研究背景:肺癌是目前世界上發(fā)病率高,死亡率高的惡性腫瘤之一。近年在肺癌的治療,尤其在是靶向治療和免疫治療上取得了較大的進展,但仍不能改善肺癌愈后較差的現狀。早期診斷是改善惡性腫瘤愈后的有效辦法。目前肺癌的早期篩查的手段主要為影像診斷,沒有敏感度和特異度均滿意的外周血腫瘤標記物。近年,對外泌體和Micro RNA（簡稱miRNA）的研究有了突破性的進展,諸多研究發(fā)現二者幾乎參與了腫瘤發(fā)生、發(fā)展的每一個環(huán)節(jié)。因此外泌體內的miRNA具有成為新的腫瘤標記物的潛能。研究目的:1.掌握從外周血中分離提取外泌體,以及從外泌體中提取miRNA的實驗方法。2.明確早期肺腺癌患者手術前、術后7天以及正常人血漿外泌體中miRNA的表達情況。3.篩選出差異性表達的miRNA,并驗證其在早期肺腺癌及正常人中的差異性表達;4.探討篩選出的miRNA作為早期肺腺癌腫瘤標記物的可能性;5.初步預測篩選出的miRNA的靶基因以及可能參與的信號通路。研究方法:1.采用超速低溫離心的方法從血漿中分離提取外泌體,再使用miRNA提取試劑盒的從外泌體中提取miRNA。2.應用二代測序技術（Illumina Genome An... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學院北京市

【文章頁數】：64 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１透視電鏡下組樣本中提取的外泌體情況

圖４術前及術后樣本ｍｉＲＮＡ差異性表達熱圖（實驗組兩兩比較，差異性不顯著）??

圖５所有樣本ｍｉＲＮＡ差異性表達熱圖（實驗組合對照組的表達差異顯著）??６．３實驗組（術前、術后）、對照組交叉對比分析結果。??肺腺癌術前樣本與正常人對比后，上調的ｍｉＲＮＡ共有５０２個，其的ｍｉＲＮＡ?Ｂａｓｅ?Ｍｅａｎ讀數大于１０００，且較正常人Ｂａｓｅ?Ｍｅａｎ讀數上升５的?ｍｉＲＮＡ?共有?３８?個（表?６）。其中，ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－４８６－５ｐ、ｍｉＲ－２６ａ－５ｐ、ｍｉＲ四個ｍｉＲＮＡ的ｂａｓｅ?ｍｅａｎ在肺癌中的讀數超過１０萬，說明其豐度非常明顯，可作為備選。另夕卜，ｍｉＲ－９６－５ｐ、ｍｉＲ－１５１ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２６－５ｐ在肺升倍數超過１００倍，并且其ｂａｓｅ?ｍｅａｎ在肺癌中的讀數也很高，可作為備選（表６、圖６）??


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