天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

鴨疫里默氏菌B739 0 873基因功能研究

發(fā)布時間:2024-03-20 20:13
  鴨疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)是嚴重危害鴨、鵝等禽類健康的重要病原,長期使用抗菌藥物進行防治,帶來了耐藥性增加等防治及公共衛(wèi)生問題。耐藥節(jié)結(jié)化細胞分化(Resistance nodulation division,RND)家族外排泵的表達是造成細菌多重耐藥重要原因之一,圍繞RA的基因組是否編碼具有RND外排泵、是怎樣介導(dǎo)RA耐藥等科學(xué)問題開展系列試驗研究,主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1鴨疫里默氏菌B7390873介導(dǎo)RA氨基糖苷類和去污劑類化合物耐藥對本實驗室完成測序的RA-CH-1株的基因組進行生物信息學(xué)分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)B7390781、B7390873和B7391785三個基因的編碼蛋白具有11-12個跨膜區(qū)(TM D),在TMD 1-2和TMD 6-7之間分別有一個小大約300 aa的周質(zhì)環(huán),且三個蛋白都位于細胞質(zhì)膜,他們的相鄰基因中,B7390782、B7390872和B7391783編碼膜融...

【文章頁數(shù)】:124 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
常用英文縮寫詞匯
第一章 文獻綜述
    1 鴨疫里默氏菌耐藥的研究概況
        1.1 鴨疫里默氏菌的耐藥現(xiàn)狀
        1.2 鴨疫里默氏菌耐藥相關(guān)因子的研究
    2 革蘭氏陰性菌RND外排泵的研究概況
        2.1 RND外排泵的基本特性
        2.2 RND外排泵的作用機制
    3 選題目的及意義
第二章 鴨疫里默氏菌B7390873的尋找及其功能鑒定
    1 試驗材料
        1.1 菌株和質(zhì)粒
        1.2 實驗動物
        1.3 引物
        1.4 試劑
        1.5 儀器設(shè)備
    2 試驗方法
        2.1 生物信息學(xué)分析
        2.2 缺失株RA-CH-1ΔB7390873的構(gòu)建
        2.3 回補株RA-CH-1ΔB7390873pLMF03::B7390873的構(gòu)建
        2.4 生長曲線的測定
        2.5 體外競爭能力的測定
        2.6 MIC的測定
        2.7 LD50的測定
    3 試驗結(jié)果
        3.1 RA-CH-1株RND外排泵基因的尋找
        3.2 缺失株RA-CH-1ΔB7390873的構(gòu)建
        3.3 回補株RA-CH-1ΔB7390873pLMF03::B7390873的構(gòu)建
        3.4 生長曲線的測定
        3.5 體外競爭能力的測定
        3.6 MIC的測定
        3.7 LD50的測定
    4 討論
第三章 鴨疫里默氏菌B7390873工作能量來源的研究
    1 試驗材料
        1.1 菌株
        1.2 試劑
        1.3 儀器設(shè)備
    2 試驗方法
        2.1 適宜CCCP使用濃度的篩選
        2.2 加入CCCP后不同RA菌株的MIC檢測
        2.3 不同RA菌株對慶大霉素攝入累積量的檢測
    3 試驗結(jié)果
        3.1 適宜CCCP使用濃度的測定
        3.2 加入CCCP后不同RA菌株MIC的測定
        3.3 不同RA菌株慶大霉素的累積能力的測定
    4 討論
第四章 鴨疫里默氏菌B7390873蛋白必需氨基酸位點研究
    1 試驗材料
        1.1 菌株和質(zhì)粒
        1.2 實驗動物
        1.3 引物
        1.4 試劑
        1.5 儀器設(shè)備
    2 試驗方法
        2.1 序列比對
        2.2 氨基酸的突變原則
        2.3 突變片段B7390873X的PCR擴增
        2.4 突變重組質(zhì)粒pLMF03::B7390873X的構(gòu)建與鑒定
        2.5 點突變回補株RA-CH-1ΔB7390873pLMF03::B7390873X鑒定
        2.6 點突變回補株的MIC檢測
