本文關(guān)鍵詞：EphB4通過(guò)骨膜蛋白促進(jìn)CTLA4修飾的MSCs有效成骨的機(jī)制研究　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：研究背景臨床上,大段骨缺損的治療一直是骨科醫(yī)生面臨的一大難題,而利用自體間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)作為種子細(xì)胞所構(gòu)建的組織工程骨(Tissue engineering bone,TEB)在治療該類疾病中取得了良好療效。然而,自體MSCs的獲得要受患者的個(gè)體差異及體外培養(yǎng)時(shí)間的影響,不能很好的滿足臨床隨取隨用的需求。因此,探索異體MSCs能否作為TEB的理想種子細(xì)胞成了該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。目前,針對(duì)異體MSCs的免疫原性一直沒(méi)有定論,但有報(bào)道指出,在移植過(guò)程中,異體MSCs仍然會(huì)激活宿主的免疫系統(tǒng),造成移植失敗。基于此,我們?cè)谇捌谘芯恐袑⒓?xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4免疫球蛋白(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4immuoglobulin,CTLA4-Ig)基因?qū)隡SCs中,發(fā)現(xiàn)其在異體移植時(shí)具有良好的成骨效果,但具體機(jī)制不明。近年研究發(fā)現(xiàn),促紅細(xì)胞生成素產(chǎn)生的肝細(xì)胞受體(Erythropoietin-producing hepatocyte receptors,Ephs)和其配體肝配蛋白(Eph receptor interacting proteins,ephrin)在骨組織的新陳代謝中扮演了重要角色,其中以EphB4/ephrin B2軸的調(diào)控作用最為關(guān)鍵。EphB4/ephrin B2軸具有雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用,分別調(diào)控著成骨細(xì)胞的骨生成作用和破骨細(xì)胞的骨吸收作用。該信號(hào)的激活對(duì)于骨重建區(qū)成骨細(xì)胞及其前體細(xì)胞的進(jìn)一步分化和成熟至關(guān)重要。同時(shí),組織微環(huán)境對(duì)于組織的再生重建同樣十分重要。組織微環(huán)境主要由細(xì)胞與胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)構(gòu)成,而細(xì)胞與ECM的相互作用可以調(diào)控細(xì)胞的增殖、遷移和分化。在骨組織中,骨膜蛋白(periostin,POSTN)被證實(shí)參與了骨組織ECM的構(gòu)成,是行使細(xì)胞─ECM相互作用的關(guān)鍵蛋白,可通過(guò)結(jié)合整合素(Integrin)來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)外間生物信號(hào)的傳導(dǎo)功能,促進(jìn)骨組織的再生。綜上所述,我們推測(cè)免疫系統(tǒng)的激活將嚴(yán)重影響骨組織中EphB4/ephrin B2軸的調(diào)節(jié)作用,同時(shí)破壞POSTN與細(xì)胞之間的生物信號(hào)傳導(dǎo),而CTLA4的存在能夠逆轉(zhuǎn)這種趨勢(shì)。本次研究通過(guò)利用CTLA4修飾的MSCs來(lái)構(gòu)建TEB,一方面采用不同的動(dòng)物移植模型來(lái)驗(yàn)證成骨修復(fù)效果,另一方面在體外利用免疫激活共培養(yǎng)體系驗(yàn)證其對(duì)于MSCs-CTLA4中EphB4和POSTN表達(dá)的影響,并揭示EphB4與POSTN之間的關(guān)系,最后探索Eph B4通過(guò)POSTN促進(jìn)MSCs-CTLA4成骨分化的機(jī)制,旨在為進(jìn)一步闡明MSCs-CTLA4在異體移植中有效成骨的具體機(jī)制提供理論依據(jù)。第一部分Eph B4在CTLA4修飾的MSCs異位成骨中的作用方法:1.密度梯度離心法分離MSCs,采用DBM雙面接種法構(gòu)建TEB,然后將TEB置于成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)14天。在植入小鼠體內(nèi)前更換常規(guī)培養(yǎng)基,利用CTLA4腺病毒載體進(jìn)行感染,構(gòu)建表達(dá)CTLA4的TEB。2.建立小鼠股骨旁TEB異位移植模型,Micro-CT分析異位成骨情況。后續(xù)制備移植區(qū)域組織切片,HE及Masson染色觀察組織形態(tài),免疫組化染色觀察CTLA4及Eph B4的表達(dá)情況。3.體外利用植物血凝素(phytohaemagglutinin,PHA)刺激外周血單核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)來(lái)建立免疫激活微環(huán)境,然后將MSCs或MSCs-CTLA4置于其中共培養(yǎng),建立免疫激活共培養(yǎng)體系。