條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游藻類(lèi)和浮游細(xì)菌生物多樣性的影響及菌藻化感效應(yīng)研究
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更多相關(guān)文章: 條斑紫菜 浮游藻類(lèi) 浮游細(xì)菌 生物多樣性 中肋骨條藻 化感作用 內(nèi)生菌
【摘要】:條斑紫菜(Porphyra yezoensis)是我國(guó)主要海洋經(jīng)濟(jì)藻類(lèi),栽培過(guò)程中經(jīng)常會(huì)遇到病害等各種問(wèn)題。水環(huán)境中浮游藻類(lèi)及浮游細(xì)菌的生物多樣性是反映該水環(huán)境的時(shí)下?tīng)顟B(tài),而條斑紫菜養(yǎng)殖及其它人工干預(yù)活動(dòng)對(duì)水環(huán)境的原初狀態(tài)必然產(chǎn)生變化。本文系統(tǒng)地綜述了國(guó)內(nèi)外浮游藻類(lèi)及細(xì)菌生態(tài)學(xué)研究進(jìn)展基礎(chǔ)上,圍繞條斑紫菜養(yǎng)殖行為對(duì)原位海域浮游藻類(lèi)及浮游微生物的生物多樣性影響,在下列5個(gè)方面進(jìn)行了研究:1、條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游藻類(lèi)生物多樣性的影響于2012年11月至12月間,在江蘇海州灣條斑紫菜養(yǎng)殖海域及非養(yǎng)殖海域各設(shè)置4個(gè)采樣位點(diǎn),采集表層海水,以構(gòu)建條斑紫菜養(yǎng)殖及非養(yǎng)殖海域rbcL基因質(zhì)粒文庫(kù)的研究方法,研究條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游藻類(lèi)生物多樣性的影響。在條斑紫菜非養(yǎng)殖海域發(fā)現(xiàn)8種海洋微藻,Cryptomonas占總克隆數(shù)22%,Thalassiosira、Skeletonema costatum分別占6%和2%;條斑紫菜養(yǎng)殖海域發(fā)現(xiàn)10種海洋微藻,其中Heterothrix debilis占總克隆數(shù)22%,優(yōu)勢(shì)度明顯,僅3種微藻為2海域共有(Chlorella、Cryptomonas及S.costatum),表明條斑紫菜養(yǎng)殖海域及非養(yǎng)殖海域浮游藻類(lèi)群落組成差異顯著。條斑紫菜非養(yǎng)殖海域及養(yǎng)殖海域的浮游藻類(lèi)香農(nóng)指數(shù)均值分別為3.273和3.654,均勻度指數(shù)均值分別為1.090和1.040,說(shuō)明條斑紫菜養(yǎng)殖海域浮游藻類(lèi)生物多樣性較非養(yǎng)殖海域豐富,而群落的成熟度與穩(wěn)定性非養(yǎng)殖海域高。2、條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游細(xì)菌生物多樣性的影響本文采用高通量深度測(cè)序技術(shù)研究條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游細(xì)菌生物多樣性的影響,在條斑紫菜養(yǎng)殖海域與非養(yǎng)殖海域各設(shè)置4個(gè)采樣點(diǎn)采集表層海水樣品,經(jīng)鑒定浮游細(xì)菌來(lái)源15個(gè)門(mén),共141屬、253種浮游細(xì)菌及部分未確定種。養(yǎng)殖海域主要優(yōu)勢(shì)菌群為Proteobacteria(44%)、Bacteroidetes(41%)、Firmicutes(9%);非養(yǎng)殖海域主要Proteobacteria(32%)、Bacteroidetes(25%)、Firmicutes(38%)、Fusobacteria(5%);Proteobacteria、Bacteroidetes、Firmicutes三個(gè)門(mén)的細(xì)菌在整個(gè)海域細(xì)菌菌群結(jié)構(gòu)中占主導(dǎo)地位。Verrucomicrobia、Actinobacteria、Cyanobacteria三門(mén)細(xì)菌僅在養(yǎng)殖海域出現(xiàn),占總量5%左右;條斑紫菜養(yǎng)殖海域浮游細(xì)菌的生物多樣性及豐富度均高于非養(yǎng)殖海域,相關(guān)性極強(qiáng);非養(yǎng)殖海域覆蓋率指數(shù)高于養(yǎng)殖海域,群落的成熟度與穩(wěn)定性比養(yǎng)殖海域高。3、Marinobacter adhaerens HY-3與Skeletonema costatum間化感效應(yīng)研究化感作用是一種極其復(fù)雜的生理、生態(tài)學(xué)現(xiàn)象。在條斑紫菜養(yǎng)殖過(guò)程中,經(jīng)常會(huì)被硅藻(Diatom)附著造成紫菜病害及品質(zhì)下降,據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,海洋細(xì)菌M.adhaerens與硅藻之間有一定的相互作用。本研究從條斑紫菜養(yǎng)殖海域海水樣本中分離獲得一株菌株,確定為M.adhaerens HY-3,選擇屬硅藻的S.costatum作為研究對(duì)象,研究M.adhaerens HY-3與S.costatum種間化感效應(yīng),研究顯示:M.adhaerens HY-3濃度104開(kāi)始對(duì)S.costatum生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制效應(yīng),共培養(yǎng)10 d,104、106、108組S.costatum生長(zhǎng)量分別是對(duì)照組的70%、23%、22%;葉綠素的合成量是對(duì)照組88%、62%、60%;添加M.adhaerens HY-3菌株胞外代謝物,對(duì)S.costatum生長(zhǎng)無(wú)任何影響;本文建立了海洋}0菌M.adhaerens HY-3對(duì)中肋骨條藻生長(zhǎng)抑制作用的定量關(guān)系。