發(fā)布時間：2017-05-17 07:14

  本文關(guān)鍵詞：當歸不同栽培品種種子與藥材質(zhì)量的相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：當歸為傘形科植物當歸Angelica sinensis (Oliv.) Diels的干燥根,具有補血活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤腸通便的功效。本課題以當歸7個選育新品種(品系)(岷歸1-5號已審定)為研究對象,針對其種子質(zhì)量參差不齊、缺乏質(zhì)量評價控制標準,種子與藥材質(zhì)量缺乏相關(guān)性研究,不同栽培品種藥材缺乏藥效學、安全性評價,優(yōu)良品種選育工作與實際生產(chǎn)脫節(jié),未能進行有效推廣應用等現(xiàn)狀問題,綜合應用生藥學、中藥化學、藥理學、農(nóng)學等多學科的方法,集成ISSR、HPLC、 GC-MS、ICP-MS等技術(shù),借助灰色關(guān)聯(lián)度、熵權(quán)TOPSIS模型等數(shù)學分析方法,首次系統(tǒng)評價了當歸不同栽培品種(品系)種子與藥材質(zhì)量的相關(guān)性,并與引種朝鮮當歸、不同產(chǎn)地市售當歸進行對比,揭示和探討了“形—質(zhì)—效”的科學內(nèi)涵,具有理論意義和應用價值。主要研究結(jié)果如下：1、當歸不同栽培品種、引種朝鮮當歸、市售當歸種子的遺傳多樣性研究利用ISSR分子標記技術(shù),建立并優(yōu)化了當歸種子的ISSR-PCR反應體系,篩選出17條能準確鑒別當歸不同栽培品種種子的引物,分析得出通過重離子輻照生物育種方法選育出的岷歸3號、岷歸4號遺傳信息豐富,可以作為分子標記輔助育種的首選研究材料。2、當歸不同栽培品種種子的分級質(zhì)量標準研究結(jié)合其他農(nóng)作物種子質(zhì)量標準,以凈度、千粒重、發(fā)芽率、種子活力等為指標,制定了已審定的當歸栽培品種種子的分級質(zhì)量標準及甘肅地產(chǎn)當歸種子質(zhì)量標準,為當歸種子的質(zhì)量控制及其規(guī)范生產(chǎn)提供了參考資料。3、當歸不同栽培品種種子微觀形態(tài)鑒別利用掃描電子顯微鏡觀察分析得出,通過種子形狀、顏色等無法對當歸不同栽培品種種子進行鑒別,只能通過種子表面隆起及紋飾特征(一級紋理、二級紋理)進行準確鑒別,而且種子油室的個數(shù)及大小與種子含油量呈正相關(guān)。對于目前當歸市售種子混雜的情況,通過種子形狀、顏色、翅的有無、隆起間距、油室的分布情況可對正品當歸與摻偽朝鮮當歸、東當歸進行準確鑒別。4、當歸不同栽培品種種子含油量及組分分析首次鑒定出當歸種子油中11種脂肪酸成分,總結(jié)歸納出成分含量與種子成熟度的相關(guān)性,初步確定當歸主產(chǎn)地種子最佳采收期為8月22日至8月30日；主成分分析得出,己酸、油酸、癸酸是當歸種子共有的特征性脂肪酸組成；對樣品進行聚類分析可將當歸不同栽培品種(品系)及不同成熟度種子樣品進行分類。5、當歸不同栽培品種種子質(zhì)量的綜合評價以千粒重、發(fā)芽率、種子活力、生理生化指標、脂肪油含量為評價指標,借助灰色關(guān)聯(lián)分析方法,構(gòu)建了評價當歸種子質(zhì)量的灰色關(guān)聯(lián)分析模型。結(jié)果表明,岷歸4號、岷歸3號種子質(zhì)量最優(yōu)：其次為岷歸2號、岷歸1號及岷歸5號；90-03及2000-01種子質(zhì)量相對較差；市售當歸種子中,道地產(chǎn)區(qū)岷縣、漳縣的種子質(zhì)量較優(yōu),吉林、安國將東當歸、朝鮮當歸種子誤當作當歸種子出售。實驗表明,引種東當歸、朝鮮當歸、安國及吉林市售種子發(fā)芽率均低于52%,出苗率低于40%,質(zhì)量最差,不可用于生產(chǎn)。