HMGB1和RAGE在口腔扁平苔蘚中的表達(dá)及意義研究
發(fā)布時間：2014-09-05 11:03
前 言
口腔扁平苔蘚（oral lichen planus，OLP），是口腔黏膜疾病中最為常見的一種疾病。其患病率約為 0.51%，好發(fā)于中年女性，病損大多左右對稱，其臨床特征為粟粒樣大小的白色、灰白色丘疹組成的線條構(gòu)成網(wǎng)狀，環(huán)狀，樹枝狀，斑塊狀病損。病損區(qū)粘膜可能正常或發(fā)生充血，糜爛，潰瘍，萎縮和水皰。本病發(fā)病原因不明，治愈后容易復(fù)發(fā)，有些患者因久病不愈或反復(fù)發(fā)作而感到極度痛苦。由于其具有一定癌變潛能(惡變率 0.4-10%)，世界衛(wèi)生組織 1972 年將其定為可能的癌前狀態(tài)。因此，研究口腔扁平苔蘚發(fā)病機(jī)制對于該病的治療和預(yù)防癌變具有重要的意義。
口腔扁平苔蘚的病理表現(xiàn)為上皮過度或不全角化層較薄，基底層液化變性以及固有層有密集的淋巴細(xì)胞呈帶狀浸潤。顆粒層明顯，棘細(xì)胞層增生輕或萎縮；上皮釘突呈不規(guī)則延長，其下端有時變尖呈鋸齒狀。基底細(xì)胞排列紊亂，基底膜界限模糊不清，基底細(xì)胞液化變性明顯者可見上皮細(xì)胞下水皰形成，偶可見有上皮異常增生。到目前為止，口腔扁平苔蘚的病因仍不明確，OLP 具有慢性持續(xù)性，免疫抑制功能降低，病損區(qū)自生毒性 T 細(xì)胞克隆的存在等很多自身免疫疾病的特點[1]。多數(shù)研究認(rèn)為，OLP 發(fā)生的病理變化是一種因外源性抗原或改變的自身抗原導(dǎo)致的，由細(xì)胞免疫介導(dǎo)的口腔粘膜基底角化細(xì)胞慢性免疫破壞性疾病，即OLP 是一種由淋巴細(xì)胞介導(dǎo)促進(jìn)其局部釋放的細(xì)胞因子的免疫反應(yīng)在 OLP 的發(fā)病中起重要作用[2]。因此，深入探討 OLP 的免疫發(fā)病機(jī)理，尋求各種新的治療方法是 OLP 當(dāng)前研究的活躍領(lǐng)域。
..........................
材料與方法
1.實驗材料
1.1 標(biāo)本來源
健康對照組 30 例健康人口腔黏膜組織標(biāo)本及外周血標(biāo)本來自自愿者捐獻(xiàn)，其中男 13 例，女 17 例。年齡在 24～46 歲之間，均無全身及口腔黏膜疾病診斷，肝腎功能正常，排除感染等可能影響免疫狀態(tài)的情況。
OLP 患者組 30 例 OLP 患者頰部病損區(qū)非糜爛黏膜標(biāo)本及外周血標(biāo)本來自寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院口腔科門診初次就診的 OLP 患者（均經(jīng)病理確診），其中男12 例，女 18 例，年齡在 28～67 歲之間，均排除合并其他自身免疫性疾病，未接受任何激素和免疫抑制劑治療，排除感染等可能影響免疫狀態(tài)的情況。以上患者及志愿者均征得本人同意并簽訂了知情同意書。兩組經(jīng)過比較性別、年齡存在差異，通過調(diào)整到平衡。
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2.實驗方法
2.1. 免疫組化實驗方法
2.1.1 免疫組化實驗前的準(zhǔn)備
0.01MPBS(pH7.4)的制備：1 袋溶于 5000ml 蒸餾水中。
0.01Mol/L 檸檬酸鹽（pH6.0）抗原修復(fù)液的制備：1:100，共配制 1000ml。
2.1.2 切片：將處理好的蠟塊固定于切片機(jī)上，近遠(yuǎn)中向連續(xù)均勻切片，厚約 4um。
2.1.3 烤片：切片后用防脫蠟的載玻片撈片，將切片置入 60 度恒溫干燥箱中烤片，過夜。
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結(jié)果....................................... 26-33
