本文關(guān)鍵詞：α-突觸核蛋白自噬性降解障礙在環(huán)境毒素魚藤酮導(dǎo)致帕金森癥中機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

博士學(xué)位論文 論文題目 α-突觸核蛋白自噬性降解障礙在環(huán)境毒素 魚藤酮導(dǎo)致帕金森癥中機(jī)制研究 研究生姓名 吳 鋒 指導(dǎo)教師姓名 秦正紅 專 業(yè) 名 稱 藥理學(xué) 研 究 方 向 神經(jīng)藥理學(xué) 論文提交日期 2015 年3 月 α-突觸核蛋白自噬性降解障礙在環(huán)境毒素魚藤酮導(dǎo)致帕金森癥中機(jī)制研究 中文摘要 α-突觸核蛋白自噬性降解障礙在環(huán)境毒素魚藤酮導(dǎo)致帕 金森癥中機(jī)制研究 中文摘要 目的：環(huán)境毒素魚藤酮能夠引發(fā) α-突觸核蛋白 （α-synuclein ）在中腦黑質(zhì)區(qū)多巴 胺神經(jīng)元中蓄積、導(dǎo)致多巴胺神經(jīng)元發(fā)生退行性病變，其分子機(jī)制尚不完全明確；我 們證明魚藤酮能夠通過(guò)損傷溶酶體，引起自噬流阻滯，蛋白降解障礙，α-synuclein 在 中腦黑質(zhì)區(qū)多巴胺神經(jīng)元內(nèi)堆積后導(dǎo)致帕金森癥發(fā)病。 方法：我們?cè)陂L(zhǎng)期魚藤酮皮下注射 Lewis 大鼠制備的帕金森大鼠模型和多巴胺能 細(xì)胞系 PC12 細(xì)胞魚藤酮體外干預(yù)模型基礎(chǔ)上，觀察魚藤酮引起的 α-synuclein 自噬降 解障礙并探討其作用機(jī)制。在體內(nèi)模型中，我們分別通過(guò)免疫組織化學(xué)法觀察大鼠中 腦黑質(zhì)區(qū)多巴胺神經(jīng)元數(shù)量，免疫印跡法檢測(cè)紋狀體和腹側(cè)中腦區(qū)酪氨酸羥化酶 （tyrosine hydroxylase ，，TH ）含量，動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)儀進(jìn)行行為學(xué)研究，明確帕金森癥 動(dòng)物造模成功。然后通過(guò)形態(tài)學(xué)檢測(cè)大鼠中腦黑質(zhì)區(qū)多巴胺神經(jīng)元內(nèi) α-synuclein 聚 集體，電鏡觀察自噬體數(shù)量，腹側(cè)中腦取材后 PCR 法檢測(cè) α-synuclein 的mRNA 水平， 免疫印跡法檢測(cè) α-synuclein 以及自噬標(biāo)記物 microtubule-associated protein 1 light chain 3-II （LC3-II ），Beclin 1 ，和 p62 等蛋白水平。免疫熒光法雙標(biāo) TH/α-synuclein， TH/LAMP2，TH/cathepsin D 。在體外模型中，我們使用 CCK8 法檢測(cè) PC12 細(xì)胞活 力確定魚藤酮

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