研究背景胰腺癌惡性程度高,預(yù)后極差,化療耐藥是限制胰腺癌患者預(yù)后的主要因素之一,因此深入研究介導(dǎo)胰腺癌化療耐藥的分子機(jī)制并尋找潛在的化療聯(lián)合治療靶點(diǎn)對(duì)于改善胰腺癌患者預(yù)后具有重要的意義。近年來(lái)隨著對(duì)腫瘤能量代謝以及腫瘤微環(huán)境的研究不斷深入,能量代謝重編程逐漸成為惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展以及化療耐藥調(diào)控的重要機(jī)制之一。研究表明氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體可以作為氨基酸感受器參與雷帕霉素機(jī)制性靶點(diǎn)（Mechanistic target of rapamycin,mTOR）的募集和活化,而mTOR對(duì)于正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的增殖均至關(guān)重要。L型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體 2（L-type amino acid transporter 2,LAT2）由 SLC7A8 基因編碼,是一種Na+非依賴性中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體,主要負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)包括谷氨酰胺在內(nèi)的中性氨基酸。課題組前期通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)和生物信息學(xué)分析,構(gòu)建了胰腺癌吉西他濱化療耐藥相關(guān)的lncRNA-miRNA-mRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò),其中LAT2在該調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的下游參與調(diào)控胰腺癌化療耐藥。研究目的檢測(cè)LAT2在胰腺癌組織中的表達(dá)并評(píng)估其臨床意義;明確LAT2對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖、凋亡、化療敏感性... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：136 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞表
前言
材料與方法
    實(shí)驗(yàn)材料
        1.組織病理標(biāo)本
        2.免疫組化相關(guān)試劑及設(shè)備
        3.細(xì)胞株及培養(yǎng)條件
        4.細(xì)胞培養(yǎng)用品
        5.    CCK-8法檢測(cè)所需的儀器和試劑
        6.細(xì)胞凋亡檢測(cè)所需的儀器和試劑
        7.藥物及配置
        8.    s?NA設(shè)計(jì)合成
        9.    LAT2過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建試劑
        10.穩(wěn)定過(guò)表達(dá)LAT2的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的相關(guān)試劑和材料
        11. Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)水平所需試劑及耗材
        12.免疫共沉淀所需試劑及伩器
        13.免疫熒光所需試劑、儀器及耗材
        14.能量代謝平臺(tái)檢測(cè)所需試劑和儀器
        15.    UHPLC-MS/MS靶標(biāo)代謝組學(xué)檢測(cè)所需試劑和儀器
        16.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相關(guān)實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
結(jié)果
    第一部分: LAT2在胰腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義
        1.胰腺癌組織LAT2表達(dá)水平檢測(cè)
        2.胰腺癌組織中LAT2表達(dá)水平與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性分析
        3.胰腺癌組織LAT2表達(dá)水平與胰腺癌患者預(yù)后的相關(guān)性單因素分析
        4.胰腺癌組織中LAT2表達(dá)水平與胰腺癌患者預(yù)后的相關(guān)性多因素分析
    第二部分: LAT2對(duì)胰腺癌細(xì)胞代謝和生物學(xué)行為的調(diào)控作用
        1.    LAT2在胰腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況及工具細(xì)胞株的選擇
        2.    LAT2對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖的影響
        3. LAT2對(duì)胰腺癌細(xì)胞凋亡的影響
        4. LAT2對(duì)胰腺癌化療敏感性的影響
        5. LAT2對(duì)胰腺癌糖酵解的調(diào)控作用
        6. LAT2對(duì)胰腺癌細(xì)胞代謝表型的影響
        7.    LAT2對(duì)胰腺癌細(xì)胞谷氨酰胺代謝的調(diào)控作用
        8.    LAT2對(duì)胰腺癌糖酵解和谷氨酰胺代謝相關(guān)酶的調(diào)控作用
    第三部分: LAT2調(diào)控胰腺癌代謝和化療耐藥的機(jī)制研究
        1. LAT2通過(guò)激活mTOR通路調(diào)控LDHB的表達(dá)
        2. LAT2通過(guò)激活mTOR通路誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞化療耐藥
        3. LAT2通過(guò)激活mTOR通路促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞糖酵解的發(fā)生
        4. LAT2通過(guò)激活mTOR通路調(diào)控胰腺癌細(xì)胞糖酵解和谷氨酰胺代謝
        5.胰腺癌組織LDHB表達(dá)水平檢測(cè)及其臨床意義
        6. LAT2通過(guò)依賴谷氨酰胺的mTOR通路活化調(diào)控胰腺癌細(xì)胞代謝和化療耐藥
        7.外源性谷氨酰胺可以激活mTOR信號(hào)通路
        8.谷氨酰胺參與調(diào)控LAT2與p-mTOR的相互作用
        9.    LAT2通過(guò)激活mTOR通路調(diào)控糖酵解和谷氨酰胺代謝依賴于外源性谷氨酰胺的存在
        10. LAT2通過(guò)激活mTOR通路促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)谷氨酰胺合成
        11.裸鼠移植瘤標(biāo)本免疫組化檢測(cè)
        12.    LAT2通過(guò)調(diào)控胰腺癌谷氨酰胺代謝和和糖酵解誘導(dǎo)化療耐藥的機(jī)制
    第四部分: 靶向LAT2下游通路對(duì)胰腺癌的治療作用
        1.KPC小鼠基因型鑒定
        2. KPC小鼠胰腺癌成瘤前后外周血PBMC成分比例變化
        3. KPC小鼠胰腺腫瘤HE染色和免疫組化
        4.小動(dòng)物彩超監(jiān)測(cè)KPC小鼠胰腺癌生長(zhǎng)情況
        5. mTOR抑制劑聯(lián)合吉西他濱或PD-Ll單抗對(duì)KPC小鼠胰腺癌的治療效果
        6. mTOR抑制劑聯(lián)合吉西他濱或PD-Ll單抗對(duì)KPC小鼠胰腺癌治療作用的機(jī)制初步探索
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    References
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果及獎(jiǎng)勵(lì)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Novel therapeutic approaches targeting L-type amino acid transporters for cancer treatment[J]. Keitaro Hayashi,Naohiko Anzai.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2017(01)
[2]Viro-immune therapy:A new strategy for treatment of pancreatic cancer[J]. Andrea Marie Ibrahim,Yao-he Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2016(02)
[3]Immunotherapy for pancreatic ductal adenocarcinoma: an overview of clinical trials[J]. Alessandro Paniccia,Justin Merkow,Barish H.Edil,Yuwen Zhu.  Chinese Journal of Cancer Research. 2015(04)

博士論文
[1]長(zhǎng)鏈非編碼RNA GSTM3TV2調(diào)控胰腺癌化療耐藥的功能與機(jī)制研究[D]. 熊光冰.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2017

碩士論文
[1]RB-P53調(diào)控網(wǎng)絡(luò)在乳腺癌進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中的調(diào)控機(jī)制[D]. 馮夢(mèng)宇.華中科技大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3295014