研究背景與目的腫瘤的免疫治療是近幾年的研究熱點(diǎn)。通過(guò)重新激活機(jī)體的抗腫瘤免疫,識(shí)別并殺傷腫瘤細(xì)胞,極大提高了部分病人的長(zhǎng)期生存率。溶瘤病毒作為免疫治療的一種方式,也受到眾多關(guān)注。溶瘤病毒具有殺傷腫瘤細(xì)胞與激活免疫的雙重作用,具有不可比擬的優(yōu)勢(shì)。但在大規(guī)模臨床應(yīng)用之前,其安全性與有效性仍有待進(jìn)一步提高。在此研究中,我們提出了一種設(shè)計(jì)新型溶瘤病毒的思路:在不影響病毒復(fù)制能力的前提下,選擇性突變病毒基因組內(nèi)行使免疫抑制功能的核酸。這種設(shè)計(jì)將使病毒喪失抑制細(xì)胞免疫激活的能力,以達(dá)到同時(shí)增強(qiáng)溶瘤病毒的靶向性和有效性的目的。在此,我們集中關(guān)注了干擾素系統(tǒng)。干擾素系統(tǒng)不僅是固有免疫的重要組成,更是橋接固有免疫與適應(yīng)性免疫的橋梁。腫瘤局部的干擾素表達(dá)可有效促進(jìn)抗腫瘤免疫的激活。因此,我們希望開(kāi)發(fā)一種新型的溶瘤病毒,可在體內(nèi)安全使用,選擇性靶向腫瘤組織,并有效的激活腫瘤微環(huán)境內(nèi)干擾素的上調(diào)。研究方法與結(jié)果為系統(tǒng)性評(píng)估病毒中免疫抑制的位點(diǎn),我們首創(chuàng)了一種結(jié)合高通量方法學(xué)、正向遺傳學(xué)與反向遺傳學(xué)的系統(tǒng)生物學(xué)方法,可同步研究所有病毒基因組中所有單核苷酸突變的表型。以流感病毒為例,我們構(gòu)建了覆蓋甲型流感病毒全基... 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞
引言
第一部分 全流感基因組突變文庫(kù)的建立與抗干擾素位點(diǎn)的篩選
    1.1 材料和方法
        1.1.1 病毒和細(xì)胞系
        1.1.2 材料和試劑
        1.1.3 培養(yǎng)基及試劑的配制
        1.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 構(gòu)建覆蓋流感全基因組的單核苷酸突變體文庫(kù)
        1.2.2 干擾素敏感位點(diǎn)的系統(tǒng)性篩選
        1.2.3 干擾素敏感位點(diǎn)的系統(tǒng)性驗(yàn)證
    1.3 討論
第二部分 高干擾素敏感的多點(diǎn)突變病毒株(HIS)的構(gòu)建及體內(nèi)體外的功能驗(yàn)證
    2.1 材料和方法
        2.1.1 細(xì)胞系
        2.1.2 材料和試劑
        2.1.3 培養(yǎng)基及試劑的配制
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 HIS突變株可誘導(dǎo)上調(diào)干擾素通路
        2.2.2 HIS突變株在小鼠體內(nèi)的表型
        2.2.3 HIS突變株可誘導(dǎo)強(qiáng)烈的抗病毒T細(xì)胞反應(yīng)
    2.3 討論
第三部分 HIS可有效抑制體內(nèi)黑色素瘤的增殖
    3.1 材料和方法
        3.1.1 細(xì)胞系
        3.1.2 材料和試劑
        3.1.3 培養(yǎng)基及試劑的配制
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 HIS可在黑色素細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并誘導(dǎo)細(xì)胞死亡
        3.2.2 HIS可在黑色素細(xì)胞內(nèi)上調(diào)干擾素系統(tǒng)
        3.2.3 HIS抑制小鼠內(nèi)黑素瘤成瘤的增殖
    3.3 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷及在學(xué)期間所取得的科研成果



本文編號(hào)：3181485