天然免疫系統(tǒng)是宿主用來抵抗微生物、毒素、過敏原及損傷信號的一種防御系統(tǒng),主要通過辨別“自我”-“非我”來實現(xiàn)。在天然免疫系統(tǒng)作用模式的分子水平上,模式識別受體（PRR）作為天然免疫受體最先接觸上述這些危險信號,并可通過誘導各種炎性細胞因子,趨化因子和干擾素來啟動一系列宿主防御體系。雙鏈DNA（dsDNA）主要作為許多生物體中的遺傳密碼而存在,因而對宿主和許多入侵的微生物都至關重要,也正因如此,dsDNA的暴露通常指向危險信號。但由于dsDNA結(jié)構(gòu)復雜度低且在環(huán)境中幾乎無所不在,生物體便進化出了對自身dsDNA的區(qū)室化,典型的有真核生物中的細胞核和線粒體,以規(guī)避這“自我”的成分被宿主自身的免疫監(jiān)察鎖定為“非我”。胞質(zhì)內(nèi)的dsDNA可以被多個蛋白識別,但多細胞生物中最主要的可以識別dsDNA的PRR當屬“環(huán)狀鳥苷單磷酸-腺苷單磷酸合成酶”（cGAS,又名MB21D1）。cGAS在識別dsDNA后催化生成“環(huán)狀鳥苷單磷酸-腺苷單磷酸”（cGAMP）,后者則激活STING-TBK1-IRF3通路而誘導干擾素的表達（STING:“干擾素基因誘導因子”,又名STING1,TMEM173,MITA,... 

【文章來源】：中國科學院大學(中國科學院上海巴斯德研究所)上海市

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 天然免疫系統(tǒng)
    1.2 模式識別受體
    1.3 識別細胞內(nèi)DNA的受體
    1.4 cGAS-STING通路的調(diào)控
    1.5 UNC93B1 與核酸識別型TLR
    1.6 自噬
    1.7 本研究的目的
第2章 材料與方法
    2.1 試劑與抗體
    2.2 引物及其它寡核苷酸
    2.3 細胞培養(yǎng)
    2.4 質(zhì)粒構(gòu)建
    2.5 轉(zhuǎn)染
    2.6 慢病毒包裝和感染
    2.7 以shRNA來實行的RNA干擾
    2.8 以CRISPR/Cas9 來實行的基因敲除
    2.9 細胞單克隆的分離
    2.10 流式細胞術
    2.11 RNA抽提和逆轉(zhuǎn)錄-定量PCR
    2.12 SDS-PAGE和免疫印跡
    2.13 免疫共沉淀
    2.14 免疫熒光和激光共聚焦成像
    2.15 數(shù)據(jù)及統(tǒng)計
    2.16 其它
第3章 結(jié)果
    3.1 UNC93B1 表達缺陷可增強由胞質(zhì)內(nèi)雙鏈DNA引起的天然免疫反應
    3.2 UNC93B1 表達缺陷所造成的天然免疫反應的增強有賴于STING
    3.3 UNC93B1與STING在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及溶酶體上有相互作用
    3.4 UNC93B1 不影響STING出內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的過程
    3.5 UNC93B1 可影響STING蛋白的表達水平
    3.6 UNC93B1 影響了STING通過自噬體-溶酶體進行的降解
第4章 討論
    4.1 STING的降解
    4.2 UNC93B1 的生物學功能
    4.3 總結(jié)與展望
參考文獻
致謝
作者簡歷及攻讀學位期間發(fā)表的學術論文與研究成果
文獻綜述
    參考文獻



本文編號：3187262