研究背景急性肺損傷（acute lung injury,ALI）是一種常見的可導致急性呼吸衰竭和死亡的疾病,在過去的幾十年里,ALI的發(fā)病率和死亡率一直居高不下,目前沒有有效的治療手段和藥物。法尼脂X受體（Farnesoid X receptor,FXR）是一種配體依賴的轉錄因子,在調節(jié)膽汁酸代謝中發(fā)揮重要作用,奧貝膽酸（obeticholic acid,OCA）是一種人工合成的FXR激動劑,研究表明FXR亦具有抗炎作用。LPS誘導的ALI模型是目前廣泛被使用的急性肺損傷動物模型,本實驗研究了OCA激活FXR后是否可以減輕LPS誘導的小鼠急性肺損傷,以及是否通過降低炎癥信號通路進而減輕急性肺損傷。研究目的（1）OCA是否減輕了LPS誘導的小鼠急性肺損傷;（2）OCA是否通過抑制炎癥信號進而減輕了LPS誘導的小鼠急性肺損傷。實驗方法將60只雄性小鼠隨機分為6組（每組10只）,分別為Control組（即對照組）,單純OCA組,LPS-2h組,LPS-6h組,LPS+OCA-2h以及LPS+OCA-6h組。單純OCA組小鼠,以及LPS+OCA-2h組和LPS+OCA-6h組小鼠在LPS注射前... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

OCA預處理對LPS暴露引起的小鼠急性肺損傷的影響

安徽醫(yī)科大學博士學位論文41Figure1A.EffectsofOCApre-treatmentonLPS-inducedacutelunginjuryinmice.Sixtymalemicewererandomlydiviededsixgroups.OCAgroupmicewereorallyadministeredwithOCA(5mg/kg,dissolvedincornoil)orcornoiloncedailyfor3consecutivedays.Allmicewerei.p.injectedwithLPS(1.0mg/kg)at1hafterthelastOCAorcornoiltreatment.ControlandOCAgroupmiceweretreatedwiththesamevolumeofnormalsaline.Allmiceweresacrificedat2hor6hafterLPSexposure.Figure1A,HEstaining,magnification×400(N=10).圖1B.小鼠肺損傷組織病理評分。60只雄鼠隨機分成6組，用OCA（i.g.5mg/kg）或玉米油連續(xù)處理三天，1h后腹腔注射LPS（1.0mg/kg），Control組和OCA注射同體積的生理鹽水。LPS組和OCA+LPS組小鼠在LPS注射后2h或6h剖殺。（圖1B）小鼠肺損傷組織病理評分，*P<0.05，**P<0.01，(N=10)。Figure1B.Pathologicalscoresforpulmonaryinjurywereevaluatedineachslide.Sixtymalemicewererandomlydiviededsixgroups.OCAgroupmicewereorallyadministeredwithOCA(5mg/kg,dissolvedincornoil)orcornoiloncedailyfor3consecutivedays.Allmicewerei.p.injectedwithLPS(1.0mg/kg)at1hafterthelastOCAorcornoiltreatment.ControlandOCAgroupmiceweretreatedwiththesamevolumeofnormalsaline.Allmiceweresacrificedat2hor6hafterLPSexposure.Figure1B,Pathologicalscoresforpulmonaryinjurywereevaluatedineach

安徽醫(yī)科大學博士學位論文42slide.Datawereexpressedasmeans±SEMof10samplesfrom10differentmice.*P<0.05,**P<0.01(N=10).3.2OCA預處理減弱LPS暴露引起的肺組織中促炎因子和趨化因子的升高為了探討OCA減輕LPS誘發(fā)的小鼠急性肺損傷的機制，我們首先檢測了小鼠肺組織中的促炎因子、趨化因子和抗炎因子的mRNA水平，研究結果顯示（圖2A），LPS暴露2h，Tnf-αmRNA水平明顯升高(P<0.01)；OCA預處理后，Tnf-α基因表達明顯降低(P<0.01)；LPS暴露6h，Tnf-αmRNA水平仍升高(P<0.01)；OCA預處理后，Tnf-α基因表達有所降低，但與對照組相比，無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。檢測Il-1βmRNA發(fā)現(xiàn)，LPS暴露后2h，肺組織中Il-1βmRNA明顯升高(P<0.01)，OCA預處理后，LPS引起的Il-1β基因表達的上調明顯被抑制(P<0.01)，見圖2B；Il-1βmRNA水平在LPS暴露后6h也是明顯升高的(P<0.01)，但是OCA預處理對LPS暴露后6h引起的Il-1β基因表達的上調無明顯影響(P>0.05)，見圖2B。進一步分析肺組織中促炎因子Tgf-βmRNA水平發(fā)現(xiàn)，Tgf-β基因表達水平在LPS暴露后2h是明顯上調的(P<0.05)，OCA預處理也明顯抑制了Tgf-βmRNA的升高(P<0.05)，見圖2C；但是肺組織中Tgf-β基因表達水平在LPS暴露后6h無明顯改變(P>0.05)，見圖2C。圖2A-2C.OCA預處理對LPS上調肺組織中炎癥因子表達的影響60只雄鼠隨機分成6組，用OCA（i.g.5mg/kg）或玉米油連續(xù)處理三天，1h后均腹腔注射LPS（1.0mg/kg）。Control組和OCA組在LPS處理后立即剖殺，LPS組和OCA+LPS組在LPS注射后2h或6h后剖殺。用


本文編號：3143341