目的異煙肼（isoniazid,INH）所致肝損傷是臨床常見問題,但其機(jī)制仍未完全闡釋清楚。近年來在INH肝損傷研究中,發(fā)現(xiàn)肝臟法尼醇受體（farnesoid X receptor,FXR）的表達(dá)及活性顯著降低,但肝臟FXR與INH誘導(dǎo)的肝損傷之間的關(guān)系未被闡明。基于此,本文擬通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn),1)明確肝臟FXR活性抑制在INH致肝損傷中的作用;2)從INH及其主要代謝物、INH與維生素B6（vitamin B6,VB6）的加合物吡哆醛異煙酰腙（pyridoxal isonicotinoyl hydrazine,PIH）及VB6中篩選潛在的FXR抑制劑;3)考察補(bǔ)充外源性VB6對INH肝損傷及其藥動學(xué)的影響,為INH肝損傷的防治提供一定的依據(jù)。方法本論文涉及4部分的實(shí)驗(yàn)方法:（1）肝臟核受體FXR抑制效應(yīng)在異煙肼所致肝損傷中的作用研究實(shí)驗(yàn)一:Wistar雄性大鼠采用INH（60、180、300及600 mg/kg）或INH（300mg/kg）加奧貝膽酸（OCA,10 mg/kg）干預(yù)1周后,收集血清、肝臟樣本,測定血清生化指標(biāo)并觀察肝臟病理學(xué)變化;采用HPLC-MS/MS法測定血清及肝臟... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 結(jié)核的發(fā)病率
        1.1.1 全球TB發(fā)病率及死亡率
        1.1.2 中國TB的發(fā)病率及死亡率
    1.2 結(jié)核的治療
    1.3 抗結(jié)核藥物引起的肝損傷
    1.4 異煙肼引起肝損傷的機(jī)制
        1.4.1 INH的體內(nèi)過程
        1.4.2 INH所致的肝損傷及其機(jī)制
    1.5 膽酸鹽在INH肝損傷中的作用
        1.5.1 膽酸鹽的合成及代謝途徑
        1.5.2 BAs的肝細(xì)胞運(yùn)輸
        1.5.3 BAs的肝細(xì)胞調(diào)控
        1.5.4 BAs在 INH肝損傷中的作用
    1.6 本文的立題依據(jù)
第二章 肝臟核受體FXR抑制效應(yīng)在異煙肼所致肝損傷中的作用研究
    2.1 引言
        2.1.1 FXR在肝臟再生中的作用
        2.1.2 FXR在肝臟損傷修復(fù)中的作用
        2.1.3 FXR在肝臟纖維化中的作用
        2.1.4 FXR在膽結(jié)石中的作用
        2.1.5 FXR在膽汁淤積疾病中的作用
        2.1.6 FXR功能缺失與膽汁淤積疾病
        2.1.7 肝臟FXR受體抑制效應(yīng)
        2.1.8 肝臟FXR受體抑制效應(yīng)與INH肝損傷
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.3 不同劑量異煙肼所致大鼠肝損傷及其機(jī)制探究
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 OCA對 INH所致肝損傷的保護(hù)作用
        2.4.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        2.4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.5 基于FXR探究INH對 HepaRG細(xì)胞的膽酸鹽的影響
        2.5.1 實(shí)驗(yàn)方法
        2.5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.6 討論
        2.6.1 INH誘導(dǎo)的大鼠肝損傷的病理及生化特征
        2.6.2 INH可引起肝臟膽酸鹽蓄積
        2.6.3 INH干預(yù)后可使肝臟核受體FXR的表達(dá)及功能降低
        2.6.4 OCA可通過上調(diào)FXR的表達(dá)及功能拮抗INH所致的肝損傷
        2.6.5 INH導(dǎo)致的膽酸鹽依賴性細(xì)胞毒性與FXR有關(guān)
        2.6.6 INH或其代謝物中可能存在潛在的FXR抑制劑
    2.7 結(jié)論
第三章 基于INH及其主要代謝物篩選FXR潛在抑制劑
    3.1 引言
        3.1.1 FXR配體的虛擬篩選
        3.1.2 TR-FRET FXR共激活因子檢測
    3.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
    3.3 分子對接技術(shù)評價(jià)異煙肼及其代謝物與FXR受體間的相互作用
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證INH、ACINH、INA、PIH、VB6對FXR的抑制作用
        3.4.1 實(shí)驗(yàn)方法
        3.4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.5 PIH對大鼠肝臟FXR活性的抑制作用研究
        3.5.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        3.5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.6 討論
        3.6.1 PIH為 FXR的抑制劑
        3.6.2 PIH通過抑制FXR功能而引起早期肝臟BAs蓄積
    3.7 結(jié)論
第四章 VB6在INH肝損傷中的作用研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        4.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 VB6對INH肝損傷的保護(hù)作用
        4.4.2 VB6對INH肝損傷大鼠血清及肝臟膽酸鹽的影響
        4.4.3 VB6對INH肝損傷大鼠肝臟FXR及其靶基因mRNA表達(dá)的影響
        4.4.4 VB6對INH肝損傷大鼠血清及肝臟INH及其代謝物的影響
    4.5 討論
        4.5.1 VB6對INH誘導(dǎo)的肝損傷具有保護(hù)作用
        4.5.2 VB6能顯著降低INH引起的膽酸鹽升高
        4.5.3 VB6能增加FXR基因的表達(dá)及功能
    4.6 結(jié)論
第五章 VB6與INH的藥動學(xué)相互作用
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        5.3.2 HPLC-MS/MS測定血清及組織中INH及其代謝物、VB6 含量
        5.3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.1 VB6與INH的藥動學(xué)相互影響
        5.4.2 VB6對INH代謝物的藥動學(xué)影響
        5.4.3 VB6與INH組織分布的相互影響
        5.4.4 VB6對INH代謝物組織分布的影響
    5.5 討論
        5.5.1 INH與VB6的藥動學(xué)相互影響
        5.5.2 VB6對INH代謝物的藥動學(xué)影響
    5.6 結(jié)論
第六章 總結(jié)
    6.1 研究主要結(jié)論
    6.2 研究展望
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號：3166365