本文關(guān)鍵詞：T細(xì)胞受體變化對(duì)慢乙肝抗病毒治療結(jié)局的影響　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 慢性乙型肝炎 抗病毒治療 e抗原血清學(xué)轉(zhuǎn)換 T細(xì)胞受體 高通量測(cè)序 互補(bǔ)決定區(qū)3

【摘要】：研究背景急性乙型肝炎患者中HBV特異性CD4+及CD8+T細(xì)胞通過(guò)其表面的T細(xì)胞受體(TCR)識(shí)別多個(gè)病毒抗原表位,產(chǎn)生多克隆的強(qiáng)效免疫應(yīng)答,控制HBV感染;而在慢性乙型肝炎(CHB)患者的HBV特異性T細(xì)胞功能耗竭。核苷(酸)類似物(NUC)抗病毒治療降低病毒載量及HBV抗原水平,T細(xì)胞功能得到短暫性部分恢復(fù)。但研究方法局限于組織相容性抗原-肽染色、細(xì)胞因子檢測(cè)等方法。而CHB患者其TCR基因表達(dá)變化與抗病毒治療結(jié)局的關(guān)系仍未明確。研究目的該研究采用無(wú)偏差的5'端cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(RACE)擴(kuò)增TCRβ鏈(TRB)片段以及高通量測(cè)序,深度分析發(fā)生乙肝e抗原(HBeAg)血清學(xué)轉(zhuǎn)換與否的CHB患者在抗病毒治療早期其外周血CD4+及CD8+T細(xì)胞TRBCDR3的差異;并分析TRB CDR3動(dòng)態(tài)變化與治療期間HBV DNA以及HBV抗原水平的相關(guān)關(guān)系。研究方法1.研究對(duì)象所有研究對(duì)象來(lái)源于一項(xiàng)替比夫定治療臨床隊(duì)列的22例HBeAg陽(yáng)性CHB患者。收集治療0、12、24、52、104周血清及外周抗凝血。根據(jù)治療52周及104周的應(yīng)答情況分為完全應(yīng)答組(CR,n=10)及非完全應(yīng)答組(NCR,n=12)。CR組定義為治療52周及104周HBeAg發(fā)生血清學(xué)轉(zhuǎn)換及HBV DNA水平300 copies/mL;NCR組定義為治療52周及104周HBeAg維持陽(yáng)性及HBV DNA水平300 copies/mL;2.分離治療基線、12周、24周外周血單個(gè)核細(xì)胞,流式細(xì)胞儀分選CD4+及CD8+T細(xì)胞,提取總RNA;5'RACE技術(shù)及巢式PCR擴(kuò)增TRB鏈基因全長(zhǎng);構(gòu)建測(cè)序文庫(kù)及Illumina Hiseq上機(jī)測(cè)序;3.測(cè)序數(shù)據(jù)處理及分析采用免疫組庫(kù)分析軟件MiXCR進(jìn)行V、D、J基因片段比對(duì),識(shí)別出有效TRB及CDR3序列。相同CDR3序列稱為一種克隆型。根據(jù)兩兩時(shí)間點(diǎn)每種克隆型頻率變化,分為消失、下降、持續(xù)、增生及新增5類克隆型。結(jié)果1.CHB患者抗病毒治療過(guò)程中外周血TRB文庫(kù)多樣性分析CR組在治療過(guò)程中其CD4細(xì)胞TCR文庫(kù)多樣性比NCR組低,尤其在12周(VDJ組合數(shù)量,P=0.035;CDR3氨基酸克隆型數(shù)量,P=0.03;Shannon指數(shù)值,P=0.041);而CR組CD8細(xì)胞TCR文庫(kù)多樣性比NCR組高,尤其在基線(CDR3氨基酸克隆型數(shù)量,P=0.041)�？v向分析發(fā)現(xiàn),無(wú)論CD4或CD8細(xì)胞,CHB患者TRB文庫(kù)多樣性在治療基線至12周均呈下降趨勢(shì),而在CR組患者,尤其在CR組的CD4克隆中(Shannon指數(shù),P=0.022)更為顯著。2.抗病毒治療過(guò)程中TRB CDR3克隆動(dòng)態(tài)變化通過(guò)分析基線、治療12周及24周兩兩時(shí)間點(diǎn)克隆型的動(dòng)態(tài)變化,發(fā)現(xiàn)在CD4+及CD8+T細(xì)胞中,CR組持續(xù)克隆型比例顯著低于NCR組(P0.001);CR組新增與增生克隆型比例顯著高于NCR組,尤其在基線與治療12周期間(P=0.021)。CR組新增與增生CD4克隆型的累積頻率低于NCR組,在CD8亞群中兩組無(wú)差異,提示CR組患者的CD4+以及CD8+T細(xì)胞存在多克隆增生,但每種克隆型增生個(gè)數(shù)較NCR組受限。3.HBV血清學(xué)指標(biāo)水平與T細(xì)胞克隆動(dòng)態(tài)變化的相關(guān)分析治療12周時(shí)CHB患者乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、HBeAg及HBVDNA水平與CD4、CD8持續(xù)克隆型比例呈正相關(guān)關(guān)系;與新增及增生克隆型比例呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(Spearman correlation,P0.05)。治療12周較基線時(shí)HBeAg水平下降幅度與CD4、CD8持續(xù)克隆型比例呈負(fù)相關(guān)關(guān)系;與新增及增生克隆型比例呈正相關(guān)關(guān)系(P0.05)。結(jié)論在抗病毒治療早期T細(xì)胞針對(duì)多表位的強(qiáng)效克隆增生與CHB患者發(fā)生HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換、HBV抗原及病毒載量下降相關(guān)。NUC治療早期T細(xì)胞克隆的動(dòng)態(tài)變化對(duì)CHB患者T細(xì)胞應(yīng)答重建具有重要作用。將來(lái),NUC聯(lián)合免疫調(diào)節(jié)治療的策略,如過(guò)繼性回輸含有針對(duì)多表位嵌合HBV特異性TCR的T細(xì)胞,可有望重建T細(xì)胞功能,實(shí)現(xiàn)對(duì)HBV完全的控制。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R512.62

