豬鏈球菌（Streptococcus suis）是一種重要的人畜共患病原,能引起人腦膜炎、中毒性休克綜合征等臨床癥狀,威脅公共衛(wèi)生安全;也能引起豬腦膜炎、關(guān)節(jié)炎等疾病,對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。S.suis逃避宿主免疫防御機(jī)制是其致病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。為研究豬鏈球菌的小鼠感染模型,本實(shí)驗(yàn)室此前將一株9型S.suis DN13在小鼠體內(nèi)連續(xù)傳代,獲得了對(duì)小鼠毒力極大增強(qiáng)的菌株。在本研究中以傳代獲得的強(qiáng)毒菌株在小鼠中研究S.suis的致病機(jī)理。從DN13傳代后細(xì)菌第10代、20代和30代中各隨機(jī)挑選一個(gè)單菌落（分別命名為SS9-P10、SS9-P20和SS9-P30）,并測(cè)定了對(duì)ICR小鼠中LD50數(shù)值。結(jié)果發(fā)現(xiàn)這3個(gè)傳代菌株毒力比較接近,LD50均在104CFU數(shù)量級(jí),而親本株DN13 107CFU攻毒對(duì)小鼠不致死。為了闡明傳代菌株毒力增強(qiáng)的分子機(jī)理:（1）我們對(duì)3個(gè)不同代次的傳代菌株SS9-P10、SS9-P20、SS9-P30和親本菌株DN13進(jìn)行了生物學(xué)表型比較研究,結(jié)果顯示3個(gè)傳代菌株比親本菌株DN13抗氧化和高溫應(yīng)激能力、生物被膜形成能力均顯著增高（P<0.05）,但3個(gè)... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：104 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

DN13及其傳代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30生長(zhǎng)曲線

第二章9型豬鏈球菌DN13與傳代菌株的生物學(xué)表型比較研究17首先比較了不同濃度的H2O2處理20min后親本菌株的存活率。結(jié)果0.01MH2O2處理20min后DN13存活率幾乎不受影響，而1MH2O2處理20min后幾乎沒有存活，而在0.1MH2O2處理有將近10%的存活率，故我們選擇0.1MH2O2處理20min作為氧化應(yīng)激處理。相比DN13在0.1MH2O2處理20min后10%以下的存活率，傳代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30同樣處理?xiàng)l件下存活率超過24%，顯著高于DN13（P<0.05），但三個(gè)傳代菌株之間對(duì)H2O2耐受性差異不顯著（圖2-2）。圖2-2.DN13及其傳代菌株對(duì)H2O2的耐受性Figure2-2.SurvivalpercentageofDN13anditspassagesinresponsetoH2O2S.suis感染宿主過程中會(huì)誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生炎癥，機(jī)體體溫升高是炎癥表現(xiàn)之一。豬可以感染多種哺乳動(dòng)物，包括人�？紤]到人的體溫一般不會(huì)超過42℃，故以42℃作為高溫應(yīng)激條件。結(jié)果在42℃培養(yǎng)下，約63%的DN13可以存活，而三個(gè)傳代菌株在42℃條件下生長(zhǎng)幾乎不受影響（圖2-3），顯著高于DN13（P<0.05）。圖2-3.DN13及其傳代菌株在42℃的存活率Figure2-3.SurvivalpercentagesofDN13anditspassagesat42C2.4傳代菌株對(duì)小鼠全血的敏感性與DN13無(wú)顯著差異哺乳動(dòng)物血液中，正常情況下是無(wú)菌的。血液中含大量具有殺菌活性的物質(zhì)，如溶菌酶、抗菌肽等。細(xì)菌在致病過程中，如果要建立全身性或系統(tǒng)性感染，往往需要通過血液循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)，使病原擴(kuò)散至全身[116]。因此，耐受血液中殺菌物質(zhì)是細(xì)菌建立全身性感染的必要條件。為了研究DN13的傳代菌株毒力增強(qiáng)與對(duì)血液中殺菌物質(zhì)耐受性增強(qiáng)有關(guān)，我們比較了DN13和它傳代菌株對(duì)小鼠全血?dú)⒕镔|(zhì)的耐受性試驗(yàn)。結(jié)果顯示，