4、海州灣海域人工養(yǎng)殖的條斑紫菜內(nèi)生細(xì)菌分離的鑒定對(duì)江蘇海州灣海域人工養(yǎng)殖的條斑紫菜內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行分離鑒定,探討其促生長(zhǎng)作用。自條斑紫菜葉狀體分離得到4株內(nèi)生細(xì)菌,對(duì)該4株菌進(jìn)行了形態(tài)學(xué)及生理生化檢測(cè)并結(jié)合16SrDNA序列分析;對(duì)該內(nèi)生細(xì)菌促生長(zhǎng)作用進(jìn)行初步研究。獲得4株內(nèi)生細(xì)菌,命名為ZCN-I、ZCN-II、ZCN-III、ZCN-IV,經(jīng)鑒定4株均為芽孢桿菌屬:ZCN-I為類(lèi)芽孢桿菌(Paenibacillus barcinonensissp),ZCN-III為地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis),ZCN-II、ZCN-IV不確定;經(jīng)分析,ZCN-II、ZCN-IV與B.licheniformis親緣關(guān)系很近,可能為其亞種或變種;促生長(zhǎng)作用研究顯示,ZCN-I、ZCN-II、ZCN-III均能促進(jìn)紫菜生長(zhǎng),其中ZCN-I、ZCN-II效果顯著,分別高出對(duì)照組250%及190%;ZCN-IV無(wú)促生長(zhǎng)作用;說(shuō)明條斑紫菜體內(nèi)存在一定數(shù)量?jī)?nèi)生細(xì)菌并具有一定的促生長(zhǎng)作用。5、海州灣海域人工養(yǎng)殖的條斑紫菜絲狀體黃斑病病原體的分離鑒定通過(guò)對(duì)條斑紫菜黃斑病原分析并對(duì)病原菌進(jìn)行分離,回復(fù)感染結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察及生理生化鑒定以及16S rRNA序列分析等,認(rèn)為黃斑病的病原菌是河豚毒素交替假單胞菌(Pseudoalteromonas tetraodonis),并提出防治的基本方法。條斑紫菜養(yǎng)殖過(guò)程中,由于紫菜生長(zhǎng)過(guò)程中新陳代謝、藻體分泌以及人類(lèi)活動(dòng)干預(yù)導(dǎo)致紫菜養(yǎng)殖海域水體中積累高濃度有機(jī)污染物,而使富營(yíng)養(yǎng)化程度提高,對(duì)浮游藻類(lèi)及細(xì)菌的生物多樣性造成一定的影響而形成差異;海洋細(xì)菌M.adhaerens HY-3與條斑紫菜有害藻S.costatum之間存在化感克制效應(yīng);條斑紫菜體內(nèi)存在一定數(shù)量?jī)?nèi)生細(xì)菌并具有一定的促生長(zhǎng)作用;條斑紫菜絲狀體黃斑病的病原菌是河豚毒素交替假單胞菌(P.tetraodonis)。
【關(guān)鍵詞】:條斑紫菜 浮游藻類(lèi) 浮游細(xì)菌 生物多樣性 中肋骨條藻 化感作用 內(nèi)生菌
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)礦業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:S968.431
【目錄】:
- 致謝4-5
- 摘要5-7
- Abstract7-10
- Extended Abstract10-25
- 變量注釋表25-26
- 1 緒論26-40
- 1.1 概述26
- 1.2 研究現(xiàn)狀26-37
- 1.3 研究目標(biāo)37-38
- 1.4 理論創(chuàng)新38-40
- 2 研究材料及方法40-55
- 2.1 條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游藻類(lèi)生物多樣性的影響40-44
- 2.2 條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游細(xì)菌生物多樣性的影響44-46
- 2.3 M.adhaerens HY-3 與S.costatum間化感效應(yīng)研究46-48
- 2.4 條斑紫菜內(nèi)生細(xì)菌分離鑒定及促生長(zhǎng)作用研究48-50
- 2.5 條斑紫菜絲狀體黃斑病病原體的分離及鑒定50-54
- 2.6 研究技術(shù)路線(xiàn)54-55
- 3 條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游藻類(lèi)生物多樣性的影響55-64
- 3.1 引言55
- 3.2 材料與方法55-56
- 3.3 結(jié)果與分析56-62
- 3.4 討論62-64
- 4 條斑紫菜養(yǎng)殖對(duì)浮游細(xì)菌生物多樣性的影響64-73
- 4.1引言64
- 4.2 材料與方法64
- 4.3 結(jié)果與分析64-70
- 4.4 討論70-73
- 5 M. adhaerens HY-3 與S. costatum間化感效應(yīng)研究73-83
- 5.1 引言73
- 5.2 材料與方法73-74
- 5.3 結(jié)果與分析74-81
- 5.4 討論81-83
- 6 海州灣海域人工養(yǎng)殖的條斑紫菜內(nèi)生細(xì)菌分離鑒定83-94
- 6.1 引言83
- 6.2 材料與方法83
- 6.3 結(jié)果與分析83-92
- 6.4討論92-94
- 7 海州灣海域人工養(yǎng)殖的條斑紫菜絲狀體黃斑病病原體分離鑒定94-104
- 7.1 引言94
- 7.2 材料與方法94-95
- 7.3 結(jié)果與分析95-102
- 7.4 討論102-104
- 8 研究結(jié)論104-106
- 參考文獻(xiàn)106-119
- 作者簡(jiǎn)歷119-122
- 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表論文122-124
- 學(xué)位論文數(shù)據(jù)采集124
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