4.ELISA測(cè)定共培養(yǎng)體系中IL-2和IFN-γ的表達(dá)情況。Q-PCR和Western blotting實(shí)驗(yàn)測(cè)定免疫激活共培養(yǎng)前后MSCs及MSCs-CTLA4中Eph B4的表達(dá)情況。5.ephrinB2-FC激活EphB4后,利用Q-PCR、免疫熒光、特殊染色法測(cè)定相關(guān)成骨標(biāo)志物表達(dá)情況。6.為了探索EphB4促進(jìn)MSCs成骨分化的具體機(jī)制,我們構(gòu)建了Eph B4過(guò)表達(dá)及si RNA載體作為對(duì)照組,利用Western blotting實(shí)驗(yàn)測(cè)定Eph B4激活后相應(yīng)信號(hào)蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:1.普通光鏡觀察結(jié)果顯示,接種了MSCs的DBM可見(jiàn)細(xì)胞形成膜樣結(jié)構(gòu)并附著于DBM支架上;熒光顯微鏡觀察結(jié)果顯示在MSCs-CTLA4構(gòu)建的DBM中可見(jiàn)細(xì)胞發(fā)出綠色熒光,證明攜帶CTLA4基因的腺病毒感染TEB成功。2.小鼠股骨旁TEB異位移植區(qū)組織切片中,免疫組化測(cè)定CTLA4的陽(yáng)性表達(dá)僅在DBM+MSCs-CTLA4組中可見(jiàn),其余組均為陰性染色。免疫熒光染色結(jié)果顯示Eph B4在DBM+MSCs-CTLA4組中的表達(dá)量顯著高于其余組。HE、Masson染色和Micro-CT三維重建結(jié)果均顯示相對(duì)于其他組,DBM+MSCs-CTLA4組中可見(jiàn)明顯的新生骨組織區(qū)。相關(guān)骨生成數(shù)據(jù)分析結(jié)果顯示DBM+MSCs-CTLA4組在新生骨量與骨體積比(BV/TV),骨小梁數(shù)量(Tb.N)和骨小梁厚度(Tb.Th)中顯著高于其余三組,而在骨小梁分離度(Tb.Sp)中顯著低于其余三組(P0.05)。3.未激活狀態(tài)下的PBMCs在培養(yǎng)基中呈分散排布,當(dāng)加入PHA刺激后,PBMCs中的T淋巴細(xì)胞母細(xì)胞化,成團(tuán)聚集在一起。光鏡下顯示MSCs-CTLA4共培養(yǎng)組中PBMCs的聚集程度顯著低于MSCs共培養(yǎng)組。ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示IL-2和IFN-γ在MSCs-CTLA4共培養(yǎng)組中的表達(dá)水平顯著低于MSCs共培養(yǎng)組(P0.05)。4.Western blotting結(jié)果顯示在免疫激活微環(huán)境中,Eph B4在MSCs中的表達(dá)水平顯著下調(diào),而在MSCs-CTLA4中則維持了正常水平,Q-PCR結(jié)果趨勢(shì)與其一致(P0.05)。5.各組細(xì)胞經(jīng)ephrinB2-FC刺激后,Q-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)錄因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨鈣素(Osteocalcin,OCN)和I型膠原(Collagen I,COL1)在正常培養(yǎng)情況下均有顯著增高,而在免疫激活微環(huán)境下僅在MSCs-CTLA4組中能觀察到該現(xiàn)象。OCN熒光染色、ALP及茜素紅染色結(jié)果顯示在免疫激活共培養(yǎng)后,ephrin B2-FC的刺激僅能上調(diào)MSCs-CTLA4中OCN、ALP和鈣結(jié)節(jié)的表達(dá)強(qiáng)度,積分光密度值(Integrated option density,IOD)分析結(jié)果也與觀察趨勢(shì)一致(P0.05)。6.Western blotting結(jié)果顯示MSCs在經(jīng)ephrin B2-FC刺激后,其β-catenin表達(dá)逐漸升高,且伴隨Runx2和COL1的表達(dá)升高。我們進(jìn)一步利用Eph B4過(guò)表達(dá)和siRNA腺病毒載體來(lái)設(shè)立對(duì)照組,在激活Eph B4后的檢測(cè)結(jié)果顯示MSCs組、空載病毒組和Eph B4過(guò)表達(dá)組中糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)的磷酸化水平增高,同時(shí)活性β-catenin的表達(dá)水平也隨之增高,伴隨Runx2和COL1的表達(dá)也增高。而上述趨勢(shì)在Eph B4-si RNA組中則未觀察到。同時(shí)在免疫激活共培養(yǎng)后,上述效應(yīng)也只能在MSCs-CTLA4中觀察到,而在MSCs組中也未能觀察到。第二部分Eph B4信號(hào)上調(diào)MSCs中骨膜蛋白的表達(dá)方法:1.制作小鼠股骨旁TEB異位移植區(qū)組織切片,免疫組化測(cè)定POSTN表達(dá)情況。2.免疫細(xì)胞化學(xué)測(cè)定POSTN在MSCs中表達(dá)定位情況,同時(shí)Western blotting、Q-PCR、ELISA測(cè)定Eph B4激活后POSTN的蛋白、基因表達(dá)及體外分泌情況。3.