6、當歸不同栽培品種藥材質(zhì)量的綜合評價以揮發(fā)油、阿魏酸、丁烯基苯酞、藁本內(nèi)酯、歐當歸內(nèi)酯A、多糖、總黃酮浸出物含量為評價指標,借助TOPSIS法,構(gòu)建了基于多指標評價體系的當歸藥材質(zhì)量綜合評價TOPSIS模型,.結(jié)果表明,岷歸4號、岷歸3號、野生當歸藥材質(zhì)量最優(yōu),其次為岷縣、漳縣產(chǎn)當歸,以及栽培品系2000-01、栽培品種岷歸2號、岷歸5號、岷歸1號；引種朝鮮當歸、青海產(chǎn)當歸藥材質(zhì)量最差。其中岷歸4號揮發(fā)油含量分別是引種朝鮮當歸、青海產(chǎn)當歸的3.17、1.48倍,藁本內(nèi)酯的含量是引種朝鮮當歸、青海產(chǎn)當歸的6.58、1.69倍。通過上述研究,建議當歸現(xiàn)行質(zhì)量標準增加丁烯基苯酞、藁本內(nèi)酯兩個成分指標的含量測定及藥材的特征指紋圖譜。7、當歸不同栽培品種藥材與商品等級相關(guān)性研究根據(jù)《七十六種藥材商品規(guī)格標準》,首次對當歸不同栽培品種(品系)藥材全歸進行等級劃分,對各等級比例進行統(tǒng)計,結(jié)果表明,岷歸3號、岷歸4號、岷歸5號以一等全歸為主,比例在35%以上,其次為二等全歸,比例在33%以上,三等、四等全歸的比例不足30%,沒有五等全歸；岷歸1號、2000-01以二等全歸為主,比例為37.50-39.58%,三等、四等全歸的比例不足30%,五等全歸的比例在2%以上；岷歸2號以四等全歸為主,比例在33%以上,其次為一等全歸比例為22.92%,二等全歸比例為20.83%,三等全歸的比例不足20%,五等全歸的比例在4%以上；90-03以三等全歸為主,比例在33%以上,但一等全歸的比例僅為10.42%,二等全歸、四等全歸的比例均不足26.00%,五等全歸的比例達8%以上。按商品等級中優(yōu)等全歸的比例得出,岷歸3號、岷歸4號、岷歸5號為優(yōu)良種子。此外,對商品當歸等級劃分提出了可行性建議。8、當歸不同栽培品種藥材的藥效學評價對當歸不同提取部分進行補血、活血、補氣作用藥效評價,研究結(jié)果表明,按照傳統(tǒng)方法煎煮提取對乙酰苯肼(APH)致血虛癥狀改善作用更為明顯；當歸70%7,醇提取部分對氣虛癥狀改善作用更為明顯。采用篩選出的有效提取部分對當歸不同栽培品種(品系)藥材補血、活血、補氣作用進行藥效評價,岷歸3號、岷歸4號、野生當歸、岷縣及漳縣產(chǎn)當歸補血、活血、補氣作用優(yōu)于其他樣品。9、當歸不同栽培品種藥材安全性評價對當歸不同栽培品種(品系)、引種朝鮮當歸、野生當歸及不同產(chǎn)地當歸樣品進行了有機氯類農(nóng)藥殘留量、重金屬及有害元素含量測定,結(jié)果表明,90-03歸尾、2000-01歸尾、渭源產(chǎn)的當歸歸尾中γ-BHC超標,2000-01歸頭中銅(Cu)含量超標,其余樣品均符合《中華人民共和國藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準》規(guī)定。利用灰色關(guān)聯(lián)度法對其安全性進行綜合評價得出,安全性綜合排名在前10名的為：岷歸4號歸尾、歸身,岷歸3號歸身,岷歸4號歸頭,岷歸2號歸身,岷歸3號歸尾,岷歸2號歸尾,野生當歸歸身、歸尾及歸頭。岷歸4號、岷歸3號、野生當歸、岷歸2號整體安全性優(yōu)于其他樣品。此外,當歸不同部位對重金屬及有害元素的富集程度不同,歸頭對重金屬鉛(Pb)、鎘(Cd)、銅(Cu)的富集程度較高,歸尾對重金屬砷(As)、汞(Hg)的富集程度較高,歸身對重金屬的富集程度相對較低。對輻照選育品種岷歸3號、岷歸4號藥材進行小鼠急性毒性實驗研究,結(jié)果表明,當歸輻照選育品種藥材毒性很小,未測得灌胃給藥小鼠半數(shù)致死量LDso,其最大耐藥量(MTD)40 g/kg,最大耐受量倍數(shù)相當成人60kg用量的120倍,實驗證明當歸輻照選育品種藥材無明顯毒性,臨床常用量安全可行。10、當歸不同栽培品種種子與藥材相關(guān)性通過對當歸不同栽培品種種子與藥材進行質(zhì)量綜合研究,結(jié)果表明,岷歸4號、岷歸3號種子與藥材質(zhì)量排名結(jié)果一致；對其藥效及安全性進行評價,證明岷歸3號、岷歸4號藥效明顯,且安全性好。岷歸4號、岷歸3號屬于值得推廣應用的品質(zhì)好、安全有效的優(yōu)良品種。
