禽致病性大腸桿菌(avian pathogenic Escherichia coli, APEC)能引起禽類局部或全身性感染。全身感染即大腸桿菌型敗血癥,主要特征是大腸桿菌存在于血液中,其發(fā)展階段包括急性敗血癥、亞急性多發(fā)性漿膜炎和慢性肉芽腫性炎癥。局部感染性禽大腸桿菌病包括大腸桿菌型臍炎／卵黃囊感染、大腸桿菌型蜂窩織炎、腫頭綜合征、生殖道感染、大腸桿菌型輸卵管炎／腹膜炎和大腸桿菌型睪丸炎／附睪炎等。大量國內(nèi)外研究表明,因地理區(qū)域不同,大腸桿菌血清型呈現(xiàn)多樣性,但最常見的為O1、02、O35、O78。某些感染的暴發(fā)病例是由不常見的血清型造成的,如O111血清型分離株可造成產(chǎn)蛋母雞發(fā)生多臟器的漿膜炎、敗血癥。還有一些致病性大腸桿菌菌株血清型不明確或者不能分型。近年來,在江蘇、山東、安徽、河南等省規(guī)�；怆u養(yǎng)殖場頻繁出現(xiàn)一種雛肉雞“黑腺胃病”(暫命名),發(fā)病區(qū)域分散,發(fā)病日齡早,主要集中在3-5日齡,有時在7-8日齡出現(xiàn),死淘率3%～12%。商品肉雞出雛時外觀健康,死亡前幾無可見臨診癥狀。剖檢病理變化以腺胃呈灰黑色為主(發(fā)黑程度隨病情輕重而呈淺灰色或灰色,嚴重時呈黑色)、病程稍長者,可見心...

【文章頁數(shù)】：147 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號說明
第一篇 綜述
    第一章 禽腸道外致病性大腸桿菌病的致病機理研究進展
        1 APEC的致病機理
            1.1 大腸桿菌型敗血癥
            1.2 局部性大腸桿菌病
        2 腸道外致病性大腸桿菌的毒力因子
            2.1 黏附素
            2.2 毒素
            2.3 鐵攝取系統(tǒng)
            2.4 保護素
            2.5 侵襲素
            2.6 生物膜
        3 毒力基因的基因組定位
        參考文獻
第二篇 試驗研究
    第一章 致雛肉雞“黑腺胃病”致病性大腸桿菌的分離鑒定
        1 材料
            1.1 病料
            1.2 菌株
            1.3 培養(yǎng)基
            1.4 試劑
                1.4.1 微量生化發(fā)酵管
                1.4.2 藥敏紙片
                1.4.3 大腸桿菌0抗原診斷血清
                1.4.4 主要試劑
            1.5 主要儀器
            1.6 實驗動物
            1.7 引物合成
        2 方法
            2.1 病毒分離
            2.2 細菌的分離培養(yǎng)
            2.3 細菌的純化及保存
            2.4 細菌的鑒定
            2.5 O血清型鑒定
            2.6 1 日齡SPF雞和Cobb肉雞致死性試驗
            2.7 組織病理學(xué)變化
            2.8 毒力基因檢測
            2.9 種系發(fā)生分型
            2.10 藥敏試驗
            2.11 重金屬檢測
        3 結(jié)果
            3.1 病毒分離結(jié)果
            3.2 細菌的分離和生化試驗鑒定
            3.3 0 血清型鑒定
            3.4 1 日齡SPF雞和Cobb肉雞致死性試驗
            3.5 臨床病死雞及人工感染雞病理變化
            3.6 大腸桿菌分離株毒力基因的檢測情況
            3.8 種系發(fā)生分型
            3.9 藥敏試驗結(jié)果
            3.10 重金屬檢測
        4 討論
        參考文獻
    第二章 同一個體腺胃分離株和心血分離株毒力基因及致病性比較
        1 材料
            1.1 菌株
            1.2 培養(yǎng)基
            1.3 試劑
            1.4 實驗動物
            1.5 引物合成
        2 方法
            2.1 細菌的鑒定
            2.2 生長曲線的測定
            2.3 半數(shù)致死量(LD50)測定
            2.4 體內(nèi)定居與持續(xù)試驗
            2.5 毒力基因檢測
            2.6 種系發(fā)生分型
            2.7 多位點序列分型(MLST)
            2.8 脈沖場凝膠電泳分析
        3 結(jié)果
            3.1 細菌的鑒定
            3.2 生長曲線的測定
            3.3 4d/9-1 O142腺胃、4d/9-1 O142心血分離株半數(shù)致死量測定結(jié)果
            3.4 體內(nèi)定居與持續(xù)試驗
            3.5 大腸桿菌分離株毒力基因的檢測情況
            3.6 種系發(fā)生分型
            3.7 多位點序列分型(MLST)
            3.8 脈沖場凝膠電泳分析
        4 討論
        參考文獻
    第三章 APEC O142腺胃分離株和心血分離株在雞體內(nèi)外的表達差異基因的篩選
        1 材料
            1.1 菌株
            1.2 主要儀器與設(shè)備
            1.3 主要藥品及試劑
            1.4 主要生物信息學(xué)軟件以及數(shù)據(jù)庫
        2 方法
            2.1 細菌的復(fù)蘇和培養(yǎng)
            2.2 大腸桿菌生化試驗及溶血特性的鑒定
            2.3 大腸桿菌O血清型的鑒定
            2.4 SPF雞血液中細菌的富集
            2.5 細菌的體外培養(yǎng)
            2.6 細菌RNA的提取
            2.7 RNA質(zhì)量檢查
            2.8 RNA純化
            2.9 反轉(zhuǎn)錄、標記和雜交
            2.10 數(shù)據(jù)分析
            2.11 qRT-PCR對芯片結(jié)果的驗證
        3 結(jié)果
            3.1 APEC的確認
            3.2 細菌RNA的提取
            3.3 APEC 4d/9-1腺胃分離株和心血分離株在雞體內(nèi)外基因表達水平的比較
            3.4 差異表達基因Gene ontology(GO)分析
            3.5 qRT-PCR驗證結(jié)果
        4 討論
        參考文獻
    第四章 禽致病性大腸桿菌E491P株ompF、metF基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究
        1 材料
            1.1 菌株和質(zhì)粒
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 分子生物學(xué)及數(shù)據(jù)分析軟件
            1.5 試驗雞及試驗雞胚
            1.6 引物設(shè)計
        2 方法
            2.1 缺失株的構(gòu)建
            2.2 生長曲線測定
            2.3 血清殺菌學(xué)試驗
            2.4 1日齡雞半數(shù)致死量(LD50)的測定
            2.5 35日齡SPF雞感染體內(nèi)動態(tài)分布試驗
            2.6 組織病理學(xué)變化觀察
        3 結(jié)果
            3.1 缺失株E491PΔompF和E491PΔmetF的構(gòu)建及鑒定
            3.2 E491P及缺失株E491PΔompF、E491PΔmetF的生長曲線
            3.3 SPF雞血清殺菌試驗結(jié)果
            3.4 LD₅₀測定結(jié)果
            3.5 35日齡SPF雞體內(nèi)動態(tài)分布試驗結(jié)果
            3.7 組織病理學(xué)變化
        4 討論
        參考文獻
全文總結(jié)
致謝
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本文編號：3751191