利用NVP-BHG-712、Integrinαvβ3封閉抗體、Eph B4過(guò)表達(dá)及si RNA載體來(lái)設(shè)立對(duì)照組,Q-PCR及特殊染色法檢測(cè)Eph B4激活后各組細(xì)胞的成骨分化情況,Western blotting檢測(cè)相關(guān)信號(hào)分子表達(dá)情況。結(jié)果:1.免疫組化染色結(jié)果顯示MSCs-CTLA4組中POSTN的染色顯著強(qiáng)于其余組,IOD分析結(jié)果與肉眼觀察一致(P0.05)。2.免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示POSTN定位于MSCs胞質(zhì)中。各組經(jīng)ephrinB2-FC刺激后,MSCs組和EphB4過(guò)表達(dá)組中POSTN的蛋白,mRNA和培養(yǎng)基中的蛋白分泌水平都顯著高于其余組(P0.05),而Eph B4-siRNA組和NVP-BHG-712組則與空白組表達(dá)水平相近。3.Q-PCR結(jié)果顯示Runx2、Osterix、COL1和ALP的m RNA水平在ephrin B2-FC刺激組、Eph B4過(guò)表達(dá)組和POSTN刺激組中都有明顯增高(P0.05),而在BHG712阻斷劑組、Integrinαvβ3封閉組和Eph B4-siRNA組中上調(diào)趨勢(shì)不明顯。ALP及茜素紅染色及IOD分析結(jié)果與上述各成骨標(biāo)志物的mRNA表達(dá)趨勢(shì)一致。Western blotting結(jié)果顯示MSCs在ephrin B2-FC刺激下,單純刺激組和Eph B4過(guò)表達(dá)組GSK-3β的磷酸化水平均增高,伴隨β-catenin、Runx2和COL1的表達(dá)增高,而Eph B4-siRNA組、Integrinαvβ3封閉組和BHG712阻斷劑組未觀察到此現(xiàn)象。第三部分骨膜蛋白在CTLA4修飾的MSCs成骨修復(fù)中的作用及機(jī)制研究方法:1.建立兔橈骨缺損TEB原位移植模型,X-ray及Micro-CT分析成骨修復(fù)情況。后續(xù)制備移植區(qū)域組織切片,HE及Masson染色觀察組織形態(tài),免疫組化染色觀察POSTN及β-catenin的表達(dá)情況。2.免疫細(xì)胞化學(xué)測(cè)定POSTN在MSCs中表達(dá)定位情況,Q-PCR和Western blotting實(shí)驗(yàn)測(cè)定免疫激活共培養(yǎng)前后MSCs及MSCs-CTLA4中POSTN的表達(dá)情況。3.ALP及茜素紅染色測(cè)定MSCs及MSCs-CTLA4在免疫激活共培養(yǎng)前后對(duì)于POSTN成骨誘導(dǎo)效應(yīng)的反應(yīng)。4.Western blotting實(shí)驗(yàn)測(cè)定POSTN促進(jìn)MSCs成骨分化的具體機(jī)制結(jié)果:1.X-ray及Micro-CT結(jié)果均顯示8周后DBM+MSCs-CTLA4組修復(fù)區(qū)新生骨塑形明顯優(yōu)于其余組,且橫斷面顯示MSCs-CTLA4組修復(fù)區(qū)橈骨髓腔已完全再通,而其余兩組仍有不同程度的阻塞。相關(guān)骨生成數(shù)據(jù)分析結(jié)果顯示DBM+MSCs-CTLA4組中BMD,BV及BV/TV均高于其余兩組(P0.05)。免疫組化測(cè)定POSTN及β-catenin的表達(dá)強(qiáng)度在DBM+MSCs-CTLA4組中顯著高于其余兩組,IOD分析結(jié)果同觀察一致(P0.05)。2.免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示MSCs及MSCs-CTLA4中的POSTN陽(yáng)性染色均定位于胞質(zhì)中。Western blotting及Q-PCR結(jié)果顯示在免疫激活共培養(yǎng)條件下,MSCs中POSTN的表達(dá)相對(duì)普通培養(yǎng)條件來(lái)說(shuō)顯著降低(P0.05),而MSCs-CTLA4組中POSTN的表達(dá)則保持在正常水平。3.ALP及茜素紅染色結(jié)果顯示,POSTN的刺激可以顯著提高M(jìn)SCs及MSCs-CTLA4中兩者的染色程度,而Integrinαvβ3封閉組可見(jiàn)該效應(yīng)被抑制。同時(shí)在免疫激活共培養(yǎng)后,POSTN上調(diào)ALP及鈣結(jié)節(jié)生成的效應(yīng)僅在MSCs-CTLA4組中可見(jiàn),而在MSCs組中未觀察到此現(xiàn)象。IOD分析結(jié)果與觀察結(jié)果一致(P0.05)。4.Western blotting結(jié)果顯示POSTN的刺激可上調(diào)MSCs組和MSCs-CTLA4組中低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白(lipoprotein-related protein,LRP)6的磷酸化水平,同時(shí)p-GSK-3β的水平也隨之增高,伴隨β-catenin和Runx2的表達(dá)上調(diào),而Integrinαvβ3抑制劑組則未見(jiàn)此效應(yīng)發(fā)生。在免疫激活共培養(yǎng)后,該效應(yīng)只在MSCs-CTLA4組中可見(jiàn),而在MSCs組中未觀察到此現(xiàn)象。