牛病毒性腹瀉(BVD)是由牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)引起的一種主要感染反芻動物的傳染性疾病,BVDV為黃病毒科瘟病毒屬成員,該病能夠引起牛的腹瀉、繁殖力下降、產奶量下降、胎兒生長緩慢、呼吸道癥狀、犢牛持續(xù)感染,還會引起流產、胎兒畸形、木乃伊胎、死胎等繁殖障礙。持續(xù)性感染牛將終生保持病毒血癥的狀態(tài)且持續(xù)對外排毒,該病呈世界性流行,給養(yǎng)牛業(yè)帶來嚴重的經濟損失。牛傳染性鼻氣管炎(IBR)是由牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV,又稱作BHV-1)引起的牛的一種急性、熱性、接觸性傳染病,IBRV屬于皰疹病毒科、α-皰疹病毒亞科、水痘病毒屬成員,IBR主要表現為鼻氣管炎癥、呼吸困難、流鼻涕等癥狀,可引起膿皰性外陰陰道炎、龜頭炎、結膜炎、犢牛腦膜腦炎、乳房炎、奶牛流產等,直接引起的死亡率不高,但影響牛的生長、產奶量以及國際貿易,嚴重影響?zhàn)B牛業(yè)的健康發(fā)展。BVDV與BHV-1兩種病毒均能引起免疫抑制,使感染機體容易繼發(fā)其它病原感染,造成較為嚴重的臨床癥狀;這兩種病毒與牛的運輸熱密切相關,是造成牛呼吸道疾病綜合征(BRDC)的兩個主要病原,是養(yǎng)牛業(yè)密切關注的疫病。偽狂犬病(PR)也稱為Aujeszky病(...

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【學位級別】：博士

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中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 牛病毒性腹瀉病概述
        1.1.1 BVD的病原學及致病機制
        1.1.2 BVD的流行病學
        1.1.3 BVD的臨床特征
        1.1.4 BVD的剖檢病變與組織病理學變化
        1.1.5 BVDV與細胞自噬
        1.1.6 BVDV與細胞凋亡
    1.2 牛傳染性鼻氣管炎概述
        1.2.1 IBR的病原學及發(fā)病機制
        1.2.2 IBR的流行病學
        1.2.3 IBR的臨床癥狀
        1.2.4 IBR的病理變化
        1.2.5 BHV-1與細胞凋亡
    1.3 偽狂犬病概述
    1.4 BVDV和 BHV-1 共感染研究進展
        1.4.1 BVDV與 BHV-1 共感染研究現狀
        1.4.2 病毒共感染的一般致病機制
        1.4.3 病毒共感染對宿主的影響
        1.4.4 病毒共感染的檢測方法
    1.5 研究目的及意義
2 材料與方法
    2.1 儀器與試劑
    2.2 常用試劑的配備
    2.3 實驗方法與步驟
        2.3.1 實驗技術路線
        2.3.2 PR、BVD與 IBR流行病學調查
        2.3.3 牛源PRV的分離鑒定及致病性實驗
        2.3.4 BHV-1gD多克隆抗體制備及驗證
        2.3.5 BVDV與 BHV-1 共感染致病機制研究
        2.3.6 BVDV和 BHV-1 兩種病毒共感染與單獨感染時干擾素相關基因m RNA水平檢測
        2.3.7 統(tǒng)計分析
3 結果與分析
    3.1 流行病學調查結果
        3.1.1 BVDV與 BHV-1 血清學流行病學調查結果
        3.1.2 牛群PRV血清學流行病學調查結果
        3.1.3 BVDV臨床病例分析及病原學流行病學調查結果
        3.1.4 IBR臨床病例分析及病原學流行病學調查結果
    3.2 PRV分離及致病性實驗結果
        3.2.1 剖檢及病理組織學病變
        3.2.2 PCR及 IFA鑒定PRV分離株
        3.2.3 SDLY-China-2018株PRV gE基因AA變異分析
        3.2.4 SDLY-China-2018株PRV gE、gD、gI、gC和 TK基因遺傳進化分析
        3.2.5 SDLY-China-2018株PRV致細胞病變和毒力情況
        3.2.6 SDLY-China-2018株PRV對小鼠致病性實驗
        3.2.7 同場區(qū)豬血清PRVgE抗體檢測結果
    3.3 BHV-1gD多克隆抗體制備及驗證
        3.3.1 重組菌的酶切驗證及菌液PCR驗證
        3.3.2 表達菌的誘導表達及純化結果
        3.3.3 兔血清抗體效價測定
        3.3.4 制備的多克隆抗體IFA及WB驗證
    3.4 BVDV與 BHV-1 共感染致病機制研究結果
        3.4.1 BVDV和 BHV-1 共感染與BHV-1 單獨感染相比導致細胞病變減輕
        3.4.2 在MDBK、BT細胞上BVDV與BHV-1 共感染與BVDV單獨感染相比病毒增殖減弱
        3.4.3 在MDBK、BT細胞上BVDV與BHV-1共感染與BHV-1單獨感染相比病毒增殖減弱
        3.4.4 WB與IFA檢測BVDV和 BHV-1 共感染與BVDV單感染時病毒增殖的情況
        3.4.5 BVDV和 BHV-1 共感染與BVDV單獨感染時相比,MDBK細胞的自噬減弱
        3.4.6 BVDV和 BHV-1 共感染與兩病毒單獨感染時MDBK細胞的凋亡變化
        3.4.7 BVDV和 BHV-1 兩種病毒共感染與單獨感染時干擾素相關基因表達變化
4 討論
    4.1 BVDV與 BHV-1 共感染的流行病學調查
    4.2 牛場PRV的感染
    4.3 BVDV與 BHV-1 共感染對病毒增殖的影響
    4.4 BVDV與 BHV-1 共感染與細胞自噬和細胞凋亡的關系
    4.5 BVDV和 BHV-1 共感染對干擾素相關基因轉錄水平的影響
5 結論
6 參考文獻
7 致謝
8 個人簡歷



本文編號：3787578