抗赤霉病RNA干擾片段的鑒定及轉(zhuǎn)玉米VP1基因小麥的抗穗發(fā)芽機(jī)理
發(fā)布時(shí)間:2021-09-24 22:03
小麥赤霉病是我國(guó)小麥生產(chǎn)上的重要病害,不僅嚴(yán)重降低產(chǎn)量,還產(chǎn)生真菌毒素。抗病資源匱乏是赤霉病未能得到有效控制的重要原因之一。穗發(fā)芽是我國(guó)小麥主產(chǎn)區(qū)的重要災(zāi)害,穗發(fā)芽導(dǎo)致產(chǎn)量、品質(zhì)及種子活力降低。轉(zhuǎn)玉米Vp1基因可提高小麥的穗發(fā)芽抗性,但其調(diào)控機(jī)理仍不十分清楚。本研究包括兩部分工作。在第一部分中,鑒定了4個(gè)赤霉菌基因RNAi片段(Chs7-3,Chs7-4,Gls-6和Myo II-14),體外轉(zhuǎn)錄的雙鏈RNA,能高效抑制赤霉病致病菌禾谷鐮刀菌生長(zhǎng)。將這些RNAi片段及赤霉菌其它基因的RNAi片段,與穎殼特異啟動(dòng)子Lem2或組成型啟動(dòng)子Ubiquitin結(jié)合,經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)入小麥品種,篩選獲得轉(zhuǎn)基因小麥株系25個(gè),接種鑒定其赤霉病抗性的結(jié)果如下:1.轉(zhuǎn)Lem2驅(qū)動(dòng)的Chs7-3-Chs7-4小麥溫室花期接種表明,T5代2個(gè)轉(zhuǎn)基因株系(YULC2和YCLC)比未轉(zhuǎn)化揚(yáng)麥158對(duì)照的赤霉病抗性顯著提高37%-43%;T6代田間花期接種鑒定中,3個(gè)株系(YULC2、YULC4和YCLC)比未轉(zhuǎn)化揚(yáng)麥158對(duì)照的抗性顯著提高37%-49%,麥粒毒素含量降低53%-92%。2.轉(zhuǎn)Ubiquitin...
【文章來(lái)源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:135 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
小麥赤霉病病穗(A)及我國(guó)小麥赤霉病在1990年代中期之前的分布(Chenetal2000)(B)
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2019屆博士研究生學(xué)位論文2較低、危害較輕(圖1,橘色區(qū)域);在北方麥區(qū),多為偶爾發(fā)病區(qū)域(圖1,黃色區(qū)域)。但是,近年來(lái)隨著全球氣候變暖,以及農(nóng)田耕作制度變化,水稻-小麥、玉米-小麥輪作以及秸稈還田等措施推廣應(yīng)用,導(dǎo)致小麥赤霉病發(fā)生流行頻率越來(lái)越高,2000年以來(lái)長(zhǎng)江中下游小麥赤霉病已經(jīng)大流行7次,嚴(yán)重發(fā)病的很多田塊顆粒無(wú)收。同時(shí),小麥赤霉病流行已向過(guò)去很少發(fā)病的北方小麥主產(chǎn)區(qū)擴(kuò)展(袁淑杰等,2007),一些過(guò)去屬于輕度流行區(qū)域如黃淮流域的河南、山東等小麥主產(chǎn)區(qū),現(xiàn)在也發(fā)病非常嚴(yán)重;黃淮麥區(qū)和關(guān)中麥區(qū),近年也曾發(fā)生小麥赤霉病特大流行,一些黃淮麥區(qū)田塊發(fā)病極為嚴(yán)重,造成大面積減產(chǎn)。因此,赤霉病已成為廣泛影響我國(guó)小麥生產(chǎn),以及食品安全的重要因素,目前尚未能得到有效控制。AB圖1小麥赤霉病病穗(A)及我國(guó)小麥赤霉病在1990年代中期之前的分布(Chenetal2000)(B)Fig.1WheatspikewithFusariumheadblightdisease(A)anddistributionofwheatscabinChinabeforethemid-1990s(Chenetal2000)(B)綠色:嚴(yán)重流行區(qū)域;橘色:輕度流行區(qū)域;黃色:偶爾流行區(qū)域
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2019屆博士研究生學(xué)位論文4禾谷鐮刀菌產(chǎn)生的毒素主要包括脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)、雪腐鐮刀菌烯醇(Nivalenol,NIV),以及它們的衍生物3-乙;-DON(3-acetyl-deoxynivalenol,3-Ac-DON)和15-乙;-DON(15-acetyl-deoxynivalenol,15-Ac-DON)等,這些毒素在禾谷鐮刀菌致病過(guò)程中具有重要作用。侵染我國(guó)麥類作物的禾谷鐮刀菌中,約80%產(chǎn)生DON毒素,20%產(chǎn)生NIV毒素,所以DON是污染我國(guó)小麥的主要真菌毒素(Yangetal2018;Zhangetal2007)。DON也是世界上污染量最大、污染范圍最廣的真菌毒素。