全文結(jié)論1.MSCs-CTLA4構(gòu)建的TEB在小鼠股骨旁異位移植模型中能夠有效成骨,且Eph B4表達(dá)顯著高于其余組。體外免疫激活微環(huán)境可下調(diào)MSCs中Eph B4的表達(dá)水平,而CTLA4的存在能夠維持MSCs中EphB4的表達(dá)。同時(shí)EphB4可通過(guò)與Wnt信號(hào)通路發(fā)生間接交聯(lián)反應(yīng)來(lái)促進(jìn)MSCs的成骨分化。2.EphB4的激活可以上調(diào)MSCs中POSTN的表達(dá)水平。3.MSCs-CTLA4構(gòu)建的TEB在兔橈骨缺損原位移植模型中成骨修復(fù)效果顯著,且移植區(qū)修復(fù)區(qū)POSTN的表達(dá)量顯著高于對(duì)照組。體外免疫激活微環(huán)境可下調(diào)MSCs中POSTN的表達(dá)水平,且能抑制POSTN對(duì)于MSCs的成骨誘導(dǎo)效應(yīng),而CTLA4的存在能夠逆轉(zhuǎn)該趨勢(shì)。4.POSTN可與Wnt信號(hào)通路發(fā)生直接交聯(lián)反應(yīng),通過(guò)激活Wnt/LRP6/GSK-3β/β-catenin通路來(lái)促進(jìn)MSCs的成骨分化。
[Abstract]:Background: clinical, treatment of large bone defects has been a major problem faced by the Department of orthopedics, autologous mesenchymal stem cells (mesenchymal stem cells, MSCs) as seed cells in bone tissue engineering constructs (Tissue engineering bone, TEB) has a good effect in the treatment of such diseases. However, the acquisition of autologous MSCs is affected by individual differences in the patient and the time of culture in vitro, which can not meet the needs of clinical follow-up. Therefore, it is a hot topic in this field to explore whether allogeneic MSCs can be used as ideal seed cell of TEB. At present, the immunogenicity of allogeneic MSCs has not been conclusive. However, it has been reported that allograft MSCs still activates the host immune system and causes graft failure during transplantation. Based on this, we will study in the early stage of cytotoxic T lymphocyte antigen 4 immunoglobulin (cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4immuoglobulin, CTLA4-Ig) gene into MSCs, we find that it has in the allograft bone effect is good, but the specific mechanism is unknown. In recent years, the study found that hepatocyte receptor erythropoietin produced (Erythropoietin-producing hepatocyte receptors, Ephs) and its ligand (Eph protein receptor interacting with liver proteins, ephrin) plays an important role in bone tissue in the The new supersedes the old., regulation of EphB4/ephrin B2 axis is the key. The EphB4/ephrin B2 axis has bi-directional signal transduction, which regulates the osteogenesis of osteoblasts and the bone resorption of osteoclasts. The activation of this signal is essential for further differentiation and maturation of osteoblasts and their precursor cells in the bone reconstruction area. At the same time, the organization of microenvironment is also important for the regeneration and