2013年12月,江西省報(bào)道了世界首例人感染H10N8亞型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的事件。H10N8亞型禽流感病毒在引起的3人感染中已造成2人死亡。而近年在北歐爆發(fā)的禽源H10N7流感病毒在海豹之間的感染說明H10亞型流感病毒可以跨越種間屏障感染哺乳動(dòng)物和人。由于H10N8、H7N9的內(nèi)部六個(gè)片段來源于H9N2,因此我們將這三種亞型的流感病毒稱作H9N2源流感病毒。研究發(fā)現(xiàn),H9N2源流感病毒PB2上的一些位點(diǎn)在近幾年發(fā)生了有規(guī)律的變化,主要集中在292(I→V)、389(R→K)、598(T→M)、648(L→V)及676(T→M)。通過系統(tǒng)分析發(fā)現(xiàn),H9N2源流感病毒的PB2片段292、389、588、598、648和676位點(diǎn)在2012年前后出現(xiàn)了明顯的進(jìn)化拐點(diǎn)。我們的研究已表明,除了627K和588V位點(diǎn)外,位點(diǎn)292V、648V和676M與禽源H10N8 AIV對(duì)哺乳動(dòng)物的適應(yīng)性有關(guān)。而我們所發(fā)現(xiàn)的與H9N2源AIV在哺乳動(dòng)物適應(yīng)性增強(qiáng)相關(guān)的位點(diǎn)292V、389K、588V、648V以及676M,近年來在H9N2源AIV中的比例也大大提...

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
常用縮寫詞
第一章 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 流感概述
        1.1.2 禽流感及禽流感的危害
        1.1.3 H10亞型流感概述
        1.1.4 流感病毒及流感病毒的理化特性
        1.1.5 流感病毒的基因組結(jié)構(gòu)及功能
        1.1.6 vRNP的結(jié)構(gòu)及功能
        1.1.7 流感病毒的復(fù)制周期
        1.1.8 流感病毒的進(jìn)化與變異
        1.1.9 禽流感病毒PB2蛋白的突變特點(diǎn)
    1.2 研究的目的和意義
第二章 H10N8亞型禽流感病毒的遺傳演化分析和PB2蛋白三維同源建模
    2.1 引言
    2.2 材料方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 設(shè)備軟件
    2.3 H10N8亞型禽流感病毒的遺傳演化分析
        2.3.1 H10N8亞型流感病毒HA基因的遺傳演化分析
        2.3.2 H10N8亞型禽流感病毒NA基因的遺傳演化分析
        2.3.3 H10N8亞型禽流感病毒M基因的遺傳演化分析
        2.3.4 H10N8亞型禽流感病毒NS基因的遺傳演化分析
        2.3.5 H10N8亞型禽流感病毒NP基因的遺傳演化分析
        2.3.6 H10N8亞型禽流感病毒PA基因的遺傳演化分析
        2.3.7 H10N8亞型禽流感病毒PB1基因的遺傳演化分析
        2.3.8 H10N8亞型禽流感病毒PB2基因的遺傳演化分析
        2.3.9 H9N2亞型禽流感病毒PB2基因的遺傳演化分析
        2.3.10 H9N2源流感病毒PB2蛋白中關(guān)鍵位點(diǎn)的分析
    2.4 H10N8亞型禽流感病毒PB2蛋白三維同源建模
    2.5 本章小結(jié)
第三章 H10N8亞型禽流感病毒復(fù)制能力的分析
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 菌株和病毒
        3.2.2 質(zhì)粒、細(xì)胞和雞胚
        3.2.3 酶和主要試劑
        3.2.4 主要設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 各突變病毒的拯救
        3.3.2 各毒株在哺乳動(dòng)物和禽源細(xì)胞上的聚合酶活性的測定
        3.3.3 各毒株在哺乳動(dòng)物細(xì)胞及禽源細(xì)胞上增殖能力的比較
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.4.1 各毒株在哺乳動(dòng)物和禽源細(xì)胞上的聚合酶活性的測定結(jié)果
        3.4.2 各毒株在哺乳動(dòng)物細(xì)胞及禽源細(xì)胞上增殖能力的比較結(jié)果
    3.5 本章小結(jié)
第四章 H10N8亞型禽流感病毒致病性研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 主要試劑
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        4.2.3 主要設(shè)備
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 各突變毒株EID50的測定
        4.3.2 各突變毒株對(duì)BALB/c小鼠的致病性實(shí)驗(yàn)
        4.3.3 雙位點(diǎn)突變毒株的小鼠實(shí)驗(yàn)
        4.3.4 小鼠肺臟病毒的檢測
        4.3.5 小鼠腦和鼻甲骨病毒滴度的檢測
        4.3.6 小鼠肺臟和腦病理切片的觀察
        4.3.7 四株突變病毒對(duì)SPF雞的致病性實(shí)驗(yàn)
        4.3.8 氣管及各臟器病毒滴度的檢測
        4.3.9 咽拭子及泄殖腔拭子病毒滴度的檢測
        4.3.10 雞肺臟病理切片的觀察
        4.3.11 血清抗體轉(zhuǎn)陽檢測
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 各毒株EID50的結(jié)果
        4.4.2 小鼠體重變化及存活情況檢測結(jié)果
        4.4.3 小鼠肺臟病毒的檢測結(jié)果
        4.4.4 A549細(xì)胞病毒檢測結(jié)果
        4.4.5 小鼠肺臟和腦病理切片的觀察
        4.4.6 SPF雞氣管病毒滴度的檢測結(jié)果
        4.4.7 SPF雞咽拭子病毒滴度的檢測結(jié)果
        4.4.8 SPF雞泄殖腔拭子病毒的檢測結(jié)果
        4.4.9 除氣管外的其他臟器的病毒滴度的檢測結(jié)果
        4.4.10 雞肺臟病理切片的觀察結(jié)果
        4.4.11 雞血清抗體轉(zhuǎn)陽檢測結(jié)果
    4.5 本章小結(jié)
第五章 全文討論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄：科研成果



本文編號(hào)：3824226