昆蟲病原線蟲新種Heterorhabditis beicherriana的分類鑒定及其生物防治的應(yīng)用探討與機(jī)理研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-20 09:10
由于昆蟲病原線蟲是一種專性寄生性天敵,針對(duì)不同的害蟲使用不同的線蟲種或品系進(jìn)行防治,能夠達(dá)到最佳的防治效果,所以正確鑒定昆蟲病原線蟲的種類就顯得尤為重要。采用形態(tài)學(xué)鑒定和ITS區(qū)序列分析相結(jié)合的方法,通過對(duì)新分離的Cherry線蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)、ITSrDNA和28S rDNA基因系統(tǒng)發(fā)育等指標(biāo)分析,最終確定Cherry線蟲為異小桿科異小桿屬的一個(gè)新種,并取名為(Heterorhabditis beicherriana)。此線蟲的種名字的擬定是根據(jù)拉丁名的法則,"beicherriana"的意義是北京地區(qū)“bei”,櫻桃園‘’cherr",再加上后綴‘’iana"。本文對(duì)其生物學(xué)、生態(tài)學(xué)特性和侵染致死機(jī)理進(jìn)行了研究,以期在田間應(yīng)用時(shí),讓此線蟲充分有效發(fā)揮生防作用。(1) Cherry線蟲對(duì)昆蟲寄主的侵染力較好,可以作為生防因子開發(fā)利用,且可以考慮將其作為相對(duì)高溫干燥地區(qū)地下害蟲的生防制劑推廣應(yīng)用。此外,Cherry線蟲是可以經(jīng)誘導(dǎo)休眠貯存的,但是為了保證侵染力,誘導(dǎo)休眠期仍然不宜太長(zhǎng),這可能跟長(zhǎng)時(shí)間誘導(dǎo)休眠會(huì)導(dǎo)致線蟲共生菌的失活有關(guān)。(2)四個(gè)Cherry線蟲侵染處理的黃粉蟲幾乎在各時(shí)間點(diǎn)(...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:128 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
異小桿屬代表種嗜菌異小桿線蟲的生活史(Johnigk&Ehlers,1999)
圖2-1沖洗管制作方法。A:打開小離心管蓋子“a”,在蓋上打個(gè)孔如“b”; B:切去心管的錐形部分,做成一個(gè)柱形管如B; D,C:拿塊尼龍網(wǎng)蒙在柱形管一端,蓋上蓋子,形成“e’’; “f’用于盛放最后準(zhǔn)備進(jìn)行臨界點(diǎn)干燥的線蟲樣品。1.4分子生物學(xué)鑒定按照J(rèn)oyce[-8]描述的方法處理用于PcR擴(kuò)增的線蟲樣品:首先用70%的乙醇消毒載玻片,后把單條線蟲成蟲(或侵染期線蟲)放在含有10微升線蟲裂解液(50mM KCI,lOmM TrisPH.3, 2.5m MMgCl2. 0.45 % NP40, 0.45 Tween 20. 0.01%gelatin 和 60 ug/ml 蛋白酶 K)的PI載玻片上。用來NP40和Tween 20幫助降解線蟲蛋白質(zhì)”用刀片將線蟲切成W段后連同裂液?起轉(zhuǎn)移到放置在冰上滅菌的0.5毫升的離心管里,然后放在負(fù)80°C(或? Oe)冰箱里處10分鐘,接著65r處理1小時(shí),然后95°C處理10分鐘來滅活線蟲裂解液中的蛋白酶K,將解物在冰上冷卻后于12,000離心2分鐘,取2微升裂解物上淸來進(jìn)行PCR反應(yīng)[19]。劑:2.5mM Mgcb, Tween20, 75% 乙醇,0.5M EDTA, Tis, HAc, dNTP (北京強(qiáng)辛博生物技術(shù)有限公司),Proteinase K, Tap酶(北京強(qiáng)辛博瑞生物技術(shù)有限公司);
:位論文 第三章i:!^蟲病原線lU Helewrlwbditis beicherncma的生物7:表3-2 Cherry線蟲在50.5 RH%T?燥環(huán)境小丁?燥后的侵染力able 3-2 Infectivity of H. heicherriana after drying in 50.5 RH %對(duì)照 T燥7 h存活線蟲 T燥9 h存活線蟲蠟率 人蠟¢5死f:率 卞JJJ 人■死f:率 卞^m^^ C%3.3 0.0 100.0 0.0 100.10.0 6.7 33.3 3.3 66.76.7 73.3 4.4 50.0 34.93.3 83.3 10.7 63.3 32.100.0 90.0 10.0 66.7 33. 100.0 ^ 23.habditis heicherriana 不同溫度下的運(yùn)動(dòng)能力線蟲遷入率
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]根結(jié)線蟲侵染對(duì)黃瓜生長(zhǎng)和內(nèi)源激素含量的影響[J]. 劉慶安,夏凱,葉梅榮,張遠(yuǎn)兵. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(18)
[2]不同措施對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲的控制效果與效益[J]. 陳志杰,李英梅,張鋒,張淑蓮,王琦,楊兆森,雷虹. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2010(08)
[3]電生功能水對(duì)保護(hù)地番茄葉霉病防治效果[J]. 鄭磊,劉海杰,郝建雄,楊合斌,李里特. 植物保護(hù). 2010(01)
[4]共生菌毒素對(duì)亞洲玉米螟和玉米小斑菌殺蟲抑菌活性的測(cè)定[J]. 王歡,叢斌,董輝,劉彥群,楊吉. 玉米科學(xué). 2009(06)
[5]22種中草藥提取物殺根結(jié)線蟲活性[J]. 劉晟,張敏,顧玲,蘇康宇,宋吉青. 農(nóng)藥. 2009(08)