reconstruction of the tissue. The tissue microenvironment is mainly composed of extracellular matrix (ECM), and the interaction between cell and ECM can regulate cell proliferation, migration and differentiation. In bone tissue, Periostin (POSTN) has been proved to be involved in the constitution of ECM in bone tissue, and it is the key protein to exercise cell ECM interaction. It can mediate intracellular signal transduction between cells and promote the regeneration of bone tissue by combining integrin (Integrin). In conclusion, we speculate that activation of the immune system will seriously affect the regulation of EphB4/ephrin B2 axis in bone tissue, and destroy the biological signal transduction between POSTN and cells. The presence of CTLA4 can reverse this trend. This study through the use of modified CTLA4 MSCs to build TEB, using a different animal transplantation model to verify the bone repairing effect, on the other hand, the co culture system to verify its influence on the expression of EphB4 and POSTN in MSCs-CTLA4, in vitro by use of immune activation and reveal the relationship between EphB4 and POSTN, and finally explore the Eph B4 through the promotion of POSTN MSCs-CTLA4 into the mechanism of osteoblast differentiation, in order to provide theoretical basis for the further elucidation of the mechanisms of MSCs-CTLA4 in allograft bone effectively. The first part is the role of Eph B4 in CTLA4 modified MSCs ectopic osteogenesis. Methods: 1. density gradient centrifugation was used to separate MSCs, TEB was constructed by DBM double inoculation method, and TEB was placed in osteogenic induction medium for 14 days. The conventional culture medium was replaced before the mice were implanted, and the CTLA4 adenovirus vector was used to infect and construct the TEB expressing CTLA4. 2. the model of TEB heterotopic transplantation of the para femur in mice was established, and the ectopic osteogenesis was analyzed by Micro-CT. The tissue section of the transplanted region was prepared, the tissue morphology was observed by HE and Masson staining, and the expression of CTLA4 and Eph B4 was observed by immunohistochemical staining. 3. in vitro, peripheral blood mononuclear cell (PBMCs) was stimulated by phytohaemagglutinin (PHA) to establish immune activated microenvironment, then MSCs or MSCs-CTLA4 were placed in co culture, and an immune activated co culture system was established. 