血紅素加氧酶（Hem oxygenase,HMOX）是血紅素代謝中的關(guān)鍵限速酶,在機體低氧脅迫代謝調(diào)控過程中扮演著重要角色。藏綿羊（Ovis aries）在長期進化過程中形成了獨特的低氧適應(yīng)策略以維持自身的氧平衡。為了探索血紅素加氧酶家族基因（HMOX1和HMOX2）在藏綿羊低氧適應(yīng)遺傳機制中的作用,本研究選擇藏綿羊（低氧組）和湖羊（對照組）為研究對象,測定分析了藏綿羊和湖羊血液生理指標(biāo)的差異,克隆測定藏綿羊HMOX1和HMOX2基因mRNA序列并利用生物信息學(xué)方法分析其結(jié)構(gòu)及功能,采用RT-qPCR及PCR-SSCP技術(shù),對血紅素加氧酶家族基因（HMOX1和HMOX2）進行組織表達分析,并對其基因進行變異位點的篩查,進而分析變異位點對藏綿羊血液生理指標(biāo)性狀的影響。主要研究結(jié)果如下:1.藏綿羊低氧適應(yīng)的血液生理學(xué)特性研究通過分析藏綿羊（低氧組）和湖羊（對照組）十二項血液指標(biāo)發(fā)現(xiàn),PO₂、SO₂、HGB、HCT四項指標(biāo)與氧的代謝運輸有密切聯(lián)系,其在低氧條件下,藏綿羊PO₂、SO₂低于湖羊（P<0... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

哺乳動物細胞中血紅素降解的途徑Fig.1-1Thepathwayofhemedegradationinmammaliancells（引自：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0006291X05018449/Fig3）

甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019 屆博士論文HMOX1 基因的表達可被多種因素誘導(dǎo)，通過對人和鼠 HMOX1 調(diào)控序列的研究[63]發(fā)現(xiàn)，其在啟動子上游近端和轉(zhuǎn)錄起始上游存在長度為 268bp、161bp 的2 個增強子 E1、E2，附近有多個調(diào)節(jié)元件，包括應(yīng)激反應(yīng)元件（Stress-responseelement,StRE）、缺氧誘導(dǎo)反應(yīng)元件、AP- l 結(jié)合區(qū)、NF- KB 結(jié)合區(qū)、熱休克元件(heat- shock element,HSE) 和金屬調(diào)節(jié)元件等(見圖 2)，這些調(diào)節(jié)元件可誘導(dǎo)HMOX1 基因的表達[64]。

啟動子上的 κB 位點，然后結(jié)合在κB 位點上，并導(dǎo)致 HMOX1 基因的轉(zhuǎn)錄[73]。Keap1 /Nrf2 信號通路的傳導(dǎo)過程，在細胞正常情況下，NF-κB 在細胞質(zhì)中保持定位， Keap1 能夠與 Nrf2 結(jié)合合成 Keap1-Nrf2 復(fù)合物，從而抑制 Nrf2 的活性，使其不能進入細胞核，參與 HMOX1 基因轉(zhuǎn)錄。在受到氧化應(yīng)激時，Keap1-Nrf2復(fù)合物被破壞，Nrf2 能夠進入細胞核，與 HMOX1 基因的抗氧化反應(yīng)元件（ARE）結(jié)合，誘導(dǎo) HMOX1 基因的轉(zhuǎn)錄表達，進而保護細胞免受損傷[74]（見圖.1-3）。有研究表明，有一個應(yīng)激反應(yīng)元件（轉(zhuǎn)錄因子 AP-1 的結(jié)合位點）在鼠HMOX1基因的增強子區(qū)域，其大小 10 bp 的序列。當(dāng)機體受到外界刺激時，信號因子MAPK 和 AKt/PKB 分別磷酸化 c-Fos 和 c-Jun，使其能夠進入細胞核形成二聚體，與 HMOX1 基因的應(yīng)激反應(yīng)元件相結(jié)合，誘導(dǎo) HMOX 基因的表達[75]（見圖.1-3）。Lee 等[76]通過高氧誘導(dǎo)實驗進一步證實 AP-1 蛋白激活調(diào)節(jié)著 HMOX1基因的表達。


本文編號：3502259