本文關(guān)鍵詞：Tfh細胞及其相關(guān)因子Bcl-6和IL-21在CRSwNP病人鼻息肉中的表達和意義的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《復旦大學》 2014年

HDAC2在鼻息肉中的表達及在激素治療敏感性中的作用研究

王歡  

【摘要】：目的：研究組蛋白去乙�；�2(HDAC2)在鼻息肉組織中的表達以及鼻黏膜上皮細胞中HDAC2的表達對激素抗炎作用的影響。方法：門診隨訪鼻內(nèi)鏡術(shù)后的鼻息肉患者,共收集成年鼻息肉患者28例,包括13例復發(fā)和15例未復發(fā)的患者。分別采用免疫組織化學方法(SP法)檢測HDAC2在復發(fā)鼻息肉患者、未復發(fā)鼻息肉患者以及11例正常中甲黏膜組織中的表達,并分析吸煙和HDAC2表達的關(guān)系。取正常中甲鼻黏膜,利用0.05%蛋白酶ⅪⅤ消化法分離上皮細胞進行體外培養(yǎng)。在有/無丙酸氟替卡松(Fluticasone Propionate)存在的情況下,利用IL-1p刺激鼻黏膜上皮細胞,24小時后收集細胞上清,利用酶聯(lián)免疫吸附實驗(enzyme linked immunosorbent assay ELISA)測定鼻黏膜上皮細胞分泌白細胞介素-6(IL-6)和白細胞介素(IL-8)的水平。再分別采用HDAC2抑制劑(TSA) +IL-1β和HDAC2特異性小干擾RNA (siRNA)+IL-1β對鼻黏膜上皮細胞進行干預,用western blot檢測siRNA對HDAC2表達的干擾效率,采用ELISA法進一步觀察不同刺激對激素調(diào)控鼻黏膜上皮細胞分泌細胞因子II-6、8的影響。結(jié)果：HDAC2在所有患者的鼻息肉組織和正常黏膜的上皮層和固有層均有表達。HDAC2在鼻息肉組織的黏膜上皮層和固有層表達均顯著低于正常黏膜的表達(P0.05),而HDAC2在復發(fā)鼻息肉患者和未復發(fā)鼻息肉患者中的表達未見顯著性差異。吸煙對鼻息肉組織中HDAC2的表達沒有影響(P0.05)。利用0.05%蛋白酶ⅪV消化分離法能夠成功分離鼻黏膜上皮細胞,倒置顯微鏡下觀察見貼壁生長的鼻黏膜上皮細胞呈鋪路石樣形態(tài);細胞培養(yǎng)約8d后可進行傳代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)2-3代的上皮細胞依然保持上皮細胞的形態(tài)和增殖特性。IL-1β刺激鼻黏膜上皮細胞24h后可激活上皮細胞,表現(xiàn)為上皮細胞分泌IL-6和IL-8水平顯著增高；梯度濃度丙酸氟替卡松(10-6-10-10M)可抑制IL-1 β刺激鼻黏膜上皮細胞釋放IL-6和IL-8；TSA或HDAC2特異性siRNA干預能抑制鼻黏膜上皮細胞HDAC2的表達,從而降低丙酸氟替卡松對鼻黏膜上皮細胞分泌IL-6和IL-8的抑制作用。結(jié)論：HDAC2在鼻息肉組織中的低表達可能在鼻息肉發(fā)生發(fā)展中起到一定的作用。鼻黏膜上皮細胞中HDAC2可能參與介導了激素的抗炎作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R765.25
【目錄】：

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