研究背景和目的:耐順鉑人上皮性卵巢癌和晚期卵巢癌的治療已成為目前臨床醫(yī)師治療上棘手問題,尋找安全有效的抗耐順鉑化療藥物的卵巢癌中藥意義重大。我們前期工作發(fā)現(xiàn)雷公藤內(nèi)酯醇（TP）對耐順鉑藥物的人上皮性卵巢癌有抑制作用,并研究了其相關(guān)抑制機制。腫瘤相關(guān)巨噬細胞（TAMs）可誘導(dǎo)惡性腫瘤的生長,TAMs的極化在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,而PI3K/Akt/NF-κB信號通路在TAMs極化扮演著重要的角色。我們前期工作也發(fā)現(xiàn),TP可阻斷PI3K/AKT信號通路進而抑制耐順鉑人上皮性卵巢癌生長。據(jù)此提出假設(shè):TP可通過抑制PI3K/AKT/NF-κB信號通路促進TAMs向M1型巨噬細胞極化,抑制其向M2型巨噬細胞極化,從而促進卵巢癌細胞凋亡。因此,本實驗從分子水平、細胞水平、組織以及動物水平等多層次探討了TP作用于耐藥上皮性卵巢癌后TAMs極化情況及PI3K/AKT/NF-κB信號通路相關(guān)蛋白的變化,從而驗證了TP通過對PI3K/AKT/NF-κB信號通路調(diào)節(jié)及調(diào)控腫瘤微環(huán)境進而發(fā)揮抗腫瘤作用。這個新視點為TP為耐順鉑化療藥物的上皮性卵巢癌和晚期卵巢癌患者的治療提供實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)。方... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

八P13K/Akt/NF-κB信號通路及其下游因子示意圖

在PI3K/Akt信號通路中,Akt(也稱為PKB)是PI3K最顯著的效應(yīng)物,由Akt1、Akt2、Akt3組成,可調(diào)節(jié)細胞活性、增殖、分化和中間代謝等。研究顯示PI3K/Akt信號通路在TAMs極化中起到重要作用。Akt1激酶對巨噬細胞極化的影響有差異,敲除Akt1基因引起了M1極化,而敲除Akt2導(dǎo)致M2極化,調(diào)節(jié)巨噬細胞的生存。NF-κB是調(diào)節(jié)巨噬細胞誘導(dǎo)的炎癥細胞因子和免疫應(yīng)答中重要的轉(zhuǎn)錄因子,在PI3K/Akt信號通路中也是一個關(guān)鍵信號因子,NF-κB激活可導(dǎo)致M1極化,促進炎性細胞因子分泌[88-90]。PI3K/AKT信號通路又參與了巨噬細胞的極化。如圖十九。本實驗結(jié)果顯示,DDP和TP分別單獨和聯(lián)合作用于A2780/DDP細胞成瘤裸鼠后,各組AKT及P65蛋白表達一致,無明顯差異;而P-AKT及P-P65蛋白表達存在差異。DDP、TP及聯(lián)合組中P-P65和P-AKT蛋白表達低于對照組,而聯(lián)合組中P-P65和P-AKT蛋白表達低于DDP和TP單獨組。PI3K/AKT信號通路是條生存通路,耐藥腫瘤細胞中AKT及NF-κB蛋白未發(fā)生磷酸化,故腫瘤細胞生長旺盛。當(dāng)化療藥物或其他藥物干預(yù)后,信號通路相關(guān)蛋白發(fā)生磷酸化后,M1極化增加,M2極化減少。促凋亡作用機制可能與下調(diào)P-AKT及磷酸化NF-κB蛋白表達有關(guān),從而抑制PI3K/AKT/κB信號生存通路,促進腫瘤凋亡。

鏡下觀察見THP-1細胞培養(yǎng)24小時后,細胞形態(tài)均一圓形懸浮生長,分布均勻,折光度良好,無顆粒,形態(tài)典型,細胞分裂生長明顯,細胞數(shù)量增多,成對數(shù)期生長。隨培養(yǎng)時間延長,細胞數(shù)目過多、生長空間及營養(yǎng)物質(zhì)的相對不足,導(dǎo)致THP-1細胞生長逐步停止,之后細胞數(shù)量下降,細胞分裂消失。如圖一。3.1.2 佛波酯誘導(dǎo)THP-1 細胞結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
[1]雷公藤內(nèi)酯醇聯(lián)合多西紫杉醇對PC-3/MDR細胞耐藥的體外逆轉(zhuǎn)作用[J]. 楊瑜,陳明,朱偉東,張光遠.  中成藥. 2018(12)
[2]雷公藤內(nèi)酯醇-聚乙烯亞胺-環(huán)糊精對乳腺癌多藥耐藥細胞MCF-7/Taxol逆轉(zhuǎn)作用的研究[J]. 王桂芬,李健林,王慧慧,朱益民.  中華普通外科學(xué)文獻(電子版). 2017(03)
[3]p-AKT、FOXO3a、Bim在上皮性卵巢癌中的表達及臨床意義[J]. 胡曉靜,李紅雨,余亞南,劉星爍,韓會會,曹蒙.  中國婦幼保健. 2017(06)
[4]豬苓多糖誘導(dǎo)M2亞型巨噬細胞向M1巨噬細胞轉(zhuǎn)化[J]. 江澤波,趙晉,李思明,胡金萍,曾星.  中國免疫學(xué)雜志. 2015(08)
[5]中醫(yī)藥逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的策略及研究進展[J]. 徐葉峰,劉云霞,沈敏鶴,阮善明.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2015(07)
[6]雷公藤內(nèi)酯醇洗脫支架對小型豬冠狀動脈內(nèi)膜增生及細胞分裂周期基因2、基質(zhì)金屬蛋白酶2表達的影響[J]. 胡德喜,陸東風(fēng),林剛毅.  中國臨床保健雜志. 2014(04)
[7]雷公藤內(nèi)酯醇聯(lián)合紫杉醇對COC1/DDP細胞凋亡的影響及其對PI3K/AKT/GSK3β信號通路的調(diào)控[J]. 劉斐,譚布珍.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2013(12)
[8]雷公藤內(nèi)酯醇與非小細胞肺癌研究進展[J]. 王麗,宋勇.  中國肺癌雜志. 2013(07)
[9]PI3K/AKT/GSK3β信號通路在上皮性卵巢癌細胞增殖與耐藥中的作用[J]. 劉斐,譚布珍.  天津醫(yī)藥. 2013(06)
[10]糖蛋白抗腫瘤作用及其機制的研究進展[J]. 王慧昀,吳杰連,袁野.  寧夏農(nóng)林科技. 2012(06)

碩士論文
[1]雷公藤氯內(nèi)酯醇通過PI3K信號通路誘導(dǎo)肺癌細胞的自噬并增加A549/DDP對順鉑的敏感性[D]. 宋天嬌.福建醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]雷公藤內(nèi)酯醇對人多發(fā)性骨髓瘤耐藥細胞株MM.1R的作用研究[D]. 潘含章.浙江大學(xué) 2006



本文編號：2896567