華山松大小蠹解毒酶基因克隆與表達(dá)響應(yīng)
發(fā)布時間:2021-11-25 02:59
華山松大小蠹(Dendroctonus armandi)是我國秦嶺巴山林區(qū)中最具破壞性的森林害蟲之一。華山松大小蠹主要危害30年以上的華山松(Pinus armandi)健康木,給華山松天然次生林和人工林帶來毀滅性的災(zāi)害。小蠹蟲利用自身和共生真菌的酶代謝和生理生化作用克服寄主樹木的原生性和誘導(dǎo)性抗性,從而完成在寄主樹木樹干組織內(nèi)的生存和生活史,其中解毒酶基因不僅能降解寄主樹木次生性萜類物質(zhì)的毒素,還參與小蠹蟲體內(nèi)信息素和激素的合成。本研究以華山松大小蠹為研究對象,通過對華山松大小蠹谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)和羧酸酯酶(Car Es)基因的系統(tǒng)發(fā)育,華山松大小蠹GSTs和Car Es基因在不同發(fā)育時期的表達(dá),GSTs基因在不同組織部位的表達(dá)差異,華山松大小蠹GSTs和Car Es基因?qū)θA山松揮發(fā)性物質(zhì)的表達(dá)響應(yīng),以及華山松大小蠹不同世代間體重、能量物質(zhì)儲存和解毒酶活性的差異等研究,旨在揭示華山松大小蠹主要解毒酶基因表達(dá)與克服寄主華山松抗性的機(jī)制。研究結(jié)果如下:1.華山松大小蠹第一代成蟲中雄蟲的比例為45.79%,而第二代為39.70%。不同性別和不同世代的華山松大小蠹體重、能量物質(zhì)儲...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:158 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1兩代華山松大小蠹雌雄成蟲的體重分布
第二章華山松大小蠹三大解毒酶活性差異與生長發(fā)育的關(guān)系25圖2-2不同世代華山松大小蠹的能量物質(zhì)儲備和解毒酶活性A糖原,B甘油三酯,C游離脂肪酸,D細(xì)胞色素b5,E還原型谷胱甘肽,F(xiàn)羧酸酯酶在不同世代、性別及世代和性別交互作用的雙因素方差分析。Earlyseason:第一代成蟲,Lateseason:第二代成蟲。每個生理指標(biāo)測定均進(jìn)行5個重復(fù),每個重復(fù)用蟲5頭(N=5×5)。(ns無顯著性,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)。Fig.2-2TheenergystoreanddetoxicationenzymesactivityintwogenerationofD.armandiContentofglycogen(A),triglyceride(B),freefattyacid(C),cytochromeb5(D),reducedglutathione(E)andcarboxylesterase(F)activityintwodifferentgenerationadultsofD.armandi.Earlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.Valuesarepresentedasthemean±SE.Measurementsforeachindexwereobtainedfromfivebiologicalreplicates(fivebeetlesforonereplicate)(N=5×5).Thesignificantdifferencebetweensexes,seasonsandS*SinteractionwithTwo-wayANOVA(ns:nosignificant,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).
