的調(diào)控。然而,慢性鼻竇炎伴鼻息肉中是否有初始T細胞向Th9細胞分化和相關(guān)細胞因子的分泌不明,miRNA如何調(diào)控Th9細胞的分化和分泌過程也所知甚少。本研究旨在檢測慢性鼻竇炎伴鼻息肉中Th9細胞的分化情況和細胞因子的表達水平,同時探索相關(guān)miRNA對Th9細胞的調(diào)控作用。方法:我們采用RT-PCR、Westernblot、免疫熒光以及流式細胞術(shù)方法檢測了鼻息肉患者息肉組織和對照組下鼻甲組織中轉(zhuǎn)錄因子PU-1和IRF4、Th9細胞數(shù)目以及IL-9和IL-10的表達水平。同時采用流式細胞術(shù)檢測鼻息肉患者外周血Th9細胞的數(shù)目。體外分離培養(yǎng)初始T細胞并刺激分化為Th9細胞,給予miRNA27b的mimic和inhibitor轉(zhuǎn)染觀察miRNA對Th9細胞的調(diào)控作用。結(jié)果:與對照組下鼻甲組織相比,鼻息肉患者息肉組織中轉(zhuǎn)錄因子PU-1和IRF4、Th9細胞數(shù)目和IL-9表達水平顯著升高。鼻... 

【文章來源】：上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

PU-1和IRF4蛋白和mRNA在鼻息肉中升高Figure1:mRNAandproteinofPU-1andIRF4increasedinnasalpolyps(A)嗜酸性鼻息肉和非嗜酸性鼻息肉組織中Th9轉(zhuǎn)錄因子PU-1和IRF4蛋白表達水平高于對照組

上海交通大學博士學位論文35及健康對照組下鼻甲組織中的CD4+PU-1+IL-9+Th9細胞的表達情況，結(jié)果顯示在非嗜酸性鼻息肉以及嗜酸性鼻息肉組織中CD4+PU-1+IL-9+Th9細胞數(shù)目明顯高于健康對照組下鼻甲組織。但是在兩組鼻息肉組織間表達無明顯差異。同時我們比較了同一鼻息肉患者和對照組外周血和鼻息肉組織中CD4+PU-1+IL-9+Th9細胞的表達水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD4+PU-1+IL-9+Th9細胞在鼻息肉組織中明顯高于外周血表達水平（圖3）。圖2.IL-9蛋白和mRNA在鼻息肉中升高Figure1:mRNAandproteinofIL-9increasedinnasalpolyps(A)嗜酸性鼻息肉和非嗜酸性鼻息肉組織中Th9細胞因子IL-9蛋白表達水平升高，而IL-10蛋白表達水平在鼻息肉和對照組無明顯差異。(B)Th9細胞的細胞因子IL-9和IL-10的mRNA表達水平在鼻息肉組織中高于對照組表達水平。

上海交通大學博士學位論文36圖3.鼻息肉患者和對照組外周血和鼻黏膜中Th9細胞的表達情況Figure3:Th9cellsincreasedinnasalpolyps(A)流式細胞術(shù)檢測方法，以CD4+陽性細胞設(shè)門，再檢測PU-1+IL-9+雙陽性細胞比例。(B)外周血中Th9細胞在鼻息肉組和對照組間無差異，鼻息肉組織中Th9細胞表達高于對照組。(C)對照組中Th9細胞在外周血和鼻黏膜中表達無差異，在嗜酸性和非嗜酸性鼻息肉患者中鼻黏膜Th9細胞高于外周血表達水平。為了明確Th9細胞在鼻息肉組織中的定位，我們采用免疫熒光雙染方法檢測PU-1+IL-9+Th9細胞在鼻息肉組織中的表達，結(jié)果顯示PU-1+IL-9+Th9陽性細胞數(shù)量在鼻息肉組織中明顯高于健康對照組，且PU-1+IL-9+Th9細胞主要表

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Modulation of the MAP kinase signaling cascade by Raf kinase inhibitory protein[J]. Nicholas TRAKUL,Marsha R. ROSNER.  Cell Research. 2005(01)



本文編號：3580711