植物根際促生菌（Plantgrowth-promotingrhizobacteria,PGPRs）具有植物促生及土傳病原菌生防功能,合理施用含PGPRs的生物肥料是實(shí)現(xiàn)我國化肥減施、促進(jìn)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的有效途徑。生物肥料中的PGPRs施入土壤后需在作物根際有效定殖才能發(fā)揮作用,而由根系分泌物介導(dǎo)的PGPRs向根表的趨化過程是其有效定殖的重要前提。解淀粉芽孢桿菌是根際環(huán)境中一類比較重要的PGPRs,然而對其在根際趨化分子機(jī)制的相關(guān)研究鮮有報(bào)道。解淀粉芽孢桿菌SQR9（Bacillus amyloliquefaciens SQR9,以下簡稱SQR9）是本實(shí)驗(yàn)室分離自健康黃瓜根際并廣泛應(yīng)用的植物根際促生菌,前期研究發(fā)現(xiàn)菌株SQR9對黃瓜根系分泌物中的多種小分子有機(jī)酸表現(xiàn)出較強(qiáng)趨化性。在此基礎(chǔ)上,本文緊緊圍繞菌株SQR9趨化黃瓜根際過程中相互作用的兩個(gè)方面,即菌株 SQR9 中甲基趨化受體蛋白（Methyl-acceptingchemotaxisproteins,MCPs）和黃瓜根系分泌物（Cucumber root exudates,CREs）中的趨化物,開展了一系列研究。首先,依據(jù)MCPs... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：134 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－２大腸桿菌的趨化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑示意圖（Ｐｏｒｔｅｒ?ｅｔａｌ．，２０１１）??ｕｒｅ?１－２?Ｔｈｅｃｏｈｏｘｉｓａｈｗａ

物的機(jī)制和規(guī)律具有重要意義（Ａｌｖａｒｏ?ｅｔ??ａｌ．，?２０１７）。甲基化結(jié)構(gòu)域，由兩個(gè)螺旋束構(gòu)成，攜帶保守的谷氨酰胺和谷氨酸殘基，??可被甲基轉(zhuǎn)移酶ＣｈｅＲ甲基化，被甲基酯酶ＣｈｅＢ去甲基化，用于適應(yīng)趨化效應(yīng)物濃??度變化。另外，甲基化結(jié)構(gòu)域可以作為判斷甲基趨化受體蛋白的評判標(biāo)準(zhǔn)（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ??ａｎｄ?Ｚｈｕｌｉｎ，?２００７）。??研究發(fā)現(xiàn)，己經(jīng)確定的ＬＢＤ種類約八十多種，而未被發(fā)現(xiàn)的ＬＢＤ數(shù)量將遠(yuǎn)遠(yuǎn)超??過該數(shù)字（Ｗｕｉｃｈｅｔ?ａｎｄ?Ｚｈｕｌｉｎ，２０１０）。如圖１－３所示，一共分析了?２６５３０條序列，其??中１０６５８條序列沒有ＬＢＤ或?qū)儆谖粗愋停蹋拢�，其它１５８７２條序列存在己知ＬＢＤ。??ＬＢＤ類型中豐度最高的依次為４ＨＢ、ｄＣａｃｈｅ和ＰＡＳ：?４ＨＢ是豐度最高的，占了?３１?％，??普遍存在于細(xì)菌和古菌中（ＵｌｒｉｃｈａｎｄＺｈＵｌｉｎ，２００５），尤其是大腸桿菌中研宄的最透徹??（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ?ｅｔａｌ．，２０１５）；?Ｃａｃｈｅ?又分為?ｓＣａｃｈｅ?和?ｄＣａｃｈｅ，共計(jì)占?３３?％，其中?ｄＣａｃｈｅ??的豐度遠(yuǎn)高于ｓＣａｃｈｅ，僅次于４ＨＢ，而且ｄＣａｃｈｅ與配體的結(jié)合位點(diǎn)全部位于膜遠(yuǎn)端??（Ａｌｖａｒｏｅｔａｌ．，２０１７）；?ＰＡＳ的豐度排第三，與前兩種主要存在于原核生物中的結(jié)構(gòu)域??不同，ＰＡＳ也廣泛存在于真核生物中，而且?guī)缀跛械模校粒又淮嬖谟诎|(zhì)中（Ｔａｙｌｏｒ??ａｎｄ?Ｚｈｕｌｉｎ，?１９９９；?Ｈｅｎｒｙ?ａｎｄ?Ｃｒｏｓｓｏｎ，?２０１１），研宄發(fā)現(xiàn)，ＰＡＳ與趨氧性和能量趨化的關(guān)??系都比較密切（Ａｌｖａｒｏ?ｅｔａｌ．，２０１７）；除上述三種ＬＢＤ結(jié)構(gòu)域（

終獲得ＳＱＲ９中所有趨化受體基因的突變體。??＃？？．－?ＵＰ?ｄｏｗｎ?ｂａｃｋ???＾?ｈｈ???｜?Ｆｕｓｉｏｎ?Ｐ（?Ｒ??｜?Ｔｒａｎｓｆｏｒｍ??ＵＰ?ｄｏｗｎ?ｂａｃｋ????■■???Ｉ?ＳｏｉｒｒｔｉｏＱ?ｏｎ?Ｓｐｃ??ｔｈｒ?？??、、??＾???ｔ?ｉ??＼?／??、、???????，?’??｜?Ｓｒｌｒｃｔｉｏｉｉ?ｏｎ?Ｉ）Ｌ－４－＜?ｌ－Ｐｂｃ??＜ｈｒ￣ａｉＫＨ???圖２－１基因無痕敲除的技術(shù)路線??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｒｏｕｔｅ?ｏｆ?ｍａｒｋｅｒ－ｆｒｅｅ?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ?ｄｅｌｅｔｉｏｎ??１．２．３菌株ＳＱＲ９互補(bǔ)菌株構(gòu)建??利用融合ＰＣＲ技術(shù)，將回補(bǔ)基因（如圖２－２，攜帶自身啟動(dòng)子，、抗性基??因片段（ｃ／ｗ或ｉｐｃ）以及插入位點(diǎn)上下游同源片段和ｏｍ＿）＾－Ｄｎ）進(jìn)行融合，??經(jīng)同源重組雙交換后，插入ＳＱＲ９染色體基因組的淀粉酶基因位點(diǎn)，得到互補(bǔ)菌株，??構(gòu)建融合片段步驟詳見本章方法１．２．２中所述。??２２??

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3272949