第二章華山松大小蠹三大解毒酶活性差異與生長發(fā)育的關(guān)系27相對表達(dá)量圖2-3不同世代華山松大小蠹雄蟲19個細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5基因的表達(dá)水平Earlyseason:第一代成蟲,Lateseason:第二代成蟲;蛳鄬Ρ磉_(dá)量以2-ΔΔCt取log2后進(jìn)行作圖。每個基因表達(dá)量測定均進(jìn)行3個重復(fù),每個重復(fù)用蟲3頭(N=3×3)。*表達(dá)基因相對表達(dá)量之間的差異,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。Earlyseason:第一代成蟲,Lateseason:第二代成蟲。Fig.2-3Quantitativereal-timePCRanalysisoftranscriptlevelsof19cytochromeP450genesandDarmCyt-b5inmalesrelatedtofemalesfromtwoseasonadultsofD.armandiEarlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.2-ΔΔCtvalueswerelog2transformedforplottingasmean±SE.Eachgenetranscriptlevelwasobtainedfromthreebiologicalreplicates(threebeetlesforonereplicate)(N=3×3).*indicatethesignificantdifferencebetweensexesofthesameseasonwithOne-wayANOVA(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).2.3小結(jié)通過統(tǒng)計兩代華山松大小蠹成蟲的性別比例,并對兩代雌雄成蟲的體重、能量物質(zhì)儲存和解毒酶含量的測定,結(jié)果表明第一代和第二代成蟲都存在明顯的雌性偏好的差異,兩代華山松大小蠹成蟲性別比例失衡均達(dá)到顯著水平,并且第二代成蟲中的性別比例失衡更加顯著。不同性別和不同世代之間的華山松大小蠹的體重、能量物質(zhì)儲存和解毒酶活性均存在顯著性差異。與雄蟲相比,雌蟲具有更大的體重和更多的脂肪儲存,這是雌蟲為克服寄主抗性,并滿足產(chǎn)卵所表現(xiàn)的適應(yīng)性。不不同解毒酶基因
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]昆蟲谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的多樣性及其介導(dǎo)的抗藥性[J]. 尤燕春,謝苗,尤民生. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2013(03)
[2]家蠶羧酸酯酶基因Bmae35的克隆、序列分析及表達(dá)[J]. 楊微,齊登偉,余泉友,張澤. 昆蟲學(xué)報. 2011(06)
[3]利用木糖高產(chǎn)谷胱甘肽酵母菌株的誘變選育及培養(yǎng)條件優(yōu)化[J]. 王曉瓊,陳葉福,梁音,楊旭,肖冬光. 現(xiàn)代食品科技. 2011(05)
[4]昆蟲谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的基因組學(xué)研究及其介導(dǎo)的抗藥性[J]. 房守敏. 蠶學(xué)通訊. 2010(04)
[5]秦嶺華山松單萜類揮發(fā)物的動態(tài)變化[J]. 霍燕,陳輝. 西北林學(xué)院學(xué)報. 2010(05)
[6]高產(chǎn)谷胱甘肽酵母菌株的選育[J]. 杜麗平,肖冬光,時麗萍. 釀酒科技. 2010(02)
[7]棉鈴蟲和煙青蟲性信息素腺體脂肪醇和乙酸酯轉(zhuǎn)化的比較研究[J]. 王鴻雷,趙成華,閆云花,王琛柱. 昆蟲學(xué)報. 2008(09)
[8]發(fā)酵法生產(chǎn)谷胱甘肽研究進(jìn)展[J]. 朱玉強(qiáng). 發(fā)酵科技通訊. 2008(02)
[9]秦嶺細(xì)粘束孢對寄主華山松生理生化代謝的影響[J]. 蒲曉娟,陳輝,王勝軍. 西北林學(xué)院學(xué)報. 2008(02)
[10]酵母生產(chǎn)谷胱甘肽的培養(yǎng)條件研究[J]. 賈建萍,周彥鋼. 微生物學(xué)雜志. 2007(04)
博士論文
[1]華山松大小蠹和共生真菌P450基因差異性表達(dá)與解毒功能研究[D]. 代魯魯.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
本文編號:3517271
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:158 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1兩代華山松大小蠹雌雄成蟲的體重分布
第二章華山松大小蠹三大解毒酶活性差異與生長發(fā)育的關(guān)系25圖2-2不同世代華山松大小蠹的能量物質(zhì)儲備和解毒酶活性A糖原,B甘油三酯,C游離脂肪酸,D細(xì)胞色素b5,E還原型谷胱甘肽,F(xiàn)羧酸酯酶在不同世代、性別及世代和性別交互作用的雙因素方差分析。Earlyseason:第一代成蟲,Lateseason:第二代成蟲。每個生理指標(biāo)測定均進(jìn)行5個重復(fù),每個重復(fù)用蟲5頭(N=5×5)。(ns無顯著性,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)。Fig.2-2TheenergystoreanddetoxicationenzymesactivityintwogenerationofD.armandiContentofglycogen(A),triglyceride(B),freefattyacid(C),cytochromeb5(D),reducedglutathione(E)andcarboxylesterase(F)activityintwodifferentgenerationadultsofD.armandi.Earlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.Valuesarepresentedasthemean±SE.Measurementsforeachindexwereobtainedfromfivebiologicalreplicates(fivebeetlesforonereplicate)(N=5×5).Thesignificantdifferencebetweensexes,seasonsandS*SinteractionwithTwo-wayANOVA(ns:nosignificant,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).