討 論
OLP是一種常見的口腔黏膜疾病，其主要臨床表現(xiàn)為口腔粘膜白色的網(wǎng)狀、丘疹、斑塊狀病損，伴有萎縮、糜爛或潰瘍和水皰形成，且具有一定的癌變率(惡變率0.4-10%)，世界衛(wèi)生組織1972年將其定為可能的癌前狀態(tài)。病理特征以基底細(xì)胞液化變性和固有層炎性細(xì)胞浸潤為主。到目前為止，OLP的病因不明，但許多研究表明，OLP可能是一種由T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性反應(yīng)性疾病。
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結(jié) 論
本實驗通過免疫組化技術(shù)檢測了正常口腔黏膜，口腔扁平苔蘚組織中 HMGB1和 RAGE 的蛋白表達(dá)，通過實時熒光定量 PCR 技術(shù)檢測了正常人和口腔扁平苔蘚患者外周血中 HMGB1 和 RAGE 中 mRNA 的表達(dá)，根據(jù)結(jié)果我們得出一下結(jié)論：
1. 在 OLP 患者中，HMGB1 高表達(dá)，表明 HMGB1 可能是 OLP 發(fā)病的一個重要因素。
2. 在 OLP 患者組中，RAGE 的表達(dá)量顯著增高，表明 RAGE 也是 OLP 發(fā)病的一個可能的因素。
3. 在 OLP 患者組中，HMGB1 與 RAGE 的基因表達(dá)量及蛋白表達(dá)量均呈正相關(guān)，表明 HMGB1 和 RAGE 可能協(xié)同參與了 OLP 的發(fā)病過程，其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。
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參考文獻(xiàn)（略）
本文編號：8699
口腔扁平苔蘚（oral lichen planus，OLP），是口腔黏膜疾病中最為常見的一種疾病。其患病率約為 0.51%，好發(fā)于中年女性，病損大多左右對稱，其臨床特征為粟粒樣大小的白色、灰白色丘疹組成的線條構(gòu)成網(wǎng)狀，環(huán)狀，樹枝狀，斑塊狀病損。病損區(qū)粘膜可能正常或發(fā)生充血，糜爛，潰瘍，萎縮和水皰。本病發(fā)病原因不明，治愈后容易復(fù)發(fā)，有些患者因久病不愈或反復(fù)發(fā)作而感到極度痛苦。由于其具有一定癌變潛能(惡變率 0.4-10%)，世界衛(wèi)生組織 1972 年將其定為可能的癌前狀態(tài)。因此，研究口腔扁平苔蘚發(fā)病機(jī)制對于該病的治療和預(yù)防癌變具有重要的意義。
口腔扁平苔蘚的病理表現(xiàn)為上皮過度或不全角化層較薄，基底層液化變性以及固有層有密集的淋巴細(xì)胞呈帶狀浸潤。顆粒層明顯，棘細(xì)胞層增生輕或萎縮；上皮釘突呈不規(guī)則延長，其下端有時變尖呈鋸齒狀。基底細(xì)胞排列紊亂，基底膜界限模糊不清，基底細(xì)胞液化變性明顯者可見上皮細(xì)胞下水皰形成，偶可見有上皮異常增生。到目前為止，口腔扁平苔蘚的病因仍不明確，OLP 具有慢性持續(xù)性，免疫抑制功能降低，病損區(qū)自生毒性 T 細(xì)胞克隆的存在等很多自身免疫疾病的特點[1]。多數(shù)研究認(rèn)為，OLP 發(fā)生的病理變化是一種因外源性抗原或改變的自身抗原導(dǎo)致的，由細(xì)胞免疫介導(dǎo)的口腔粘膜基底角化細(xì)胞慢性免疫破壞性疾病，即OLP 是一種由淋巴細(xì)胞介導(dǎo)促進(jìn)其局部釋放的細(xì)胞因子的免疫反應(yīng)在 OLP 的發(fā)病中起重要作用[2]。因此，深入探討 OLP 的免疫發(fā)病機(jī)理，尋求各種新的治療方法是 OLP 當(dāng)前研究的活躍領(lǐng)域。
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材料與方法
