背景與目的:盡管診斷和篩查技術(shù)提高,以及有疫苗可用,宮頸癌仍是世界范圍內(nèi)女性腫瘤相關(guān)死亡的第三大原因,盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是一個(gè)重要的宮頸癌復(fù)發(fā)或死亡的危險(xiǎn)因素。FIGO2018分期系統(tǒng),首次提出病理學(xué)及影像學(xué)檢查結(jié)果用于分期,宮頸癌臨床分期首次向手術(shù)病理分期靠近,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移納入分期,使宮頸癌的診治發(fā)生變革。開展宮頸癌的早期普查,使得宮頸癌盡量可以得到早發(fā)現(xiàn)早治療,但是由于缺乏有效的生物標(biāo)記,在首次手術(shù)之前仍不能準(zhǔn)確評(píng)估是否有淋巴轉(zhuǎn)移,使得一些患者未得到標(biāo)準(zhǔn)的治療。于是尋找宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)的機(jī)制通路和候選基因意義重大。腫瘤的病理EMT過程中導(dǎo)致細(xì)胞的形態(tài)向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)變,被認(rèn)為在癌癥進(jìn)展中起重要作用,并與預(yù)后不良有關(guān)。EMT在宮頸癌的淋巴轉(zhuǎn)移中起重要作用,具有EMT表型的宮頸癌表現(xiàn)出腫瘤進(jìn)展,侵襲轉(zhuǎn)移能力提高,對(duì)化療藥物及放療不敏感。因此一些可以持續(xù)激活宮頸癌細(xì)胞EMT的因子,可以成為評(píng)估宮頸癌預(yù)后的指標(biāo)和作為宮頸癌侵襲轉(zhuǎn)移的治療的靶點(diǎn)。轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子-β家族誘導(dǎo)的EMT在生長(zhǎng)發(fā)育和腫瘤形成中起重要作用。在晚期宮頸癌中TGF-β1在細(xì)胞外的水平增加,用TGF-β1處理宮頸癌細(xì)胞系不僅導(dǎo)致了... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：106 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

宮頸癌EMT有關(guān)的信號(hào)通路

利用公共網(wǎng)站按照RNA干擾序列設(shè)計(jì)原則,針對(duì)人Sema4C基因序列,設(shè)計(jì)多個(gè)RNA干擾靶點(diǎn)序列,依據(jù)前期研究[47]基礎(chǔ)選擇具有最佳的動(dòng)力學(xué)參數(shù)靶點(diǎn)進(jìn)入后續(xù)試驗(yàn)流程;由上海吉?jiǎng)P公司合成含干擾序列的雙鏈DNA,連接在酶切后的RNA干擾載體上。將連接好的產(chǎn)物進(jìn)行轉(zhuǎn)化,對(duì)長(zhǎng)出的克隆進(jìn)行PCR鑒定及測(cè)序比對(duì),正確的克隆即為構(gòu)建成功的目的基因RNA干擾慢病毒載體(見圖2.1)。shRNA慢病毒信息單

按照實(shí)驗(yàn)方法2.2.2和2.2.3通過Realtime-PCR和Western blot分別檢測(cè)三株宮頸癌細(xì)胞中Sema4C mRNA和SEMA4C蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果顯示在基因水平和蛋白水平三株細(xì)胞中都有Sema4C表達(dá),C33A中Sema4C表達(dá)量相對(duì)偏高最高,Hela次之,SiHa中表達(dá)量相比前兩者低,三者之間的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(圖2.3.1)表明Sema4C在宮頸癌細(xì)胞系中普遍表達(dá),本實(shí)驗(yàn)選用相對(duì)表達(dá)量居中的Hela細(xì)胞做為實(shí)驗(yàn)細(xì)胞。2.3.2 Sema4C-shRNA慢病毒的感染效率和封閉效應(yīng)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]《國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）2018癌癥報(bào)告:宮頸癌新分期及診治指南》解讀[J]. 李靜,索紅燕,孔為民.  中國(guó)臨床醫(yī)生雜志. 2019(06)
[2]Twist及YB-1基因表達(dá)上調(diào)與子宮頸癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性[J]. 李旻,關(guān)弘,胡新榮,王鷹,魏茜,楊青鳳.  中華病理學(xué)雜志. 2015 (08)
[3]Semaphorin4C在乳腺癌 子宮內(nèi)膜癌及前列腺癌中的表達(dá)及意義[J]. 陳穎,張磊,劉文欣,王耕辛,吳明富,馬丁,郝權(quán).  中國(guó)腫瘤臨床. 2010(09)

博士論文
[1]初步探討Sema4C在乳腺癌免疫逃逸中的作用[D]. 胥琴.華中科技大學(xué) 2014
[2]SEMA4C調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中腫瘤細(xì)胞和淋巴內(nèi)皮細(xì)胞的交互作用促進(jìn)腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移[D]. 蔣學(xué)鋒.華中科技大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3016178