第二章華山松大小蠹三大解毒酶活性差異與生長發(fā)育的關(guān)系27相對表達(dá)量圖2-3不同世代華山松大小蠹雄蟲19個細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5基因的表達(dá)水平Earlyseason:第一代成蟲,Lateseason:第二代成蟲;蛳鄬Ρ磉_(dá)量以2-ΔΔCt取log2后進(jìn)行作圖。每個基因表達(dá)量測定均進(jìn)行3個重復(fù),每個重復(fù)用蟲3頭(N=3×3)。*表達(dá)基因相對表達(dá)量之間的差異,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。Earlyseason:第一代成蟲,Lateseason:第二代成蟲。Fig.2-3Quantitativereal-timePCRanalysisoftranscriptlevelsof19cytochromeP450genesandDarmCyt-b5inmalesrelatedtofemalesfromtwoseasonadultsofD.armandiEarlyseason:Firstgenerationadult;Lateseason:Secondgenerationadult.2-ΔΔCtvalueswerelog2transformedforplottingasmean±SE.Eachgenetranscriptlevelwasobtainedfromthreebiologicalreplicates(threebeetlesforonereplicate)(N=3×3).*indicatethesignificantdifferencebetweensexesofthesameseasonwithOne-wayANOVA(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001).2.3小結(jié)通過統(tǒng)計兩代華山松大小蠹成蟲的性別比例,并對兩代雌雄成蟲的體重、能量物質(zhì)儲存和解毒酶含量的測定,結(jié)果表明第一代和第二代成蟲都存在明顯的雌性偏好的差異,兩代華山松大小蠹成蟲性別比例失衡均達(dá)到顯著水平,并且第二代成蟲中的性別比例失衡更加顯著。不同性別和不同世代之間的華山松大小蠹的體重、能量物質(zhì)儲存和解毒酶活性均存在顯著性差異。與雄蟲相比,雌蟲具有更大的體重和更多的脂肪儲存,這是雌蟲為克服寄主抗性,并滿足產(chǎn)卵所表現(xiàn)的適應(yīng)性。不不同解毒酶基因
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]昆蟲谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的多樣性及其介導(dǎo)的抗藥性[J]. 尤燕春,謝苗,尤民生. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2013(03)
[2]家蠶羧酸酯酶基因Bmae35的克隆、序列分析及表達(dá)[J]. 楊微,齊登偉,余泉友,張澤. 昆蟲學(xué)報. 2011(06)
[3]利用木糖高產(chǎn)谷胱甘肽酵母菌株的誘變選育及培養(yǎng)條件優(yōu)化[J]. 王曉瓊,陳葉福,梁音,楊旭,肖冬光. 現(xiàn)代食品科技. 2011(05)
[4]昆蟲谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的基因組學(xué)研究及其介導(dǎo)的抗藥性[J]. 房守敏. 蠶學(xué)通訊. 2010(04)
[5]秦嶺華山松單萜類揮發(fā)物的動態(tài)變化[J]. 霍燕,陳輝. 西北林學(xué)院學(xué)報. 2010(05)
[6]高產(chǎn)谷胱甘肽酵母菌株的選育[J]. 杜麗平,肖冬光,時麗萍. 釀酒科技. 2010(02)
[7]棉鈴蟲和煙青蟲性信息素腺體脂肪醇和乙酸酯轉(zhuǎn)化的比較研究[J]. 王鴻雷,趙成華,閆云花,王琛柱. 昆蟲學(xué)報. 2008(09)
[8]發(fā)酵法生產(chǎn)谷胱甘肽研究進(jìn)展[J]. 朱玉強(qiáng). 發(fā)酵科技通訊. 2008(02)
[9]秦嶺細(xì)粘束孢對寄主華山松生理生化代謝的影響[J]. 蒲曉娟,陳輝,王勝軍. 西北林學(xué)院學(xué)報. 2008(02)
[10]酵母生產(chǎn)谷胱甘肽的培養(yǎng)條件研究[J]. 賈建萍,周彥鋼. 微生物學(xué)雜志. 2007(04)
博士論文
[1]華山松大小蠹和共生真菌P450基因差異性表達(dá)與解毒功能研究[D]. 代魯魯.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
本文編號:3517271
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