未成年兔腰椎結(jié)核模型的建立及外科干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究
【摘要】 目的：通過(guò)建立未成年兔脊柱結(jié)核模型，觀察未成年兔后路脊柱內(nèi)固定治療脊柱結(jié)核對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育的影響情況，探討小兒脊柱結(jié)核早期外科干預(yù)的效果。方法：將未成年兔腰4椎體鉆孔植入結(jié)核標(biāo)準(zhǔn)菌株H37Rv，建立兔脊柱結(jié)核模型。將25只未成年兔隨機(jī)分成5組，每組5只。A組，空白對(duì)照組，B組只行腰椎結(jié)核造模，不予以任何干預(yù)治療；C組，抗癆組，行腰椎結(jié)核造模后，予以抗癆治療；D組，抗癆+病灶清除組，行前路病灶清除后予以抗癆治療；E組，抗癆+病灶清除+內(nèi)固定組，行前路病灶清除聯(lián)合后路內(nèi)固定后，予以抗癆治療。5組干預(yù)前均行腰椎CT，以測(cè)量L3-L5的椎管面積、椎管橫徑、椎管矢徑、椎體橫徑、椎體矢徑、椎體高度及L1-L7脊柱長(zhǎng)度。對(duì)D、E組進(jìn)行外科干預(yù)治療，4w、8w、12w對(duì)5組均進(jìn)行腰椎X線(xiàn)及CT，了解骨質(zhì)融合及脊柱發(fā)育的情況，判斷脊柱的穩(wěn)定性及脊柱結(jié)核的治療效果。結(jié)果：4w各組椎管面積、椎管橫徑、椎管矢狀徑、椎體橫徑、L3、L4、L5椎體高度、L1-L7脊柱長(zhǎng)度，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析各組之間無(wú)顯著差異（P>0.O5）。8w、12w X線(xiàn)及CT測(cè)量，椎管面積、椎管橫徑、椎管矢狀徑、椎體橫徑、椎體矢狀徑：B、C、D、E組較A組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）,A組優(yōu)于B、C、D、E組；C、D、E組較B組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），E組優(yōu)于B、C、D組。各組L1-L7脊柱長(zhǎng)度比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。B、C、D、E組L3、L4、L5椎體高度無(wú)顯著差異（P>0.05）。E組L4椎體高度小于L3、L5。結(jié)論：1.通過(guò)椎體鉆孔植入結(jié)核菌的方法可以建立未成年兔脊柱結(jié)核模型。2.未成年兔腰椎結(jié)核在規(guī)律抗結(jié)核治療的基礎(chǔ)上，早期外科干預(yù)治療的療效要優(yōu)于保守治療，但內(nèi)固定對(duì)脊柱發(fā)育有一定影響，主要是造成椎體高度降低，對(duì)椎管發(fā)育影響不大，其對(duì)脊柱整體發(fā)育的影響是有限的。
前言
近年來(lái)，肺結(jié)核在我國(guó)仍在流行，肺外結(jié)核一半累及脊柱，且有發(fā)病呈低齡化趨勢(shì)。目前認(rèn)為脊柱結(jié)核治療的原則: 早期診斷, 早期治療，穩(wěn)定脊柱，恢復(fù)功能。
兒童正處于生長(zhǎng)發(fā)育期, 其脊柱的解剖特點(diǎn)與成人不同, 因此小兒脊柱結(jié)核的臨床特點(diǎn)與成人存在差異。兒童脊柱結(jié)核的發(fā)病和預(yù)后不同于成人。脊柱結(jié)核的發(fā)病率在生長(zhǎng)發(fā)育期的兒童始終較高,其帶來(lái)的遠(yuǎn)期并發(fā)癥遠(yuǎn)比成人嚴(yán)重。不但在結(jié)核病變活動(dòng)期可導(dǎo)致小兒畸形,而且在病變靜止期由于兒童生長(zhǎng)發(fā)育的需要，加之受累椎體的上下骨骺受到不同程度的破壞，使得椎體的前方、后方、側(cè)方出現(xiàn)生長(zhǎng)不平衡，同時(shí)影響椎體與椎弓之間的發(fā)育,最終導(dǎo)致已存在的后凸畸形進(jìn)一步加重或伴有側(cè)凸畸形。嚴(yán)重的脊柱畸形給患兒造成多方面的負(fù)面影響:①由于外觀的異常導(dǎo)致出現(xiàn)多種心理問(wèn)題包括自卑、孤僻、過(guò)分敏感等; ②心肺發(fā)育不全所致的功能障礙; ③由于脊髓持續(xù)受壓，將導(dǎo)致遲發(fā)性癱瘓; ④?chē)?yán)重影響身高與體態(tài)，⑤極易失去勞動(dòng)力。
小兒脊柱結(jié)核的治療目前沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，處于探索階段。由于兒童椎體軟骨較多, 脊柱亦較軟, 椎體處于生長(zhǎng)發(fā)育階段，椎體釘不易擊入，常需先鉆孔。目前手術(shù)治療的方法常有 4 種：①前路病灶清除+植骨融合術(shù);②單純后路植骨融合術(shù); ③前路病灶清除+植骨融合+后路植骨融合術(shù);④單純前路病灶清除術(shù)。為了保證椎體前后均衡生長(zhǎng)只有施行前路病灶清除+植骨融合+后路植骨融合術(shù)和單純前路病灶清除術(shù)。前路減壓椎體間融合+后路固定術(shù)，這一術(shù)式可以有效的阻止神經(jīng)功能進(jìn)一步受損，預(yù)防遲發(fā)性癱瘓的發(fā)生。認(rèn)為小兒脊柱結(jié)核的治療中,如何有效化療，并在此基礎(chǔ)上, 如何選擇脊柱結(jié)核的手術(shù)時(shí)機(jī)，如何徹底切除病灶、能否置入內(nèi)固定，如何一期穩(wěn)定脊柱等，都值得深入探討。