4.ELISA was used to determine the expression of IL-2 and IFN- gamma in the co culture system. The expression of Eph B4 in MSCs and MSCs-CTLA4 before and after immuno activation co culture was measured by Q-PCR and Western blotting. After 5.ephrinB2-FC activation of EphB4, the expression of related bone markers was measured by Q-PCR, immunofluorescence and special staining. 6., in order to explore the specific mechanism of EphB4 promoting MSCs osteogenic differentiation, we constructed Eph B4 overexpression and Si RNA vector as control group, and detected the expression of corresponding signal proteins after Eph B4 activation by Western blotting test. Results: 1. ordinary optical microscope showed that the inoculation of DBM cells visible the formation of MSCs membrane like structure and attached to the DBM scaffold; fluorescence microscope observation results show that the construction of MSCs-CTLA4 DBM cells showed green fluorescence, carrying CTLA4 gene of adenovirus infection TEB. 2. in the tissue sections of the TEB heterotopic transplantation area of the femur, the positive expression of CTLA4 was detected in the DBM+MSCs-CTLA4 group, while the rest of the groups were negative staining. The results of immunofluorescence staining showed that the expression of Eph B4 in the DBM+MSCs-CTLA4 group was significantly higher than that in the other groups. The results of HE, Masson staining and Micro-CT 3D reconstruction showed that compared with the other groups, the new bone tissue was visible in the DBM+MSCs-CTLA4 group. Correlation analysis of bone formation data showed that the DBM+MSCs-CTLA4 group was significantly higher in the new bone mass and bone volume ratio (BV/TV), trabecular bone mass (Tb.N) and small bone Liang Houdu (Tb.Th) than those in the other three groups, while in trabecular bone separation (Tb.Sp) was significantly lower than that in the other three groups (P0.05). 3. PBMCs in the inactivated state was dispersed in the medium, and when PHA was stimulated, the T lymphocyte blends in PBMCs and clustered together. The degree of aggregation of PBMCs in the MSCs-CTLA4 co culture group was significantly lower than that in the MSCs co culture group. The results of ELISA test showed that the expression level of IL-2 and IFN- y in the co culture group of MSCs-CTLA4 was significantly lower than that in the co culture group.
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R68

