WRKY轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控茶樹甲基化EGCG生物合成的機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2024-11-03 09:34
茶樹[Camellia sinensis(L.)O.Kuntze]是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物,茶葉中含有茶多酚、氨基酸、維生素、生物堿等多種活性成分,可以預(yù)防癌癥、心腦血管等疾病。研究認(rèn)為,茶的有益活性成分主要是兒茶素。隨著研究的不斷深入,甲基化兒茶素相繼被發(fā)現(xiàn),這種兒茶素被認(rèn)為比EGCG具有更強(qiáng)的抗過敏和抗高血壓功效,且比EGCG更容易被吸收,目前研究較多的主要是Epigallocatechin-3-O-(3-O-methyl)gallate(EGCG3"Me)。之前,本課題組已從多種茶樹資源中鑒定出高EGCG3"Me含量的金牡丹和金觀音等茶樹品種,但關(guān)于這些品種高EGCG3"Me的分子調(diào)控機(jī)制尚不清楚,制約了對(duì)這些特異性種質(zhì)資源的認(rèn)識(shí)。因此,本文在前人已有的研究基礎(chǔ)上,探討EGCG3"Me生物合成的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制,以期為高EGCG3"Me茶樹品種選育提供理論依據(jù),進(jìn)一步推動(dòng)特異性茶樹種質(zhì)資源的開發(fā)和利用。兒茶素和EGCG3"Me被認(rèn)為是通過類黃酮生物合成途徑合成的,是一個(gè)復(fù)雜而高度有序的生物學(xué)過程。其合成通路上相關(guān)基因的表達(dá),如CsLAR、CsDFR、CsANS、CsANR和CCoAOMT等...
【文章頁數(shù)】:144 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
本文編號(hào):4011056
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【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
研究表明,VQ蛋白可與WRKY轉(zhuǎn)錄因子互作協(xié)同參與調(diào)控下游基因的表達(dá)。為探討第四章與第五章中獲得的3個(gè)參與甲基化EGCG生物合成的WRKY轉(zhuǎn)錄因子是否能與VQ蛋白互作,從茶樹轉(zhuǎn)錄組中克隆了7個(gè)VQ基因,并獲得了其全長序列,經(jīng)NCBI比對(duì)后發(fā)現(xiàn)它們與擬南芥等植物的的VQ4、VQ8、....
圖6-1CsVQs全長擴(kuò)增電泳圖2.2CsVQs的轉(zhuǎn)錄活性分析
為驗(yàn)證7個(gè)CsVQs是否與CsWRKYs互作,首先分析了7個(gè)VQ蛋白在酵母體內(nèi)的自激活活性,將7個(gè)VQ基因的全長序列克隆到pGBKT7載體上,將構(gòu)建好的pGBKT7-CsVQs、正對(duì)照p53+T-antigen和負(fù)對(duì)照negativecontrol(pGBKT7-Empty)分....
研究顯示,VQ蛋白是一種重要的輔助轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,最主要的互作對(duì)象是WRKY轉(zhuǎn)錄因子。為了驗(yàn)證茶樹基因組的VQ蛋白是否能與CsWRKY31、CsWRKY48和CsWRKY57like蛋白互作,共同參與甲基化EGCG生物合成的調(diào)控,進(jìn)行了酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)。鑒于CsWRKY31和CsWR....
本文編號(hào):4011056
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