熒光原位雜交技術(shù)（Fluorescence in situ hybridization,FISH）是現(xiàn)代分子生物學(xué)的重要檢測(cè)手段,在疾病的早期診斷和精準(zhǔn)治療等方面具有重要的臨床意義^【1】。因此精準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果是實(shí)現(xiàn)其臨床意義的重要基礎(chǔ)。整個(gè)FISH實(shí)驗(yàn)包含預(yù)處理、雜交、鏡檢等主要步驟,其中鏡檢就需要用到熒光顯微鏡。熒光顯微鏡作為生物信號(hào)的硬件檢測(cè)設(shè)備,目前已經(jīng)是生化、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域必不可少的工具之一。通過(guò)對(duì)國(guó)內(nèi)外研究情況的調(diào)研以及白細(xì)胞的FISH檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)背景,本課題以呈現(xiàn)準(zhǔn)確的FISH檢測(cè)成果為目標(biāo),提出了一種基于單色LED光源的熒光顯微鏡系統(tǒng)設(shè)計(jì)方案,通過(guò)對(duì)LED光源、光源驅(qū)動(dòng)、圖像增強(qiáng)算法等關(guān)鍵性技術(shù)的研究與分析,確定了最終的方案。同時(shí)通過(guò)該單色LED光源的熒光顯微鏡在白細(xì)胞的FISH檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用,得到了良好的實(shí)驗(yàn)效果。本課題將通過(guò)下面三個(gè)部分完成研究與實(shí)驗(yàn):首先,通過(guò)比較LED、金鹵燈、高壓汞燈三者的光電特性,確定了LED作為熒光顯微鏡的單色光源的方案。根據(jù)本課題采用的白細(xì)胞FISH實(shí)驗(yàn)要求,對(duì)LED進(jìn)行了光學(xué)、電熱學(xué)特性的分析,確保了選擇的LED性能完全符合... 

【文章來(lái)源】：武漢紡織大學(xué)湖北省

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

熒光原位雜交原理示意圖

備在一定程度上將樣本處理和雜交染色兩個(gè)步驟融合實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化。兩款設(shè)備完成FISH（熒光原位雜交技術(shù)）實(shí)驗(yàn)仍采取的是玻片涂抹法，設(shè)備的工作步驟也是按照傳統(tǒng)的FISH實(shí)驗(yàn)方法裂紅、純化、固定、雜交四步進(jìn)行。但是該設(shè)備的工作方式對(duì)后期鏡檢主要有兩個(gè)不利影響，一是玻片法的處理方法使得部分細(xì)胞重疊，不利于顯微鏡觀察；二是實(shí)驗(yàn)步驟太過(guò)于繁瑣，導(dǎo)致熒光顯微鏡獲得鏡檢樣本的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。為了使最終鏡檢的結(jié)果達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，本課題采用實(shí)驗(yàn)室獨(dú)立研究開(kāi)發(fā)的基于微流控芯片的全自動(dòng)熒光原位雜交設(shè)備進(jìn)行樣本處理和雜交染色。如圖1.2圖1.2全自動(dòng)FISH處理裝置

2熒光顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)6圖2.1落射式熒光顯微鏡光路結(jié)構(gòu)示意圖。根據(jù)落射式熒光顯微鏡的工作方式又可以分為正置熒光顯微鏡和倒置熒光顯微鏡【11】。正置熒光顯微鏡的斜視圖如圖2.2所示。倒置熒光顯微鏡的側(cè)視圖如圖2.3所示。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展需要,熒光顯微鏡現(xiàn)已應(yīng)用在各領(lǐng)域,例如用于檢測(cè)表征高分子形態(tài)、表面和界面;測(cè)試水中油濃度,分析巖芯圖像,觀察水生動(dòng)物病毒,檢測(cè)瀝青質(zhì)量,檢驗(yàn)印文與字跡先后順序,觀察纖維切片等。圖2.2正置熒光顯微鏡斜視圖圖2.3倒置熒光顯微鏡側(cè)視圖落射式光路結(jié)構(gòu)水平方向的激發(fā)光用于激發(fā)熒光信號(hào)，以及豎直方向上熒光信號(hào)發(fā)出的光進(jìn)入物鏡用于成像。在傳統(tǒng)的熒光顯微鏡中都存在一個(gè)濾光模塊。濾光模塊主要用于分離不同波長(zhǎng)的光，包括三個(gè)濾光片分別為激發(fā)濾光片、二向色鏡、發(fā)射濾光片。激發(fā)濾光片，一般是帶寬濾光片，通過(guò)與入射光束垂直安裝用以通過(guò)熒光吸收光譜過(guò)濾掉無(wú)用的激發(fā)光。二向色鏡，一般為兩面鍍膜，與水平方向和垂直方向的光成45°放置，


本文編號(hào)：3102401