發(fā)布時間：2021-04-21 17:55

　　酒精濫用是一項世界范圍高致殘率和致死率的嚴重健康問題。肝臟不僅是機體負責代謝酒精的重要器官,也同時是受酒精毒害的主要靶點。肝細胞線粒體中的ALDH2是酒精代謝的重要一環(huán),負責清除具有強烈毒性和致癌性的酒精代謝中間產(chǎn)物乙醛。ALDH2在人群中存在基因多態(tài)性,攜帶失活等位基因的個體一旦飲酒后將出現(xiàn)乙醛堆積,且表現(xiàn)出細胞免疫層面的差異。目前,ALDH2和乙醛與T細胞及相關(guān)肝炎的關(guān)系仍不明確;并且肝臟損傷和炎癥本身對肝臟酒精代謝的能力的影響也有待探索,因為基礎(chǔ)肝臟疾病與過量飲酒行為本身在臨床非常常見。第一部分:病毒性肝炎和酒精濫用常常共存并協(xié)同導致慢性肝臟疾病的發(fā)展,但其背后的發(fā)病機制并不明確。病毒性肝炎的一個特征表現(xiàn)是T細胞激活,以對抗、清除病原。ALDH2對于整體酒精代謝過程非常重要;約40%的東亞人群攜帶有ALDH2缺陷,可導致的飲酒后機體內(nèi)乙醛堆積和其他不良反應(yīng)。由于ALHD2缺陷可加劇酒精的毒性作用,探索其是否可增加機體對T細胞肝炎的敏感性很意義。本研究利用Con A誘導T細胞激活,聯(lián)合慢性酒精喂養(yǎng),在ALDH2敲除小鼠和WT小鼠建立T細胞肝炎模型;利用血液生化檢查和免疫組化比較兩組... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：123 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第1章 緒論
    1.1 酒精性肝病研究的必要性
        1.1.1 酒精性肝病的流行與疾病負擔
        1.1.2 酒精性肝病的發(fā)病機制
    1.2 酒精代謝與ALDH2基因多態(tài)性
    1.3 ALDH2與肝臟疾病
        1.3.1 ALDH2與酒精性肝病
        1.3.2 ALDH2與非酒精性脂肪肝
        1.3.3 ALDH2與病毒性肝炎
        1.3.4 ALDH2與肝癌
第2章 酒精抑制乙醛脫氫酶缺陷型個體的T細胞糖代謝及肝炎
    2.1 實驗材料
        2.1.1 動物
        2.1.2 主要試劑和藥品
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 引物序列
        2.1.5 抗體
    2.2 實驗方法
        2.2.1 組織處理和切片制備
        2.2.2 HE染色
        2.2.3 免疫組化和免疫熒光染色
        2.2.4 TUNEL染色
        2.2.5 小鼠原代肝細胞的分離
        2.2.6 小鼠原代淋巴細胞的分離
        2.2.7 人外周血單個核細胞（PBMC）和 T 淋巴細胞分離
        2.2.8 蛋白免疫印跡 （Western blotting）
        2.2.9 組織及細胞總 RNA 提�。═rizol 法）
        2.2.10 q RT-PCR檢測
        2.2.11 流式細胞術(shù)
        2.2.12 統(tǒng)計學分析
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 慢性酒精損傷可加劇小鼠Con A所致肝臟炎癥
        2.3.2 ALDH2基因缺陷可消除慢性酒精損傷對小鼠Con A肝炎的加劇作用
        2.3.3 ALDH2基因缺陷可抑制慢性酒精損傷基礎(chǔ)上Con A所致細胞因子分泌及下游信號激活
        2.3.4 乙醛可抑制Con A對小鼠脾細胞的刺激作用
        2.3.5 乙醛可抑制小鼠T細胞體外有氧糖酵解
        2.3.6 乙醛可抑制人T細胞體外有氧糖酵解
        2.3.7 皮質(zhì)酮降低慢性酒精飲食ALDH2缺陷型小鼠對Con A肝損傷的敏感性
    2.4 討論
第3章 肝臟炎癥及損傷對酒精代謝和飲酒行為的影響
    3.1 實驗材料
        3.1.1 動物和細胞
        3.1.2 主要試劑和儀器
        3.1.3 引物序列
        3.1.4 抗體
    3.2 實驗方法
        3.2.1 m RNA及蛋白分析
        3.2.2 肝損傷模型及酒精灌胃
        3.2.3 雙瓶選擇試驗
        3.2.4 黑夜飲酒試驗
        3.2.5 乙醇及乙醛水平測量
        3.2.6 ADH和ALDH2酶活性測定
        3.2.7 統(tǒng)計學分析
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 CCl4導致的急性和慢性肝損傷對酒精代謝的影響
        3.3.2 LPS導致的急性肝損傷和炎癥對酒精代謝的影響
        3.3.3 肝臟炎癥和損傷對小鼠飲酒行為的影響
        3.3.4 炎癥和氧化應(yīng)激調(diào)控ADH1和ALDH2的表達及酶活性
    3.4 討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[6]Alcoholic hepatitis: The pivotal role of Kupffer cells[J]. Duminda B Suraweera,Ashley N Weeratunga,Robert W Hu,Stephen J Pandol,Richard Hu.  World Journal of Gastrointestinal Pathophysiology. 2015(04)
[7]Research progress and prospects of markers for liver cancer stem cells[J]. Cheng-Pei Zhu,An-Qiang Wang,Hao-Hai Zhang,Xue-Shuai Wan,Xiao-Bo Yang,Shu-Guang Chen,Hai-Tao Zhao.  World Journal of Gastroenterology. 2015(42)
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本文編號：3152216