第二章9型豬鏈球菌DN13與傳代菌株的生物學(xué)表型比較研究17首先比較了不同濃度的H2O2處理20min后親本菌株的存活率。結(jié)果0.01MH2O2處理20min后DN13存活率幾乎不受影響，而1MH2O2處理20min后幾乎沒有存活，而在0.1MH2O2處理有將近10%的存活率，故我們選擇0.1MH2O2處理20min作為氧化應(yīng)激處理。相比DN13在0.1MH2O2處理20min后10%以下的存活率，傳代菌株SS9-10、SS9-20和SS9-30同樣處理?xiàng)l件下存活率超過24%，顯著高于DN13（P<0.05），但三個(gè)傳代菌株之間對(duì)H2O2耐受性差異不顯著（圖2-2）。圖2-2.DN13及其傳代菌株對(duì)H2O2的耐受性Figure2-2.SurvivalpercentageofDN13anditspassagesinresponsetoH2O2S.suis感染宿主過程中會(huì)誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生炎癥，機(jī)體體溫升高是炎癥表現(xiàn)之一。豬可以感染多種哺乳動(dòng)物，包括人�？紤]到人的體溫一般不會(huì)超過42℃，故以42℃作為高溫應(yīng)激條件。結(jié)果在42℃培養(yǎng)下，約63%的DN13可以存活，而三個(gè)傳代菌株在42℃條件下生長(zhǎng)幾乎不受影響（圖2-3），顯著高于DN13（P<0.05）。圖2-3.DN13及其傳代菌株在42℃的存活率Figure2-3.SurvivalpercentagesofDN13anditspassagesat42C2.4傳代菌株對(duì)小鼠全血的敏感性與DN13無(wú)顯著差異哺乳動(dòng)物血液中，正常情況下是無(wú)菌的。血液中含大量具有殺菌活性的物質(zhì)，如溶菌酶、抗菌肽等。細(xì)菌在致病過程中，如果要建立全身性或系統(tǒng)性感染，往往需要通過血液循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)，使病原擴(kuò)散至全身[116]。因此，耐受血液中殺菌物質(zhì)是細(xì)菌建立全身性感染的必要條件。為了研究DN13的傳代菌株毒力增強(qiáng)與對(duì)血液中殺菌物質(zhì)耐受性增強(qiáng)有關(guān)，我們比較了DN13和它傳代菌株對(duì)小鼠全血?dú)⒕镔|(zhì)的耐受性試驗(yàn)。結(jié)果顯示，

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬鏈球菌2型體外刺激3D4/21豬肺泡巨噬細(xì)胞的炎癥相關(guān)細(xì)胞因子mRNA轉(zhuǎn)錄分析[J]. 汪偉,何孔旺,倪艷秀,呂立新,周俊明,張雪寒,俞正玉,茅愛華,溫立斌,王小敏,李彬,郭容利.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2013(03)

博士論文
[1]MsmK調(diào)控豬鏈球菌生長(zhǎng)和致病性的研究[D]. 譚美芳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]致仔豬腦膜炎新型豬鏈球菌的鑒定[D]. 潘子豪.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]豬鏈球菌生物被膜形成及致病機(jī)理研究[D]. 汪洋.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]深度測(cè)序揭示多重耐藥豬鏈球菌R61的耐藥機(jī)制及線粒體呼吸鏈蛋白的共進(jìn)化研究[D]. 楊明.中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所 2011

碩士論文
[1]9型豬鏈球菌在小鼠體內(nèi)的傳代適應(yīng)及比較基因組學(xué)研究[D]. 魏榕.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3428526