        2.7 兔抗B7390873截段蛋白多克隆抗體的制備
        2.8 Western-blot檢測點突變回補株中B7390873X蛋白的表達
    3 試驗結(jié)果
        3.1 B7390873保守氨基酸的尋找
        3.2 突變片段B7390873X的PCR擴增
        3.3 突變重組質(zhì)粒pLMF03::B7390873X的構(gòu)建
        3.4 點突變回補株RA-CH-1ΔB7390873pLMF03::B7390873X篩選
        3.5 點突變回補株MIC的測定
        3.6 兔抗B7390873截斷蛋白多克隆抗體的制備
        3.7 點突變回補株中B7390873X的表達
    4 討論
第五章 鴨疫里默氏菌B7390873功能需要B7390872參與
    1 試驗材料
        1.1 菌株和質(zhì)粒
        1.2 引物
        1.3 試劑
        1.4 儀器設(shè)備
    2 試驗方法
        2.1 B7390872和B7390873共轉(zhuǎn)錄的檢測
        2.2 雙缺失株RA-CH-1ΔB7390872ΔB7390873的構(gòu)建
        2.3 雙缺失回補株的構(gòu)建
        2.4 雙缺失株和雙缺失株回補株的MIC檢測
        2.5 重組表達質(zhì)粒pBAD24::B7390872、pBAD24::B7390873和pBAD24::B7390872-B7390873的構(gòu)建
        2.6 重組表達質(zhì)粒pBAD24::B7390872、pBAD24::B7390873 和p BAD24::B7390872-B7390873 的誘導(dǎo)表達
        2.7 化學(xué)交聯(lián)作用
        2.8 Western-blot
    3 試驗結(jié)果
        3.1 B7390872和B7390873共表達
        3.2 雙缺失株RA-CH-1ΔB7390872ΔB7390873的構(gòu)建
        3.3 雙缺失回補株的構(gòu)建
        3.4 雙缺失株和雙缺失株回補株MIC的測定
        3.5 重組表達質(zhì)粒pBAD24::B7390872、pBAD24::B7390873和pBAD24::B7390872-B7390873的構(gòu)建
        3.6 Western-blot檢測B7390872和B7390873的表達
    4 討論
第六章 鴨疫里默氏菌B7390870對B7390873調(diào)節(jié)作用研究
    1 試驗材料
        1.1 菌株和質(zhì)粒
        1.2 引物
        1.3 試劑
        1.4 儀器設(shè)備
    2 試驗方法
        2.1 RA-CH-1株B7390873基因的誘導(dǎo)表達
        2.2 同源性分析
        2.3 缺失株RA-CH-1ΔB7390870的構(gòu)建
        2.4 B7390870、B7390871和B7390872共轉(zhuǎn)錄的檢測
        2.5 過表達株RA-CH-1pLMF03::B7390870的構(gòu)建
        2.6 RT-PCR
        2.7 過表達株RA-CH-1pLMF03::B7390870MIC的檢測
    3 試驗結(jié)果
        3.1 RA-CH-1株B7390873基因的誘導(dǎo)表達
        3.2 B7390870核苷酸序列的同源性分析
        3.3 缺失株RA-CH-1ΔB7390870的構(gòu)建
        3.4 B7390870、B7390871和B7390872共轉(zhuǎn)錄的檢測
        3.5 過表達株RA-CH-1pLMF03::B7390870的構(gòu)建
        3.6 RT-PCR
        3.7 過表達株RA-CH-1pLMF03::B7390870MIC的測定
    4 討論
結(jié)論
本文的創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
作者簡歷



本文編號:3933241

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/shoufeilunwen/nykjbs/3933241.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶30a2d***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com