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5 袁風(fēng)紅;鄒耀紅;高愷言;俞可佳;;地塞米松對(duì)體外人骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖及成骨分化的影響[A];全國(guó)自身免疫性疾病專題研討會(huì)暨第十一次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

6 宋忠臣;束蓉;董家辰;李松;;低氧對(duì)牙周膜成纖維細(xì)胞增殖和成骨分化的影響[A];第十次全國(guó)牙周病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2014年

7 董家辰;束蓉;宋忠臣;;炎癥微環(huán)境對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞增殖與成骨分化的影響[A];第十次全國(guó)牙周病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2014年

8 孫楠;楊力;張振;張樺;陳宏;蔡德鴻;;晚期氧化蛋白產(chǎn)物對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及向成骨分化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

9 馬雪;孟靜茹;賈敏;王寧;胡靜;周穎;羅曉星;;胰高血糖素樣肽-1類似物對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖與成骨分化的影響[A];第十一屆全國(guó)青年藥學(xué)工作者最新科研成果交流會(huì)論文集[C];2012年

10 陳可;王丁;韓之波;朱德林;韓忠朝;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外發(fā)揮免疫活性的研究[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 滿學(xué)杰;天津?yàn)I海新區(qū)建最大間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];新華每日電訊;2008年

2 滿學(xué)杰;津昂賽打造間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

3 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院輸血科 李忠俊 整理 吳劉佳;間充質(zhì)干細(xì)胞研究又見(jiàn)新方法[N];健康報(bào);2013年

4 上海生科院 上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所 曹楷;間充質(zhì)干細(xì)胞：干細(xì)胞中的孫悟空[N];上海科技報(bào);2014年

5 記者　陳建強(qiáng);首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)在津建成[N];光明日?qǐng)?bào);2006年

6 記者　馮國(guó)梧;細(xì)胞產(chǎn)品國(guó)家工程中心建設(shè)方案獲準(zhǔn)[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

7 實(shí)習(xí)生 劉霞;間充質(zhì)干細(xì)胞有望用于面部整形[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

8 本報(bào)記者 王新佳;我國(guó)“原始間充質(zhì)干細(xì)胞”注射液進(jìn)入臨床研究[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2005年

9 馮國(guó)梧;全球首個(gè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)規(guī)�；\(yùn)營(yíng)[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

10 劉瑩清;全球首個(gè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)泰達(dá)規(guī)模運(yùn)營(yíng)[N];北方經(jīng)濟(jì)時(shí)報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張飛;EphB4通過(guò)骨膜蛋白促進(jìn)CTLA4修飾的MSCs有效成骨的機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2017年

2 龔逸明;microRNAs調(diào)控Satb2介導(dǎo)的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的作用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 李松濤;EphB信號(hào)在軸向仿生壓應(yīng)力調(diào)控MSC成骨分化中的作用和機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 方文;純鈦表面WNT信號(hào)通路調(diào)控BMSCs成骨分化的機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2014年

5 劉世宇;移植外源性MSCs持久恢復(fù)宿主MSCs功能的機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 張莉;Fgfr2~(S252W/+)小鼠骨量、骨結(jié)構(gòu)特性及BMSCs成骨分化調(diào)控機(jī)制的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

7 劉旭杰;材料性質(zhì)調(diào)控干細(xì)胞成骨分化及殼聚糖基骨修復(fù)材料[D];清華大學(xué);2015年

8 文采;多孔礦化水凝膠材料誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞成骨分化的研究[D];東南大學(xué);2015年

9 吳毛;胸腰段椎體骨折形態(tài)與椎管狹窄相關(guān)性研究及Sclerostin對(duì)成骨分化的影響[D];蘇州大學(xué);2016年

10 黃江;激活HIF-1α對(duì)骨折愈合的影響及誘導(dǎo)miR-429對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞成骨分化的作用機(jī)制[D];首都醫(yī)科大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 吳小瑩;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)人脂肪干細(xì)胞增殖與成骨分化的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

2 秦子順;淫羊藿苷對(duì)人牙周膜干細(xì)胞的增殖和成骨分化的影響[D];蘭州大學(xué);2015年

3 劉可;miR-106bE靶向調(diào)控BMP2參與間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化與體內(nèi)骨形成[D];蘇州大學(xué);2015年

4 付雪杰;MSCs與去分化MSCs在成骨分化過(guò)程中免疫原性上調(diào)的研究[D];蘇州大學(xué);2015年

5 崔陽(yáng)陽(yáng);蛋白激酶C在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的作用研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

6 嚴(yán)一杰;體外誘導(dǎo)人腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

7 高羽萱;直流微電場(chǎng)對(duì)種植體周骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移和成骨影響的研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

8 郭中豪;甲狀旁腺激素對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

9 李慧垠;高脂環(huán)境下大鼠BMSCs成骨分化過(guò)程中Wnt通路相關(guān)因子的表達(dá)變化[D];山東大學(xué);2015年

10 聶曉萌;MicroRNA靶向Id1對(duì)BMSCs成骨分化的影響[D];山東大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：1342155