第一部分Gax在胸主動脈瘤組織中的表達及其對胸主動脈平滑肌細胞表型轉化的作用研究目的:探討Gax在胸主動脈瘤組織中的表達水平,以及Gax對胸主動脈平滑肌細胞表型轉化的影響方法:收集2016年9月至2017年9月在本院進行手術治療的16例退行性變升主動脈瘤患者的胸主動脈瘤壁組織,正常對照組標本16例取自同一時期進行冠脈搭橋術的冠心病患者。通過Real-time PCR和Western blot方法檢測Gax在胸主動脈瘤壁中膜組織中的mRNA和蛋白表達水平;應用消化貼壁法原代培養(yǎng)正常人胸主動脈平滑肌細胞和胸主動脈瘤血管平滑肌細胞,并通過細胞免疫熒光染色檢測α-actin和Gax的表達水平;應用Ad-Gax或Ad-Gax siRNA轉染VSMCs,通過Western blot方法檢測Gax過表達對有或無PDGF-BB刺激下VSMCs中Calpoin和SM-MHC 11蛋白表達的影響;通過CCK8方法檢測Gax過表達或低表達對有或無PDGF-BB刺激下VSMCs增殖的影響;通過Transwell方法檢測Gax過表達或低表達對有或無PDGF-BB刺激下VSMCs遷移的影響。結果:Real-tim... 

【文章來源】：上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

Gax蛋白在主動脈壁中膜組織中表達水平的Westernblot檢測，與對照組比較，*表示P<0.05

上海交通大學醫(yī)學院2016級博士學位論文14Westernblot結果顯示，Gax蛋白在胸主動脈瘤壁中膜組織中的表達水平顯著低于正常胸主動脈壁中膜組織，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）,見圖2。圖2Gax蛋白在主動脈壁中膜組織中表達水平的Westernblot檢測，與對照組比較，*表示P<0.05。Figure2TheexpressionlevelofGaxproteininvasculartunicamediafromaorticwalltissuesbyWesternblot.Comparedwiththatincontrolgroup,*indicatedP<0.05.2.2血管平滑肌細胞的原代培養(yǎng)消化貼壁法培養(yǎng)主動脈中膜組織塊1周后，組織塊邊緣爬出細胞，源于冠心病患者在行冠脈搭橋手術過程中與升主動脈橋血管吻合時打孔取下的正常主動脈壁組織的VSMCs細胞呈梭形，能隱約看到肌絲，并存在細胞極性；源于手術切除的升主動脈瘤病變組織的VSMCs成不規(guī)則形，細胞極性弱，見圖3。圖3消化貼壁法原代培養(yǎng)VSMCs，A：正常胸主動脈平滑肌細胞；B：胸主動脈瘤VSMCs。Figure3PrimaryculturedVSMCsbythemethodofenzymedigestionandadherent.A:Normalthoracicaorticsmoothmusclecells.B:VSMCsfromthoracicaorticaneurysmtissues.2.3血管平滑肌細胞的鑒定α-acitn細胞免疫熒光染色結果顯示，培養(yǎng)的細胞顯著表達α-acitn蛋白（紅色熒光），表明為主動脈平滑肌細胞；從圖4中可見，源于正常胸主動脈組織的VSMCs中α-acitn表達顯著高于源于胸主動脈瘤組織的VSMCS，表明胸主動脈瘤中的VSMCs發(fā)生由收縮表型向合成表型的轉化。AB

細胞4細胞免疫熒胞；B：胸主動熒光染色方法

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Gax基因調控血管平滑肌細胞研究進展[J]. 鄭輝,薛松.  廣東醫(yī)學. 2010(21)
[2]兔血管平滑肌細胞體外培養(yǎng)及生長特性研究[J]. 鄭輝,薛松,連鋒,黃日太,胡振雷.  上海交通大學學報(醫(yī)學版). 2010(09)



本文編號：3344672