1.實驗材料
1.1 標(biāo)本來源
健康對照組 30 例健康人口腔黏膜組織標(biāo)本及外周血標(biāo)本來自自愿者捐獻(xiàn)，其中男 13 例，女 17 例。年齡在 24～46 歲之間，均無全身及口腔黏膜疾病診斷，肝腎功能正常，排除感染等可能影響免疫狀態(tài)的情況。
OLP 患者組 30 例 OLP 患者頰部病損區(qū)非糜爛黏膜標(biāo)本及外周血標(biāo)本來自寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院口腔科門診初次就診的 OLP 患者（均經(jīng)病理確診），其中男12 例，女 18 例，年齡在 28～67 歲之間，均排除合并其他自身免疫性疾病，未接受任何激素和免疫抑制劑治療，排除感染等可能影響免疫狀態(tài)的情況。以上患者及志愿者均征得本人同意并簽訂了知情同意書。兩組經(jīng)過比較性別、年齡存在差異，通過調(diào)整到平衡。
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2.實驗方法
2.1. 免疫組化實驗方法
2.1.1 免疫組化實驗前的準(zhǔn)備
0.01MPBS(pH7.4)的制備：1 袋溶于 5000ml 蒸餾水中。
0.01Mol/L 檸檬酸鹽（pH6.0）抗原修復(fù)液的制備：1:100，共配制 1000ml。
2.1.2 切片：將處理好的蠟塊固定于切片機(jī)上，近遠(yuǎn)中向連續(xù)均勻切片，厚約 4um。
2.1.3 烤片：切片后用防脫蠟的載玻片撈片，將切片置入 60 度恒溫干燥箱中烤片，過夜。
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結(jié)果....................................... 26-33
討 論
OLP是一種常見的口腔黏膜疾病，其主要臨床表現(xiàn)為口腔粘膜白色的網(wǎng)狀、丘疹、斑塊狀病損，伴有萎縮、糜爛或潰瘍和水皰形成，且具有一定的癌變率(惡變率0.4-10%)，世界衛(wèi)生組織1972年將其定為可能的癌前狀態(tài)。病理特征以基底細(xì)胞液化變性和固有層炎性細(xì)胞浸潤為主。到目前為止，OLP的病因不明，但許多研究表明，OLP可能是一種由T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性反應(yīng)性疾病。
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結(jié) 論
本實驗通過免疫組化技術(shù)檢測了正常口腔黏膜，口腔扁平苔蘚組織中 HMGB1和 RAGE 的蛋白表達(dá)，通過實時熒光定量 PCR 技術(shù)檢測了正常人和口腔扁平苔蘚患者外周血中 HMGB1 和 RAGE 中 mRNA 的表達(dá)，根據(jù)結(jié)果我們得出一下結(jié)論：
1. 在 OLP 患者中，HMGB1 高表達(dá)，表明 HMGB1 可能是 OLP 發(fā)病的一個重要因素。
2. 在 OLP 患者組中，RAGE 的表達(dá)量顯著增高，表明 RAGE 也是 OLP 發(fā)病的一個可能的因素。
3. 在 OLP 患者組中，HMGB1 與 RAGE 的基因表達(dá)量及蛋白表達(dá)量均呈正相關(guān)，表明 HMGB1 和 RAGE 可能協(xié)同參與了 OLP 的發(fā)病過程，其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。
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參考文獻(xiàn)（略）
本文編號：8699
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