本文關(guān)鍵詞：ECAT1和顆粒細(xì)胞對卵母細(xì)胞發(fā)育作用的研究

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【摘要】：哺乳動物卵子發(fā)生是一個復(fù)雜的過程,它是從原始生殖細(xì)胞形成開始到產(chǎn)生成熟卵子為止。世界上15%-20%的人不能生育,其中約一半是女性,而卵母細(xì)胞發(fā)育異常是其最重要的致病因素,因此,避免卵母細(xì)胞發(fā)生損傷以及提高卵母細(xì)胞質(zhì)量對于改善人類生殖具有重要意義。為探究體ECAT1和顆粒細(xì)胞對卵母細(xì)胞發(fā)育的影響,為人類輔助生殖提供理論支持,我們做了以下工作:1.卵母細(xì)胞中蘊(yùn)含大量的母源基因,它們在卵母細(xì)胞成熟和早期胚胎發(fā)育中發(fā)揮著重要作用。到目前為止,許多母源基因的功能只在小鼠等低等動物中被報道,而在人類卵母細(xì)胞中的作用還未有研究。ECAT1是母源效應(yīng)復(fù)合體的一個組分,其在小鼠卵母細(xì)胞中的功能已被闡明,但在人類卵母細(xì)胞成熟、受精以及早期胚胎發(fā)育中的作用尚未見報道。我們對ECAT1在人各組織中的表達(dá)進(jìn)行了分析,發(fā)現(xiàn)其在卵巢中表達(dá)較高,免疫熒光染色的結(jié)果顯示ECAT1定位在人卵母細(xì)胞和早期胚胎細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。利用RNA干擾技術(shù),降低人GV卵母細(xì)胞中ECAT1的表達(dá),導(dǎo)致了卵母細(xì)胞成熟障礙。對ECAT1 RNA干擾后成熟的卵母細(xì)胞進(jìn)行卵胞漿內(nèi)單精子注射,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其受精、卵裂以及胚胎發(fā)育都出現(xiàn)了異常,這可能是由于ECAT1RNA干擾后,減數(shù)第二次分裂中期紡錘體組裝發(fā)生了異常。因此,本研究揭示了 ECAT1在人卵母細(xì)胞和胚胎發(fā)育中的作用,為由卵母細(xì)胞或胚胎發(fā)育障礙引起的不育癥的臨床診斷提供了潛在的分子標(biāo)志。2.由于輔助生殖和卵母細(xì)胞發(fā)育研究的需要,提高體外成熟(ⅣM)卵母細(xì)胞的質(zhì)量是當(dāng)前研究的熱點。ⅣM卵母細(xì)胞與體內(nèi)成熟(ⅣO)卵母細(xì)胞存在質(zhì)量上的差異,顆粒細(xì)胞與卵母細(xì)胞共培養(yǎng)可以提高卵母細(xì)胞質(zhì)量,但其中的機(jī)制尚不明確。我們分別對ⅣO卵母細(xì)胞、單獨(dú)培養(yǎng)的卵母細(xì)胞及與顆粒細(xì)胞共培養(yǎng)的卵母細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序。研究發(fā)現(xiàn),與顆粒細(xì)胞共培養(yǎng)可以減少ⅣM對卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組造成的差異;對差異基因的KEGG分析發(fā)現(xiàn),ⅣM會導(dǎo)致溶酶體、甘油磷脂代謝、三羧酸循環(huán)、核糖體組裝、蛋白質(zhì)折疊和自噬等異常,而與顆粒細(xì)胞共培養(yǎng)司可以減少這些異常發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R714.8

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本文編號：1268206