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;動(dòng)物抗病毒防御新機(jī)制[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年06期

2 ;日本開(kāi)發(fā)出抗病毒新材料[J];上海生物醫(yī)學(xué)工程;2003年04期

3 劉士敬;;抗病毒治療中的“右傾防守”和“左傾冒進(jìn)”[J];肝博士;2010年06期

4 鄭應(yīng)良;尹玲;李春生;;2例艾滋病患者抗病毒治療過(guò)程報(bào)告[J];中國(guó)城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生;2013年04期

5 ;蘑菇可抗病毒[J];浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志;2004年08期

6 邵鳴;肖玉珍;;抗病毒治療的“抓兩頭,看中央”[J];肝博士;2010年04期

7 蔣偉;白雪帆;;抗病毒肽結(jié)構(gòu)研究進(jìn)展[J];傳染病信息;2011年03期

8 宋艷華;;慢性乙型重型肝炎患者抗病毒治療療效觀察[J];中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2012年09期

9 秦紅英;趙清霞;何云;徐麗霞;;艾滋病患者抗病毒治療依從性的干預(yù)措施[J];解放軍護(hù)理雜志;2012年11期

10 邱濤;李建軍;劉曉燕;徐金水;丁萍;徐曉琴;胡海洋;郭宏雄;傅更鋒;還錫萍;羊海濤;;江蘇省171例艾滋病抗病毒治療死亡病例資料的回顧性分析[J];中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志;2012年11期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 蔡芝芳;趙文學(xué);呂芳玲;張朝俠;尚鳳梅;;抗病毒治療在失代償期乙型肝炎肝硬化的臨床應(yīng)用研究[A];第五屆全國(guó)肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

2 劉永梅;李靜;;193例乙肝病毒B型與C型感染者有無(wú)接受抗病毒治療的比較[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)全國(guó)第十四次肝膽病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 韓寧;梁洪遠(yuǎn);;艾滋病患者二線抗病毒治療的短期療效觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四次全國(guó)艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國(guó)熱帶病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

4 鄒懷賓;朱理珉;梁樹(shù)人;李嘉;戴晨陽(yáng);徐健;;乙型肝炎病毒基因型與抗病毒治療療效關(guān)系[A];第一屆全國(guó)疑難重型肝病大會(huì)、第四屆全國(guó)人工肝及血液凈化學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2008年

5 陳信生;范瑞強(qiáng);李紅毅;yす，

本文編號(hào)：1417735