發(fā)布時間：2021-04-29 23:56

　　天然免疫反應(yīng)是機(jī)體抵御病原微生物入侵的第一道防線。宿主細(xì)胞通過模式識別受體識別病原微生物的核酸,誘導(dǎo)I型干擾素、炎性因子以及抗病原微生物效應(yīng)蛋白的表達(dá)。RNA病毒感染機(jī)體后,其產(chǎn)生的核酸被位于胞漿的RIG-I（retinoic acid-inducible gene I）和MDA5（melanoma differentiation-associated gene 5）識別。RIG-I和MDA5與病毒RNA結(jié)合以后,其構(gòu)象發(fā)生變化,然后被招募到天然免疫接頭分子VISA上。之后,VISA發(fā)生類朊病毒樣聚集,并通過它的TRAF結(jié)合基序來招募下游的TRAF2/3/5/6。TRAF家族蛋白進(jìn)一步招募TBK1以及I（42）（42）復(fù)合物并磷酸化IRF3以及I?B?,最終導(dǎo)致IRF3以及NF-?B的激活以及下游抗病毒應(yīng)答的產(chǎn)生。R（45）（32）病毒入侵機(jī)體后,機(jī)體內(nèi)的RIG-I樣受體是誘導(dǎo)天然免疫反應(yīng)的關(guān)鍵蛋白,但是作為RLRs成員的RIG-I和MDA5是如何識別病毒核酸需要進(jìn)一步研究。本研究中,我們發(fā)現(xiàn)過表達(dá)人源G3BP1（Ras GTPase-activating protein-SH3 do... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 天然免疫概況
        1.1.1 天然免疫基本介紹
        1.1.2 抗病毒天然免疫及模式識別受體
    1.2 抗病毒天然免疫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及其調(diào)節(jié)機(jī)制
        1.2.1 TLRs介導(dǎo)的天然免疫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.2.2 RLRs介導(dǎo)的天然免疫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
    1.3 RNA結(jié)合蛋白家族在抗病毒天然免疫中的作用
        1.3.1 RNA結(jié)合蛋白家族種類與結(jié)構(gòu)
        1.3.2 RNA結(jié)合蛋白調(diào)節(jié)天然免疫的抗病毒機(jī)制
    1.4 口蹄疫及口蹄疫病毒
        1.4.1 口蹄疫
        1.4.2 口蹄疫病毒
        1.4.3 口蹄疫病毒的結(jié)構(gòu)與功能
    1.5 FMDV蛋白研究進(jìn)展
        1.5.1 FMDV蛋白與宿主互作研究進(jìn)展
        1.5.2 FMDV蛋白調(diào)節(jié)天然免疫研究進(jìn)展
    1.6 本研究的目的和意義
第二章 G3BP1 正調(diào)控RIG-I信號通路的機(jī)制研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 載體、細(xì)胞、病毒以及生化試劑
        2.1.2 儀器設(shè)備
        2.1.3 試劑配制
        2.1.4 質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.1.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.1.6 免疫共沉淀和免疫印跡
        2.1.7 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn)
        2.1.8 VSV空斑實(shí)驗(yàn)
        2.1.9 激光共聚焦顯微鏡實(shí)驗(yàn)
        2.1.10 實(shí)時熒光定量PCR
        2.1.11 過表達(dá),RNAi,敲除細(xì)胞系構(gòu)建
        2.1.12 體外pull down實(shí)驗(yàn)
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 過表達(dá)G3BP1在RNA病毒誘導(dǎo)的I型干擾素信號通路中的作用
        2.2.2 沉默和敲除G3BP1對RNA病毒的調(diào)節(jié)作用
        2.2.3 G3BP1增強(qiáng)細(xì)胞的抗病毒應(yīng)答
        2.2.4 G3BP1在VISA上游水平調(diào)節(jié)天然免疫信號通路
        2.2.5 G3BP1與RIG-I有相互作用
        2.2.6 G3BP1拮抗RNF125介導(dǎo)RIG-I的降解并促進(jìn)RIG-I結(jié)合5′ppp-dsRNA
        2.2.7 G3BP1 增加RNF125 自身泛素化
    2.3 討論
第三章 口蹄疫病毒3A抑制G3BP1 介導(dǎo)的RIG-I信號通路機(jī)制研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 載體、細(xì)胞、病毒以及生化試劑
        3.1.2 儀器設(shè)備
        3.1.3 試劑配制
        3.1.4 質(zhì)粒的構(gòu)建
        3.1.5 病毒感染及病毒滴度測定
        3.1.6 病毒拷貝數(shù)測定
        3.1.7 實(shí)時熒光定量PCR
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 G3BP1 以及它的突變體對FMDV的影響
        3.2.2 豬源G3BP1 促進(jìn)RLH介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
        3.2.3 FMDV3A與 G3BP1 相互作用
        3.2.4 FMDV3A增強(qiáng)FMDV復(fù)制和增殖
        3.2.5 FMDV3A抑制G3BP1 介導(dǎo)的RLH抗病毒信號
        3.2.6 口蹄疫病毒3A通過自噬途徑降解G3BP1
        3.2.7 口蹄疫病毒3A通過上調(diào)LRRC25的表達(dá)來降解G3BP1
        3.2.8 LRRC25 增加FMDV復(fù)制和增殖
        3.2.9 多種小RNA病毒的3A蛋白通過LRRC25 蛋白降解G3BP1
    3.3 討論
第四章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3168429