綿羊在養(yǎng)殖業(yè)中占有重要地位,但子宮內(nèi)膜炎的頻發(fā)卻影響著綿羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。當前針對綿羊子宮內(nèi)膜炎的治療方法主要為抗生素療法,但抗生素的大量使用會造成耐藥細菌的產(chǎn)生,并且抗生素殘留會對人類生產(chǎn)和生活造成不良影響。由于中藥的價廉易得、副作用小、不易產(chǎn)生耐藥性、無休藥期等特點,越來越多研究人員將關(guān)注點聚焦于中藥的探索和研發(fā)。因此本文旨在研究一種能用于預(yù)防和治療綿羊子宮內(nèi)膜炎的中藥復(fù)方,并探究其活性成分可能的抗炎機制,為臨床上防治羊子宮內(nèi)膜炎提供新的方法和理論基礎(chǔ)。1.通過酶消化法和差速消化法分離培養(yǎng)并純化綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞,使用間接免疫熒光檢測CK18的表達,對細胞類型和純度進行鑒定;使用不同MOI的大腸桿菌感染綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞,通過觀察細胞形態(tài)、檢測細胞凋亡水平和炎癥相關(guān)基因的表達,選擇建立子宮內(nèi)膜炎體外模型的大腸桿菌最佳MOI。結(jié)果顯示,試驗成功分離并純化了綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞,CK18的陽性表達率高于95%;與空白對照組相比,當大腸桿菌MOI為1:10時,子宮內(nèi)膜上皮細胞形態(tài)和凋亡比例無明顯改變,炎癥因子表達水平也無顯著變化;大腸桿菌MOI為1:1時,細胞形態(tài)無明顯變化,僅有少量...

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖3-1純化后綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞形態(tài)

甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆博士學(xué)位論文22細胞貼壁生長，呈橢圓形或鋪路石狀，排列緊密，細胞邊界清晰，胞質(zhì)飽滿（圖3-1）。圖3-1純化后綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞形態(tài)。（A）細胞貼壁生長，呈現(xiàn)橢圓形或鋪路石狀；（B）細胞成圓形飽滿，緊密排列，邊界清晰。Fig.3-1Morphologyof....

圖3-2綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞鑒定

甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆博士學(xué)位論文22細胞貼壁生長，呈橢圓形或鋪路石狀，排列緊密，細胞邊界清晰，胞質(zhì)飽滿（圖3-1）。圖3-1純化后綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞形態(tài)。（A）細胞貼壁生長，呈現(xiàn)橢圓形或鋪路石狀；（B）細胞成圓形飽滿，緊密排列，邊界清晰。Fig.3-1Morphologyof....

圖3-3綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞生長曲線

“凈宮方”及單體對綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞炎癥反應(yīng)的調(diào)控作用233.2細胞生長特性為檢測本實驗所分離鑒定的綿羊子宮內(nèi)膜上皮細胞的生長特性，繪制了細胞的生長曲線。標準曲線中R2值0.9921，符合標準（圖3-3），由生長曲線可以看出，細胞在第一和第二天生長緩慢，在第三天進入快速生長的對....

圖3-4標準曲線

甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆博士學(xué)位論文24表3-2各濃度菌液的吸光度Table3-2ODofBacteria菌液濃度（CFU/mL）1095×1082.5×1081.25×1086.25×1073.125×107OD值1.7962±0.00430.87862±0.009370.438....

本文編號：3906415