[6]“植物源線蟲速殺劑”防治煙草根結(jié)線蟲病的田間試驗(yàn)[J]. 劉濤,趙世民,王廷曉,陳彥春,蔣士君. 煙草科技. 2009(06)
[7]昆蟲病原線蟲共生菌對(duì)甜菜夜蛾和辣椒炭疽病菌的生物活性測(cè)定[J]. 王歡,叢斌,劉彥群,董輝,隋欣. 中國蔬菜. 2009(12)
[8]南方根結(jié)線蟲侵染黃瓜幼根組織病理學(xué)觀察[J]. 劉奇志,李娜,王麗,謝德燕. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(04)
[9]昆蟲病原線蟲資源概況和分類技術(shù)進(jìn)展[J]. 丘雪紅,韓日疇. 昆蟲學(xué)報(bào). 2007(03)
[10]蔬菜根結(jié)線蟲綜合防治研究進(jìn)展[J]. 郭永霞,金永玲. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2007(03)
本文編號(hào):3238906
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:128 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
異小桿屬代表種嗜菌異小桿線蟲的生活史(Johnigk&Ehlers,1999)
圖2-1沖洗管制作方法。A:打開小離心管蓋子“a”,在蓋上打個(gè)孔如“b”; B:切去心管的錐形部分,做成一個(gè)柱形管如B; D,C:拿塊尼龍網(wǎng)蒙在柱形管一端,蓋上蓋子,形成“e’’; “f’用于盛放最后準(zhǔn)備進(jìn)行臨界點(diǎn)干燥的線蟲樣品。1.4分子生物學(xué)鑒定按照J(rèn)oyce[-8]描述的方法處理用于PcR擴(kuò)增的線蟲樣品:首先用70%的乙醇消毒載玻片,后把單條線蟲成蟲(或侵染期線蟲)放在含有10微升線蟲裂解液(50mM KCI,lOmM TrisPH.3, 2.5m MMgCl2. 0.45 % NP40, 0.45 Tween 20. 0.01%gelatin 和 60 ug/ml 蛋白酶 K)的PI載玻片上。用來NP40和Tween 20幫助降解線蟲蛋白質(zhì)”用刀片將線蟲切成W段后連同裂液?起轉(zhuǎn)移到放置在冰上滅菌的0.5毫升的離心管里,然后放在負(fù)80°C(或? Oe)冰箱里處10分鐘,接著65r處理1小時(shí),然后95°C處理10分鐘來滅活線蟲裂解液中的蛋白酶K,將解物在冰上冷卻后于12,000離心2分鐘,取2微升裂解物上淸來進(jìn)行PCR反應(yīng)[19]。劑:2.5mM Mgcb, Tween20, 75% 乙醇,0.5M EDTA, Tis, HAc, dNTP (北京強(qiáng)辛博生物技術(shù)有限公司),Proteinase K, Tap酶(北京強(qiáng)辛博瑞生物技術(shù)有限公司);
:位論文 第三章i:!^蟲病原線lU Helewrlwbditis beicherncma的生物7:表3-2 Cherry線蟲在50.5 RH%T?燥環(huán)境小丁?燥后的侵染力able 3-2 Infectivity of H. heicherriana after drying in 50.5 RH %對(duì)照 T燥7 h存活線蟲 T燥9 h存活線蟲蠟率 人蠟¢5死f:率 卞JJJ 人■死f:率 卞^m^^ C%3.3 0.0 100.0 0.0 100.10.0 6.7 33.3 3.3 66.76.7 73.3 4.4 50.0 34.93.3 83.3 10.7 63.3 32.100.0 90.0 10.0 66.7 33. 100.0 ^ 23.habditis heicherriana 不同溫度下的運(yùn)動(dòng)能力線蟲遷入率
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]根結(jié)線蟲侵染對(duì)黃瓜生長(zhǎng)和內(nèi)源激素含量的影響[J]. 劉慶安,夏凱,葉梅榮,張遠(yuǎn)兵. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2010(18)
[2]不同措施對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲的控制效果與效益[J]. 陳志杰,李英梅,張鋒,張淑蓮,王琦,楊兆森,雷虹. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2010(08)
[3]電生功能水對(duì)保護(hù)地番茄葉霉病防治效果[J]. 鄭磊,劉海杰,郝建雄,楊合斌,李里特. 植物保護(hù). 2010(01)
[4]共生菌毒素對(duì)亞洲玉米螟和玉米小斑菌殺蟲抑菌活性的測(cè)定[J]. 王歡,叢斌,董輝,劉彥群,楊吉. 玉米科學(xué). 2009(06)
[5]22種中草藥提取物殺根結(jié)線蟲活性[J]. 劉晟,張敏,顧玲,蘇康宇,宋吉青. 農(nóng)藥. 2009(08)
[6]“植物源線蟲速殺劑”防治煙草根結(jié)線蟲病的田間試驗(yàn)[J]. 劉濤,趙世民,王廷曉,陳彥春,蔣士君. 煙草科技. 2009(06)
[7]昆蟲病原線蟲共生菌對(duì)甜菜夜蛾和辣椒炭疽病菌的生物活性測(cè)定[J]. 王歡,叢斌,劉彥群,董輝,隋欣. 中國蔬菜. 2009(12)
[8]南方根結(jié)線蟲侵染黃瓜幼根組織病理學(xué)觀察[J]. 劉奇志,李娜,王麗,謝德燕. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(04)
[9]昆蟲病原線蟲資源概況和分類技術(shù)進(jìn)展[J]. 丘雪紅,韓日疇. 昆蟲學(xué)報(bào). 2007(03)
[10]蔬菜根結(jié)線蟲綜合防治研究進(jìn)展[J]. 郭永霞,金永玲. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2007(03)
本文編號(hào):3238906
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