人參莖葉總皂苷(GSLS)是從人參(Panax ginseng C.A.Mey)的莖和葉中提取的皂苷成分。前期研究表明,口服GSLS可增強(qiáng)雞的體液免疫水平和細(xì)胞免疫水平,還緩解環(huán)磷酰胺(Cy)誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激,增強(qiáng)雞對(duì)雞新城疫病毒(NDV)疫苗和雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)疫苗的免疫應(yīng)答。以GSLS為主要成分的人參莖葉總皂苷顆粒已由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)為新獸藥((2017)新獸藥證字20號(hào))上市。GSLS含有30多種單體成分,其中Rg1,Re,Rc,Rd,Rb1和Rb2等6種單體作為質(zhì)量控制成分已載入2015版《中華人民共和國獸藥典》。為了對(duì)以GSLS為主要原料的中獸藥產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中有效進(jìn)行質(zhì)量控制,并為GSLS的臨床應(yīng)用提供依據(jù),本文首先研究了該6種單體對(duì)雞腸道黏膜免疫的影響,發(fā)現(xiàn)Rg1具有較好的免疫增強(qiáng)作用。在此基礎(chǔ)上,重點(diǎn)研究了口服Rg1對(duì)雞免疫應(yīng)答功能的影響。為研究Rg1,Re,Rc,Rd,Rb1和Rb2等6種不同人參皂苷單體對(duì)雞腸黏膜免疫的影響,將192只SPF母雛按體重梯度隨機(jī)分為8組,每組24只,適應(yīng)飼養(yǎng)2 w后,分別飲水口服Rg1,Re,Rc,Rd,Rb1或者Rb2的水溶液...

【文章頁數(shù)】：123 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫和注釋
前言
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 氧化應(yīng)激與免疫抑制
        第一節(jié) 氧化應(yīng)激與免疫抑制發(fā)生的原因
        第二節(jié) 機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)與免疫的關(guān)系
        第三節(jié) 氧化應(yīng)激和免疫抑制的防治
        第四節(jié) 誘導(dǎo)免疫抑制的常用藥物
        第五節(jié) 環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫抑制和氧化應(yīng)激的原理
    第二章 人參的化學(xué)組成及其藥理作用
        第一節(jié) 人參多糖的化學(xué)組成及其功效
        第二節(jié) 人參多肽的化學(xué)組成及其功效
        第三節(jié) 人參皂苷的化學(xué)組成及其功效
第二部分 試驗(yàn)研究
第一章 口服不同人參皂苷單體對(duì)雞腸道粘膜免疫功能的影響
    1 材料
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑與藥品
        1.3 主要耗材與儀器
    2 方法
        2.1 動(dòng)物分組與處理
        2.2 腸道灌洗液收集和總sIgA檢測
        2.3 石蠟切片制作
        2.4 十二指腸IELs檢測
        2.5 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 口服不同人參皂苷單體對(duì)腸道總sIgA的影響
        3.2 口服不同人參皂苷對(duì)十二指腸IELs數(shù)的影響
    本章小結(jié)
第二章 Rg1對(duì)氧化應(yīng)激雞免疫IBDV疫苗的影響
    第一節(jié) Rg1對(duì)氧化應(yīng)激雞免疫IBDV疫苗的免疫水平的影響
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 主要試劑與藥品
            1.3 主要耗材與儀器
        2 方法
            2.1 動(dòng)物分組與處理
            2.2 血清特異性抗體檢測
            2.3 血清IFN-Υ和IL-6檢測
            2.4 淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)測定
        3 結(jié)果
            3.1 血清IBDV抗體滴度
            3.2 血清細(xì)胞因子
            3.3 淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)
    第二節(jié) 口服Rg1對(duì)氧化應(yīng)激雞血清氧化還原指標(biāo)的影響
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 主要試劑與藥品
            1.3 主要耗材與儀器
        2 方法
            2.1 動(dòng)物分組與處理
            2.2 抗氧化檢測
        3 結(jié)果
            3.1 抗氧化酶水平
            3.2 還原性物質(zhì)和氧化代謝物水平
    本章小結(jié)
第三章 口服Rg1對(duì)雞腸道黏膜免疫的影響
    第一節(jié) 口服Rg1對(duì)雞腸黏膜免疫指標(biāo)的影響
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 主要試劑與藥品
            1.3 主要耗材與儀器
        2 方法
            2.1 動(dòng)物分組與處理
            2.2 腸道灌洗液總sIgA含量
            2.3 腸道灌洗液抗IBDV特異性sIgA檢測
            2.4 石蠟切片制作
            2.5 十二指腸黏膜IgA+細(xì)胞的檢測
            2.6 十二指腸IELs的檢測
        3 結(jié)果
            3.1 腸道總sIgA
            3.2 腸道特異性sIgA
            3.3 十二指腸IgA+細(xì)胞數(shù)目
            3.4 十二指腸IELs數(shù)目
    第二節(jié) Rg1對(duì)雞十二指腸組織免疫相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 主要試劑與藥品
            1.3 主要耗材與儀器
        2 方法
            2.1 動(dòng)物分組與處理
            2.2 十二指腸組織腸組織免疫調(diào)節(jié)基因mRNA的檢測
        3 結(jié)果
            3.1 十二指腸組織TLR4、NF-κB基因mRNA相對(duì)表達(dá)量
            3.2 十二指腸組織CD40、CD80、CD86和MHCⅡ基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量
            3.3 十二指腸組織TGF-β、IL-6和TNF-α基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量
            3.4 十二指腸組織IgA、pIgR和CCR-9基因的mRNA相對(duì)表達(dá)量
    本章小結(jié)
第四章 Rg1保護(hù)過氧化氫誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激的雞脾臟淋巴細(xì)胞
    第一節(jié) Rg1對(duì)氧化應(yīng)激的雞脾臟淋巴細(xì)胞的保護(hù)作用
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 主要試劑與藥品
            1.3 主要耗材與儀器
        2 方法
            2.1 細(xì)胞分離培養(yǎng)
            2.2 脾臟淋巴細(xì)胞氧化應(yīng)激模型的建立
            2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            2.4 MTT法檢測細(xì)胞存活力
            2.5 抗氧化指標(biāo)測定
            2.6 細(xì)胞凋亡檢測
            2.7 膜電位變化
            2.8 鈣離子檢測
            2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
        3 結(jié)果
            3.1 細(xì)胞存活力
            3.2 細(xì)胞內(nèi)ROS、SOD和MDA變化
            3.3 細(xì)胞凋亡
            3.4 線粒體膜電位變化
            3.5 鈣離子檢測
    第二節(jié) Rg1對(duì)氧化應(yīng)激的雞淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的影響
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 主要試劑與藥品
            1.3 主要耗材與儀器
        2 方法
            2.1 細(xì)胞分離培養(yǎng)
            2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            2.3 RNA提取及生物信息學(xué)分析
            2.4 差異表達(dá)基因的熒光定量PCR檢測
        3 結(jié)果
            3.1 測序質(zhì)量評(píng)估
            3.2 差異表達(dá)分析
            3.3 差異表達(dá)基因的GO功能分析
            3.4 差異表達(dá)基因的KEGG通路分析
            3.5 轉(zhuǎn)錄組測序分析結(jié)果的驗(yàn)證
    本章小結(jié)
綜合討論
全文總結(jié)
創(chuàng)新點(diǎn)
研究展望
參考文獻(xiàn)
作者筒介
致謝



本文編號(hào)：4020926