【關(guān)鍵詞】：當歸 栽培品種 種子與藥材 質(zhì)量評價 藥效評價 安全性評價
【學位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S567.239
【目錄】：

• 中文摘要2-6
• ABSTRACT6-10
• 縮略語說明表10-13
• 引言13-16
• 第一章 當歸不同栽培品種種子質(zhì)量研究16-68
• 1.1 當歸不同栽培品種種子的ISSR分子標記16-25
• 1.2 分級質(zhì)量標準研究25-34
• 1.3 生理生化指標含量測定34-39
• 1.4 微觀形態(tài)組織學研究39-46
• 1.5 脂肪油含量測定及組分分析46-59
• 1.6 灰色關(guān)聯(lián)分析方法評價當歸種子質(zhì)量59-68
• 第二章 當歸不同栽培品種藥材質(zhì)量研究68-177
• 2.1 生物量測定68-71
• 2.2 檢查71-80
• 2.3 醇溶性浸出物測定80-84
• 2.4 GC-MS成分分析及指紋圖譜研究84-108
• 2.5 HPLC成分分析及指紋圖譜研究108-123
• 2.6 多糖含量測定123-132
• 2.7 總黃酮含量測定132-141
• 2.8 無機元素含量測定141-167
• 2.9 商品等級相關(guān)性研究167-171
• 2.9.1 當歸藥材商品的國家標準167
• 2.9.2 當歸不同栽培品種藥材商品等級劃分167-168
• 2.9.3 商品當歸市場等級劃分現(xiàn)狀168-169
• 2.9.4 商品當歸等級劃分建議169-170
• 2.9.5 小結(jié)與討論170-171
• 2.10 熵權(quán)TOPSIS模型對當歸不同栽培品種(品系)藥材質(zhì)量的綜合評價171-177
• 第三章 當歸不同栽培品種藥材的藥效評價177-186
• 3.1 補血、活血作用177-181
• 3.2 補氣作用181-185
• 3.3 小結(jié)與討論185-186
• 第四章 當歸不同栽培品種藥材的安全性評價186-206
• 4.1 有機氯類農(nóng)藥殘留量測定186-188
• 4.2 重金屬及有害元素含量測定188-191
• 4.3 灰色關(guān)聯(lián)分析方法評價當歸藥材安全性191-202
• 4.4 輻照選育當歸品種藥材的急性毒性實驗202-205
• 4.5 小結(jié)與討論205-206
• 第五章 當歸不同栽培品種種子與藥材質(zhì)量相關(guān)性分析206-209
• 5.1 優(yōu)良種子與藥材質(zhì)量的一致性206-207
• 5.2 優(yōu)良種子與藥材藥效驗證分析207
• 5.3 優(yōu)良種子與藥材安全性評價207-209
• 結(jié)論與討論209-214
• 文獻綜述214-217
• 致謝217-218
• 參考文獻218-225
• 在讀期間公開發(fā)表的學術(shù)論文、專著及科研成果225-228
• 附圖228-229

  本文關(guān)鍵詞：當歸不同栽培品種種子與藥材質(zhì)量的相關(guān)性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：372784