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骨保護(hù)素通過(guò)Fas/FasL死亡受體通路誘導(dǎo)破骨細(xì)胞及其前體細(xì)胞發(fā)生凋亡的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-24 17:21
  骨保護(hù)素(osteoprotegerin, OPG)發(fā)現(xiàn)于上世紀(jì)九十年代,它作為腫瘤壞死因子受體(TNF)超家族成員之一,能通過(guò)阻斷核因子κB受體活化因子配體(RANKL)和RANK結(jié)合來(lái)完成誘騙受體功能,從而抑制破骨細(xì)胞(OCs)的分化和活性。本課題組最新研究發(fā)現(xiàn)OPG可誘導(dǎo)體外成熟破骨細(xì)胞發(fā)生凋亡,這種凋亡可能是OPG抑制成熟破骨細(xì)胞活性的主要途徑,然而OPG在OCs存活以及凋亡中的確切作用仍不清楚。隨著我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)集約化和規(guī)�;l(fā)展,動(dòng)物骨營(yíng)養(yǎng)不良性疾病的發(fā)生越來(lái)越多,目前仍缺乏高效的防控藥物。本文以原代分離小鼠骨髓誘導(dǎo)分化為OCs及破骨細(xì)胞前體細(xì)胞(OPCs)為研究對(duì)象,OCs分化成熟后添加不同濃度OPG,通過(guò)TACS-XL Blue法(TUNEL凋亡檢測(cè)衍生法)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR (QRT-PCR)、蛋白免疫印跡(Western blot)免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation, Co-IP)等技術(shù)手段,揭示OPG對(duì)OCs和OPCs凋亡中形態(tài)、功能、相關(guān)基因及關(guān)鍵信號(hào)蛋白的影響,以期闡明OPG誘導(dǎo)OCs和OPCs凋亡的分子機(jī)制,為相關(guān)藥物的研發(fā)提供理論依據(jù)和... 

【文章來(lái)源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:108 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

骨保護(hù)素通過(guò)Fas/FasL死亡受體通路誘導(dǎo)破骨細(xì)胞及其前體細(xì)胞發(fā)生凋亡的研究


圖2-1-1.?Annexin?V-FITC蒙光染色法檢測(cè)OPG對(duì)破骨細(xì)胞前體細(xì)胞調(diào)亡率的影響??

流式,差異顯著,對(duì)照組,濃度


圖2-1-2.?Annexin?V-PI流式法檢測(cè)OPG對(duì)OPCs澗t率的影響??"a"和"M"分別表示與對(duì)照組相比差異顯著(尸<0.0_5)和極適著(尸<0.0/)??Fig.?2-1-2.?Detection?of?apoptosis?in?OPCs?using?Annexin?V?-FITC?fluorescent?stainin"a"?p?<?0.05,?"b?e"片<?0.0/,?compared?with?control?gro叩,using?one-way?ANOVA??對(duì)OCs潤(rùn)t:的影響??濃度(0、20、40、80ng/mL)?OPG作用OCs24h后,TACS-XL臥ue試

破骨細(xì)胞,光檢測(cè),表面,培養(yǎng)基


:OPG通過(guò)Fas/FasL死亡受體通路誘導(dǎo)破骨細(xì)胞及其前體細(xì)胞發(fā)生調(diào)亡的研s表面的殘留情況。結(jié)果表明,無(wú)論是否添加RNAKL,棄去培養(yǎng)基面均未見(jiàn)RANKL殘留(如圖2-2-1?)。另外,前期RANKL的添加的殘留。因此,去除培養(yǎng)基中的RANKL后,OPG處理OCs不會(huì)受滿足了后期實(shí)驗(yàn)研究OPG處理對(duì)OCs調(diào)亡直接影響的要求。??RANKL?DAPI??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Fas/FasL介導(dǎo)的免疫調(diào)節(jié)在結(jié)腸炎治療中的作用[J]. 于洋,邵秉一,帥逸,尚馮青,王茜,周志斐,廖立,金巖,楊德琴.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2013(10)
[2]細(xì)胞凋亡和繼發(fā)性壞死的Annexin法定量檢測(cè)[J]. 彭黎明,江虹,ChrisBradley.  華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(04)



本文編號(hào):3098089

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