本文關(guān)鍵詞：梨小食心蟲蛻皮激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑幾個(gè)關(guān)鍵基因的表達(dá)調(diào)控與功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：梨小食心蟲是一種嚴(yán)重危害核果和仁果類果樹的世界性蛀果害蟲,然而,很少有關(guān)于生長發(fā)育、抗藥性、性信息素生物合成等基因研究方面的報(bào)道。梨小食心蟲的基因信息也十分稀少,本論文對(duì)梨小食心蟲進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序,驗(yàn)證了蛻皮激素信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)情況；研究了保幼激素對(duì)蛻皮激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑基因的表達(dá)調(diào)控作用；對(duì)蛻皮激素受體EcR和USP基因,以及啟動(dòng)變態(tài)的早期轉(zhuǎn)錄因子BrC基因三種同型異構(gòu)體進(jìn)行了表達(dá)調(diào)控和功能研究。主要結(jié)論如下：(1)通過梨小食心蟲進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序研究,我們共獲得了81,922條transcripts和41,882條genes;對(duì)轉(zhuǎn)錄本序列做了GO分類、KOG分類以及KEGG代謝通路分類。在KOG分類和KEGG代謝通路中,均發(fā)現(xiàn)較多的與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄本序列,這也為我們后續(xù)的實(shí)驗(yàn)提供了豐富的基因信息。(2)從轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中獲得了6個(gè)候選內(nèi)參基因有關(guān)的共11條非冗余unigene。通過人工篩選查找到每個(gè)基因?qū)?yīng)的非冗余unigene序列。初步篩選了在不同發(fā)育時(shí)期處理?xiàng)l件下最穩(wěn)定的內(nèi)參基因?yàn)镋F-la,并用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。(3)在轉(zhuǎn)錄組注釋信息中總共查找到8個(gè)基因共13條非冗余unigene與蛻皮激素信號(hào)通路有關(guān),通過人工篩選查找到每個(gè)基因?qū)?yīng)的非冗余unigene序列。對(duì)轉(zhuǎn)錄組測序中蛻皮激素信號(hào)通路基因的表達(dá)情況進(jìn)行了文庫驗(yàn)證,結(jié)果與轉(zhuǎn)錄組測序中的結(jié)果一致。蛻皮激素信號(hào)通路基因在梨小食心蟲不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)研究結(jié)果表明,這些核受體基因均在幼蟲到蛹,蛹到成蟲的轉(zhuǎn)變過程中存在著不同程度的高表達(dá)。保幼激素類似物甲氧普林處理結(jié)果表明,蛻皮激素信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)均受到不同程度的抑制,保幼激素能調(diào)控蛻皮激素相關(guān)基因的表達(dá),且這些基因間存在著互相調(diào)控。(4)對(duì)獲得的EcRB1和USP1序列進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。氨基酸序列多重聯(lián)配結(jié)果顯示,梨小食心蟲EcRA、EcRB1和USP1基因的氨基酸序列與其他昆蟲的具有較高的一致性。進(jìn)化分析顯示,親緣關(guān)系近的鱗翅目物種的基因聚在一起。組織表達(dá)模式分析結(jié)果表明：梨小食心蟲EcRB1基因具有組織特異性,可能參與到變態(tài)過程的組織重建。梨小食心蟲USP1基因的表達(dá)也具有著時(shí)期和組織特異性。EcRB1和USP1基因干擾效率結(jié)果表明注射兩天后,干擾效果最好。梨小食心蟲EcRB1和USPl基因沉默后對(duì)蛻皮激素信號(hào)通路基因表達(dá)的影響結(jié)果表明,EcRB1和USP1能調(diào)控20E初級(jí)應(yīng)答基因的表達(dá)。梨小食心蟲生長發(fā)育統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,EcRB1和USP1參與梨小食心蟲變態(tài)發(fā)育過程,能使梨小食心蟲化蛹期延長,并影響梨小食心蟲的發(fā)育。