熒光原位雜交技術(shù)（Fluorescence in situ hybridization,FISH）是現(xiàn)代分子生物學(xué)的重要檢測手段,在疾病的早期診斷和精準(zhǔn)治療等方面具有重要的臨床意義^【1】。因此精準(zhǔn)的檢測結(jié)果是實現(xiàn)其臨床意義的重要基礎(chǔ)。整個FISH實驗包含預(yù)處理、雜交、鏡檢等主要步驟,其中鏡檢就需要用到熒光顯微鏡。熒光顯微鏡作為生物信號的硬件檢測設(shè)備,目前已經(jīng)是生化、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域必不可少的工具之一。通過對國內(nèi)外研究情況的調(diào)研以及白細(xì)胞的FISH檢測的實驗背景,本課題以呈現(xiàn)準(zhǔn)確的FISH檢測成果為目標(biāo),提出了一種基于單色LED光源的熒光顯微鏡系統(tǒng)設(shè)計方案,通過對LED光源、光源驅(qū)動、圖像增強算法等關(guān)鍵性技術(shù)的研究與分析,確定了最終的方案。同時通過該單色LED光源的熒光顯微鏡在白細(xì)胞的FISH檢測實驗中應(yīng)用,得到了良好的實驗效果。本課題將通過下面三個部分完成研究與實驗:首先,通過比較LED、金鹵燈、高壓汞燈三者的光電特性,確定了LED作為熒光顯微鏡的單色光源的方案。根據(jù)本課題采用的白細(xì)胞FISH實驗要求,對LED進(jìn)行了光學(xué)、電熱學(xué)特性的分析,確保了選擇的LED性能完全符合... 

【文章來源】：武漢紡織大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

熒光原位雜交原理示意圖

備在一定程度上將樣本處理和雜交染色兩個步驟融合實現(xiàn)了自動化。兩款設(shè)備完成FISH（熒光原位雜交技術(shù)）實驗仍采取的是玻片涂抹法，設(shè)備的工作步驟也是按照傳統(tǒng)的FISH實驗方法裂紅、純化、固定、雜交四步進(jìn)行。但是該設(shè)備的工作方式對后期鏡檢主要有兩個不利影響，一是玻片法的處理方法使得部分細(xì)胞重疊，不利于顯微鏡觀察；二是實驗步驟太過于繁瑣，導(dǎo)致熒光顯微鏡獲得鏡檢樣本的時間過長。為了使最終鏡檢的結(jié)果達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，本課題采用實驗室獨立研究開發(fā)的基于微流控芯片的全自動熒光原位雜交設(shè)備進(jìn)行樣本處理和雜交染色。如圖1.2圖1.2全自動FISH處理裝置

2熒光顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計6圖2.1落射式熒光顯微鏡光路結(jié)構(gòu)示意圖。根據(jù)落射式熒光顯微鏡的工作方式又可以分為正置熒光顯微鏡和倒置熒光顯微鏡【11】。正置熒光顯微鏡的斜視圖如圖2.2所示。倒置熒光顯微鏡的側(cè)視圖如圖2.3所示。隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展需要,熒光顯微鏡現(xiàn)已應(yīng)用在各領(lǐng)域,例如用于檢測表征高分子形態(tài)、表面和界面;測試水中油濃度,分析巖芯圖像,觀察水生動物病毒,檢測瀝青質(zhì)量,檢驗印文與字跡先后順序,觀察纖維切片等。圖2.2正置熒光顯微鏡斜視圖圖2.3倒置熒光顯微鏡側(cè)視圖落射式光路結(jié)構(gòu)水平方向的激發(fā)光用于激發(fā)熒光信號，以及豎直方向上熒光信號發(fā)出的光進(jìn)入物鏡用于成像。在傳統(tǒng)的熒光顯微鏡中都存在一個濾光模塊。濾光模塊主要用于分離不同波長的光，包括三個濾光片分別為激發(fā)濾光片、二向色鏡、發(fā)射濾光片。激發(fā)濾光片，一般是帶寬濾光片，通過與入射光束垂直安裝用以通過熒光吸收光譜過濾掉無用的激發(fā)光。二向色鏡，一般為兩面鍍膜，與水平方向和垂直方向的光成45°放置，


本文編號：3102401