Zhang等化學(xué)測(cè)定了湖北省2009年14個(gè)區(qū)域收獲的小麥籽粒的鐮刀菌毒素,含量分布為0.59-15.28mg/kg,其中12個(gè)區(qū)域的樣品超標(biāo)(≥1mg/kg),有的超過(guò)規(guī)定限量達(dá)10倍以上(Zhangetal2013)。Dong等(2017)于2015和2016年收集江蘇11個(gè)不同小麥樣品,化學(xué)測(cè)定毒素結(jié)果表明,小麥籽粒的DON毒素含量平均分別為2.87mg/kg(2015)和2.6mg/kg(2016)。同時(shí),收獲的麥粒在儲(chǔ)藏過(guò)程中毒素含量還會(huì)進(jìn)一步增加(Yuanetal2018)。DON、圖2禾谷鐮刀菌生活周期(Trail2009)(左上角:PDA上的菌絲)Fig.2LifecycleofFusariumgraminearum(Trail2009)
本文編號(hào):3408513
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【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
小麥赤霉病病穗(A)及我國(guó)小麥赤霉病在1990年代中期之前的分布(Chenetal2000)(B)
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2019屆博士研究生學(xué)位論文2較低、危害較輕(圖1,橘色區(qū)域);在北方麥區(qū),多為偶爾發(fā)病區(qū)域(圖1,黃色區(qū)域)。但是,近年來(lái)隨著全球氣候變暖,以及農(nóng)田耕作制度變化,水稻-小麥、玉米-小麥輪作以及秸稈還田等措施推廣應(yīng)用,導(dǎo)致小麥赤霉病發(fā)生流行頻率越來(lái)越高,2000年以來(lái)長(zhǎng)江中下游小麥赤霉病已經(jīng)大流行7次,嚴(yán)重發(fā)病的很多田塊顆粒無(wú)收。同時(shí),小麥赤霉病流行已向過(guò)去很少發(fā)病的北方小麥主產(chǎn)區(qū)擴(kuò)展(袁淑杰等,2007),一些過(guò)去屬于輕度流行區(qū)域如黃淮流域的河南、山東等小麥主產(chǎn)區(qū),現(xiàn)在也發(fā)病非常嚴(yán)重;黃淮麥區(qū)和關(guān)中麥區(qū),近年也曾發(fā)生小麥赤霉病特大流行,一些黃淮麥區(qū)田塊發(fā)病極為嚴(yán)重,造成大面積減產(chǎn)。因此,赤霉病已成為廣泛影響我國(guó)小麥生產(chǎn),以及食品安全的重要因素,目前尚未能得到有效控制。AB圖1小麥赤霉病病穗(A)及我國(guó)小麥赤霉病在1990年代中期之前的分布(Chenetal2000)(B)Fig.1WheatspikewithFusariumheadblightdisease(A)anddistributionofwheatscabinChinabeforethemid-1990s(Chenetal2000)(B)綠色:嚴(yán)重流行區(qū)域;橘色:輕度流行區(qū)域;黃色:偶爾流行區(qū)域
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2019屆博士研究生學(xué)位論文4禾谷鐮刀菌產(chǎn)生的毒素主要包括脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)、雪腐鐮刀菌烯醇(Nivalenol,NIV),以及它們的衍生物3-乙;-DON(3-acetyl-deoxynivalenol,3-Ac-DON)和15-乙;-DON(15-acetyl-deoxynivalenol,15-Ac-DON)等,這些毒素在禾谷鐮刀菌致病過(guò)程中具有重要作用。侵染我國(guó)麥類作物的禾谷鐮刀菌中,約80%產(chǎn)生DON毒素,20%產(chǎn)生NIV毒素,所以DON是污染我國(guó)小麥的主要真菌毒素(Yangetal2018;Zhangetal2007)。DON也是世界上污染量最大、污染范圍最廣的真菌毒素。Zhang等化學(xué)測(cè)定了湖北省2009年14個(gè)區(qū)域收獲的小麥籽粒的鐮刀菌毒素,含量分布為0.59-15.28mg/kg,其中12個(gè)區(qū)域的樣品超標(biāo)(≥1mg/kg),有的超過(guò)規(guī)定限量達(dá)10倍以上(Zhangetal2013)。Dong等(2017)于2015和2016年收集江蘇11個(gè)不同小麥樣品,化學(xué)測(cè)定毒素結(jié)果表明,小麥籽粒的DON毒素含量平均分別為2.87mg/kg(2015)和2.6mg/kg(2016)。同時(shí),收獲的麥粒在儲(chǔ)藏過(guò)程中毒素含量還會(huì)進(jìn)一步增加(Yuanetal2018)。DON、圖2禾谷鐮刀菌生活周期(Trail2009)(左上角:PDA上的菌絲)Fig.2LifecycleofFusariumgraminearum(Trail2009)
本文編號(hào):3408513
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