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實(shí)驗(yàn)一 未成年兔腰椎結(jié)核模型建立
1.實(shí)驗(yàn)材料
1.1 主要試劑
人型結(jié)核分支桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（H37Rv）菌株：湖南省結(jié)核病防治所
抗酸染色試劑盒：安徽省巢湖市弘慈醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)
HE 染色試劑盒：上海圻明生物科技有限公司生產(chǎn)
烏拉坦：規(guī)格 500g/瓶，湖南師范大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供
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2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
30 只未成年兔隨機(jī)取 25 只，25 只未成年兔先隨機(jī)分成 5 組，每組 5 只，剩余 5 只作預(yù)留動(dòng)物用。A 組，空白對(duì)照組；B 組只行腰椎結(jié)核造模，不予以任何干預(yù)治療；C 組，抗癆組，行腰椎結(jié)核造模后，予以抗癆治療；D 組，抗癆+病灶清除組，行前路病灶清除后予以抗癆治療；E 組，抗癆+病灶清除+內(nèi)固定組，行前路病灶清除聯(lián)合后路內(nèi)固定后，予以抗癆治療。將標(biāo)準(zhǔn)菌株 H37Rv 菌株在湖南省結(jié)核病防治所檢驗(yàn)科用羅氏培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)增 2 周和取生長(zhǎng)良好的菌落，配成1mg/ml 的均勻菌懸液。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物左側(cè)腹部脫毛備皮，右側(cè)臥固定在手術(shù)板上。用 25%烏拉坦，1g/kg 麻醉。常規(guī)消毒鋪巾(圖 2-1 至圖 2-2)，取左側(cè)腹膜外入路顯露腰 3、4、5 椎體。從左前方向右后方在腰 4 椎體上部近椎間盤(pán)處鉆0.3x0.8cm 的骨孔，骨孔內(nèi)填入浸有結(jié)核菌懸液 1.0ml 的明膠海綿(圖 2-3 至圖2-4)。1-0 絲線(xiàn)間斷關(guān)閉切口(圖 2-5)。術(shù)后動(dòng)物隔離分籠飼養(yǎng)。于 12w 動(dòng)物處死后密封送醫(yī)院焚燒處理，動(dòng)物房紫外光照射消毒。
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實(shí)驗(yàn)二 未成年兔腰椎結(jié)核外科干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究............. 26-41
1.實(shí)驗(yàn)材料 ...............26-27
2.實(shí)驗(yàn)方法 ..................27-32
3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 .................32
4.結(jié)果 ................32-39
討論
脊柱是骨骼系統(tǒng)結(jié)核最常見(jiàn)的受累部位[7]，近年來(lái)脊柱結(jié)核發(fā)病率在發(fā)達(dá)國(guó)家及發(fā)展中國(guó)家均有升高的趨勢(shì)。發(fā)展中國(guó)家較嚴(yán)重[8]，在我國(guó)有低齡化發(fā)展趨勢(shì)。而對(duì)于處在生長(zhǎng)發(fā)育階段的兒童來(lái)說(shuō)，治療不當(dāng)較易導(dǎo)致嚴(yán)重的后凸畸形。兒童腰椎脊柱結(jié)核治療，特別是手術(shù)指征、手術(shù)方式固定節(jié)段等問(wèn)題均存在爭(zhēng)議。
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總 結(jié)
1.在未成年兔腰椎上鉆孔植入浸有H37Rv標(biāo)準(zhǔn)菌株懸液的明膠海綿，可以建立了大體外觀、影像學(xué)表現(xiàn)及組織病理與小兒脊柱結(jié)核相似的動(dòng)物模型。
2. 未成年兔腰椎結(jié)核在規(guī)律抗結(jié)核治療的基礎(chǔ)上，早期外科干預(yù)治療的療效要優(yōu)于保守治療，但內(nèi)固定對(duì)脊柱發(fā)育有一定影響，主要是造成椎體高度降低，其對(duì)脊柱整體發(fā)育的影響是有限的。對(duì)臨床處理小兒脊柱結(jié)核有一定的指導(dǎo)意義。
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本文編號(hào)：9073
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