豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）是世界流行的豬病毒性傳染病,其病原體PRRS病毒（PRRSV）自1987年出現(xiàn)以來對養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。2006年我國爆發(fā)了由高致病性PRRS病毒（PRRSV）（Highly pathogenic PRRSV,HP-PRRSV）引發(fā)的PRRS,對我國養(yǎng)豬業(yè)產(chǎn)生了巨大危害。PRRSV感染引起免疫抑制,導致持續(xù)性感染,是造成PPRSV的防控和凈化困難的重要原因之一。細胞因子信號轉導抑制因子（Suppressors of cytokine signaling,SOCS）家族蛋白作為免疫負調(diào)控因子,有報道表明可以被病毒利用從而抑制宿主抗病毒免疫反應,從而導致病毒的持續(xù)性感染。而SOCS在PRRSV感染過程中的作用還鮮有報道。我們發(fā)現(xiàn)在SOCS家族八個成員中,PRRSV顯著上調(diào)SOCS1和SOCS3基因表達。因此,為進一步明確PRRSV致病機制,本論文對PRRSV調(diào)控SOCS1和SOCS3的表達機制以及其對病毒復制的影響進行了研究。1.本研究用PRRSV感染豬肺泡巨噬... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

PRRSV粒子電鏡圖(Dokland2010)

西北農(nóng)林科技大學博士學位論文4在一個114nt（PRRSV-1型）或148nt（PRRSV-2型）長度的非編碼區(qū)（3`-untranslatedregion，3`UTR），3`末端為一個poly（A）尾。3`UTR同樣存在遺傳多樣性，在PRRSV-1型和PRRSV-2型之間同源率約70%，但是同型病毒之間同源率高達96%(Choietal.2006,Verheijeetal.2002,BeerensandSnijder2007)。圖1-2PRRSV基因組結構及復制示意圖(KappesandFaaberg2015)Fig.1-2SchematicdiagramofPRRSVgenomestructureandreplication(KappesandFaaberg2015)如圖1-2，5`UTR和3`UTR中間包含至少11個開放閱讀框（OpenReadingFrame,ORF），依次為5`UTR-ORF1a/ORF1a-(TF)-ORF1b-ORF2a-ORF2b-ORF3-ORF4-ORF5/ORF5a-ORF6-ORF7-3`UTR-poly（A）(KappesandFaaberg2015,Verheijeetal.2002)。緊臨5`UTR下游，是一個包含兩個重疊序列的大ORF，占整個基因組的3/4，由ORF1a和ORF1b組成。ORF1a/b具有相同翻譯起始位點，但由兩個不同的核糖體移碼框（Ribosomalframeshift，RFS）完成擴增，編碼兩個大的多聚復制聚合酶前體（polypeptides,pp），即pp1a和pp1ab。以PRRSV-2型標準毒株VR-2332(U87392)為參考，RFS1位于非結構蛋白（nonstructuralprotein（nsp））2基因編碼區(qū)內(nèi)部（基因序列3889nt位點），RFS2位于nsp8/9基因編碼區(qū)內(nèi)部（基因序列7695nt位點）(Fangetal.2012)。如圖1-3，RFS1內(nèi)部又分兩個亞型移碼框：-1型移碼框和-2型移碼框。在翻譯過程中，7%的概率出現(xiàn)-1型移碼框翻譯并產(chǎn)生nsp2N蛋白；20%的概率出現(xiàn)-2型移碼框翻譯，該類型翻譯不會馬上終止，而是延伸到nsp2跨膜結構域，翻譯產(chǎn)生nsp2TF蛋白(Lietal.2014b,Fangetal.2012)。PRRSV的正鏈RNA暴露于細胞質中，即可翻譯病毒的非結構蛋白，其復制依賴于復制聚合酶。

第一章豬繁殖與呼吸綜合征病毒研究進展5圖1-3PRRSV基因組結構和核糖體移碼信號定位示意圖(Lietal.2014b)Fig.1-3SchematicdiagramofPRRSVgenomeorganizationandlocationofribosomalframeshiftingsignals(Lietal.2014b)病毒全長基因組轉錄產(chǎn)生兩個大的ORF，即ORF1a和ORF1b，主要編碼產(chǎn)生兩個大的多聚復制聚合酶蛋白前體。ORF1a編碼產(chǎn)生pp1a，ORF1b通過RFS翻譯出更大的多聚復制聚合酶前體pp1ab(Johanetal.1995)。pp1a和pplab被病毒編碼的另外四種重要的蛋白酶（木瓜樣半胱氨酸蛋白酶1α（Papain-likecysteineproteinases1α，PLP1α；nsp1α）、PLP1β（nsp1β）、PLP2（nsp2）和絲氨酸蛋白酶（Serineproteinases，SP；nsp4））裂解產(chǎn)生至少14個結構和功能各異的nsp。PLP1α和PLP1β分別裂解nsp1α↓nsp1β和nsp1β↓nsp2的接合點，PLP2裂解nsp2↓nsp3結合點，而SP裂解其余所有的nsp蛋白（nsp3-12）(Snijder,KikkertandFang2013)。ORF1b下游，即近3`端的基因RNA編碼病毒相關的結構蛋白。3`端基因組先以PRRSV基因組產(chǎn)生的負鏈RNA為模板，轉錄產(chǎn)生一系列的正鏈亞基因組RNA（subgenomicRNA,sgRNA），包括sgRNA2、sgRNA3、sgRNA4、sgRNA5、sgRNA6以及sgRNA7(vanMarleetal.1999)，然后以sgRNA為模板，轉錄產(chǎn)生所有的結構蛋白的ORF框，最后翻譯合成對應的結構蛋白。sgRNA2編碼ORF2和ORF2b，分別翻譯產(chǎn)生糖基化蛋白2（Glycoprotein2，GP2，GP2a）和非糖基化膜蛋白（E）；sgRNA3和sgRNA4分別編碼ORF3和ORF4，分別翻譯產(chǎn)生GP3和GP4。GP2、GP3和GP4共同形成三聚體復合物，在病毒入侵細胞過程中發(fā)揮作用(Dasetal.2010,Wissinketal.2005)。sgRNA5編碼兩個ORF，即ORF5和ORF5a。GP5蛋白由ORF5翻譯產(chǎn)生，是病毒最主要的糖蛋白；ORF5a蛋白由ORF5翻?

【參考文獻】：
期刊論文
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