(5)對(duì)獲得的梨小食心蟲BrC基因Z1、Z2、Z4三種同型異構(gòu)體進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。氨基酸序列多重聯(lián)配結(jié)果顯示,梨小食心蟲BrCZ1、BrCZ2和BrCZ4基因的氨基酸序列與其他昆蟲的具有較高的一致性。進(jìn)化分析表明,不同物種的BrC同型異構(gòu)體按著BrCZ1、BrCZ2、BrCZ4型劃分到這三個(gè)組中。每一組中,梨小食心蟲、家蠶、甜菜夜蛾等親緣關(guān)系較近的鱗翅目昆蟲的BrC基因聚在一起。梨小食心蟲BrC三種同型異構(gòu)體在不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)情況表明梨小食心蟲BrC的表達(dá)具有時(shí)期特異性。梨小食心蟲BrC基因的三種同型異構(gòu)體在不同組織中的表達(dá)表明它們可能參與變態(tài)期間的表皮形成和組織消亡等過程。保幼激素類似物甲氧普林處理對(duì)BrC三種同型異構(gòu)體的表達(dá)影響結(jié)果表明保幼激素能調(diào)控梨小食心蟲BrC基因的表達(dá)。干擾效率檢測表明,注射BrC dsRNA的梨小食心蟲體內(nèi)BrC基因的表達(dá)量顯著地受到了抑制。梨小食心蟲生長發(fā)育統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明了BrC基因參與梨小食心蟲的變態(tài)發(fā)育過程,并對(duì)其發(fā)育存在著一定的影響。
【關(guān)鍵詞】：梨小食心蟲 轉(zhuǎn)錄組 保幼激素 蛻皮激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 蛻皮激素受體EcR/USP 轉(zhuǎn)錄因子BrC
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S433.4
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 第一章 緒論8-19
• 1.1 梨小食心蟲概述8-11
• 1.2 轉(zhuǎn)錄組測序研究11-12
• 1.3 昆蟲蛻皮激素研究概述12-18
• 1.4 研究目的和意義18-19
• 第二章 梨小食心蟲轉(zhuǎn)錄組測序研究19-30
• 2.1 材料與方法19-22
• 2.2 結(jié)果與分析22-29
• 2.3 討論29
• 2.4 小結(jié)29-30
• 第三章 梨小食心蟲內(nèi)參基因的初步篩選30-38
• 3.1 材料與方法30-32
• 3.2 結(jié)果與分析32-36
• 3.3 討論36-37
• 3.4 總結(jié)37-38
• 第四章 蛻皮激素信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)及保幼激素類似物處理對(duì)其表達(dá)的研究38-49
• 4.1 材料與方法38-40
• 4.2 結(jié)果與分析40-48
• 4.3 討論48
• 4.4 總結(jié)48-49
• 第五章 蛻皮激素受體EcR/USP基因功能的研究49-68
• 5.1 材料與方法49-53
• 5.2 結(jié)果與分析53-64
• 5.3 討論64-66
• 5.4 總結(jié)66-68
• 第六章 蛻皮激素早期轉(zhuǎn)錄因子BrC基因功能的研究68-83
• 6.1 材料與方法68-70
• 6.2 結(jié)果與分析70-80
• 6.3 討論80-81
• 6.4 總結(jié)81-83
• 第七章 結(jié)論與展望83-87
• 7.1 結(jié)論83-85
• 7.2 創(chuàng)新點(diǎn)85
• 7.3 展望85-87
• 參考文獻(xiàn)87-101
• 致謝101-102
• 作者簡介102

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孟豪;趙利鼎;李先偉;李紀(jì)剛;任文俊;張利軍;馬瑞燕;;梨小食心蟲的天敵資源[J];山西農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年08期

  本文關(guān)鍵詞：梨小食心蟲蛻皮激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑幾個(gè)關(guān)鍵基因的表達(dá)調(diào)控與功能研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：354435