本論文以飼喂不同日糧的奶牛乳腺組織為材料,進行轉(zhuǎn)錄組測序探討奶牛乳腺組織差異基因的表達,測序結(jié)果提示PPARG途徑在不同日糧組間有明顯的差異,結(jié)合乳中脂肪酸的變化推測PPARG途徑的變化與乳脂的合成有關(guān)聯(lián)。因此,通過腺病毒介導的RNA干擾、過表達以及外源添加長鏈飽和及不飽和脂肪酸驗證PPARG基因在奶牛乳腺上皮細胞中對脂肪合成的影響及其機理。本論文的主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.本試驗研究了奶牛飼喂不同粗飼料和精粗比的日糧后,乳中脂肪酸及乳腺組織轉(zhuǎn)錄水平的差異。試驗采取單因素完全隨機試驗設(shè)計,將30頭體重相近、泌乳中期的經(jīng)產(chǎn)荷斯坦奶牛隨機分為3個組,分別飼喂3種日糧,即混合粗飼料組（MF）,精粗比為46:54;高精料秸稈組（CS1）,精粗比為65:35;低精料秸稈組（CS2）,精粗比為46:54。試驗包括3周的預(yù)飼期和9周的正式試驗期,每3周為一個試驗周期。每個試驗周期采集乳樣,試驗期最后一天采集乳腺組織樣品。結(jié)果顯示,CS2組與MF組的乳脂率無差異（P>0.05）,但CS2組乳中長鏈脂肪酸、單不飽和脂肪酸以及C18:3含量顯著高于MF組,而從頭合成的脂肪酸和飽和脂肪酸含量則顯著低... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

奶牛乳腺內(nèi)脂肪酸合成代謝途徑Fig.2Metabolicpathwayoffattyacidsinbovinemammarygland注：引自Bionaz和Loor，2008a[17]

輔酶 A（Ma 和 Corl，2012）[24]。經(jīng)過活化后，乙酰輔酶 A 在乙酰輔酶 A 羧CACA）的催化下合成丙二酰輔酶 A，此過程為不可逆反應(yīng)。ACACA 在所有胞中均有表達，其中在脂類合成相關(guān)組織中表達豐度最高。ACACA 也被認中短鏈脂肪酸的限速步驟。與 ACACA 共同起到調(diào)控作用的酶是脂肪酸ASN）。從頭合成時，為脂肪酸直接提供二碳單位的不是乙酰輔酶 A，而是其丙二酰輔酶 A。在 FASN 的催化作用下，乙酰輔酶 A（或少量的丁酰輔酶 A酰輔酶 A 縮合，為脂肪酸羧基端添加 2 個碳原子。乙酰輔酶 A 經(jīng)過七次延可生成脂肪酸從頭合成的主要產(chǎn)物棕櫚酸，合成產(chǎn)物最后被水解為游離脂arber 等，1997）[25]。C16 及長鏈脂肪酸無法通過 FASN 反應(yīng)進一步延長碳鏈成途徑為乳中脂肪酸提供了中短鏈（C4-C16）脂肪酸（Wakil 等，1983）[26入泌乳階段時 ACACA 和 FASN 的 mRNA 水平和酶活性均顯著上升，CA 的增幅大于 FASN。與此類似，測定 ACACA 和 FASN 流量控制系數(shù)，的脂肪酸從頭合成由 ACACA 所控制，說明 FASN 在剩余的 37%脂肪酸的合同樣起到?jīng)Q定性作用（Wright 等，2006）[27]。

牛奶中的乳脂最終以乳脂肪球的形式包裹在乳脂肪球膜中并分泌到乳中。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的乳脂滴相互溶合在一起，然后這些更大的胞質(zhì)脂滴移動到頂膜，最后從乳腺上皮細胞分泌出去（圖4，途徑A）。另外，許多乳脂滴被釋放后直接轉(zhuǎn)移到頂膜而體積大小不變（圖4，途徑B）。乳中脂滴的組裝受到多種蛋白的調(diào)控，主要包括嗜乳脂蛋白亞家族1成員A1、脂肪分化相關(guān)蛋白以及黃嚷吟脫氫酶。乳脂滴的頂膜分泌過程由這三種蛋白共同作用，聚合形成蛋白核心（劉超英等，2016）[53]。盡管大多數(shù)牛奶脂滴的平均直徑大約在4μm，但事實上80%以上的脂滴其直徑小于1μm（Bauman等，2006）[54]。圖 4 奶牛乳腺上皮細胞內(nèi)脂滴的主要分泌途徑Fig.4 Main pathways of lipid droplet release in bovine mammary epithelial cells注：引自Mather和Keenan

【參考文獻】：
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本文編號：3313331