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酵母發(fā)酵棉粕對肉雞脂類代謝的影響及其代謝組學研究

發(fā)布時間:2020-10-01 21:19
   目的:本論文旨在研究酵母發(fā)酵棉粕對肉雞脂類代謝的影響,并從小分子代謝水平揭示其代謝調(diào)控機理。方法:論文分發(fā)酵飼料對肉雞脂類代謝的影響和代謝組學研究兩部分進行。第一部分:以生產(chǎn)性能、消化代謝率和屠宰性能為基礎,從組織、細胞、分子水平研究酵母發(fā)酵棉粕對肉雞脂類代謝的影響。試驗選用300只1日齡黃羽肉雞飼喂商品日糧14天,然后飼喂試驗對照組日糧預飼7天,以適應試驗用粉末狀飼料。預飼結(jié)束后,按照體重相近和公母各半的原則從中選取180只雞,隨機分為三組,即空白對照組(Ⅰ組)、單酵母發(fā)酵組(Ⅱ組)和復合酵母發(fā)酵組(Ⅲ組),每組6個重復,每個重復10只雞。其中試驗Ⅱ組和Ⅲ組分別添加6%的熱帶假絲酵母發(fā)酵棉粕和熱帶假絲酵母與釀酒酵母復合發(fā)酵棉粕,對照組添加6%的與發(fā)酵飼料相同處理的未發(fā)酵棉粕底物。試驗共分生長前期(21-42日齡)和生長后期(43-64日齡)兩個階段進行,在各階段飼養(yǎng)結(jié)束后采集血清、肝臟和腹部脂肪進行相關研究。第二部分:在各階段飼養(yǎng)結(jié)束后每組按照體重相近的原則隨機取6只雞,分別采集血清、肝臟和盲腸內(nèi)容物,進行基于氣相色譜-飛行時間質(zhì)譜(GC-TOF-MS)的代謝組學分析,所得數(shù)據(jù)通過主成分分析(PCA)和偏最小二乘判別分析(PLS-DA)進行聚類分析,采用正交偏最小方差判別分析(OPLS-DA)所得重要性投影值(VIP)結(jié)合Student’s T值(P0.05,VIP1)尋找兩組間的差異代謝物。篩選所得差異代謝物采用LECO/Fiehn數(shù)據(jù)庫、NIST、Wiley library和KEGG等數(shù)據(jù)庫進行鑒定和相關代謝過程分析。結(jié)果:第一部分:(1)酵母發(fā)酵棉粕可顯著增加43-64日齡肉雞的平均日增重(P0.05);顯著降低肉雞整個生長階段的料重比(P0.05);顯著增加肉雞對日糧干物質(zhì)(DM)、粗蛋白(CP)和粗灰分(Ash)的表觀代謝率,且試驗組間差異顯著(P0.05)。(2)添加酵母發(fā)酵棉粕,42日齡肉雞腹脂率顯著降低(P0.05),42日齡胸肌和64日齡腿肌中亞油酸含量顯著提高(P0.05),42日齡和64日齡腿肌粗蛋白和粗脂肪分別顯著降低和提高(P0.05),對42日齡腿肌脂肪酸組成無顯著影響(P0.05);復合酵母發(fā)酵棉粕顯著降低42日齡胸肌油酸含量和64日齡腿肌率,顯著提高42日齡和64日齡肉雞胸肌粗脂肪含量(P0.05);單酵母發(fā)酵棉粕顯著降低64日齡胸肌硬脂酸、亞油酸及腿肌油酸含量,顯著提高64日齡胸肌油酸含量和不飽和脂肪酸/飽和脂肪酸的比值及42日齡和64日齡肉雞胸肌粗蛋白(P0.05)。(3)酵母發(fā)酵棉粕顯著降低肉雞血清中甘油三酯(TG)含量(P0.05);較對照組而言,試驗組血清中總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)在42日齡和64日齡分別顯著降低和增加(P0.05);試驗組42日齡肉雞血清中乙酰輔酶A羧化酶(ACC)、脂蛋白酯酶(LPL)和激素敏感酯酶(HSL)的酶活性較對照組顯著增加(P0.05)。(4)酵母發(fā)酵棉粕顯著下調(diào)了42日齡肝臟ACC和脂肪酸合成酶(FAS)及腹部脂肪LPL的表達(P0.05),顯著上調(diào)了64日齡肝臟過氧化物酶體增值物激活受體-α(PPAR-α)和LPL的表達(P0.05)。第二部分:(1)酵母發(fā)酵棉粕可以引起肉雞血清中小分子代謝物發(fā)生顯著的變化,其中單酵母組在42日齡和64日齡分別有21種和25種物質(zhì)發(fā)生顯著變化,復合酵母組在42日齡和64日齡分別有22種和20種物質(zhì)發(fā)生顯著變化。這些變化涉及碳水化合物、氨基酸、脂類、維生素、核苷酸和微生物等多代謝過程。碳水化合物代謝變化主要表現(xiàn)為果糖和甘露糖代謝、半乳糖代謝、糖酵解、三羧酸循環(huán)等代謝途徑改變,氨基酸代謝主要表現(xiàn)為甘氨酸、酪氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸等的代謝變化;脂類代謝變化主要表現(xiàn)為生長前期(21-42日齡)棕櫚油酸含量增加,生長后期(43-64日齡)D-赤式鞘氨醇和花生四烯酸的含量以及生長全期(21-64日齡)硬脂酸含量的降低,且試驗組間二羥基丙酮、甘油酸和甘油1-磷酸、肌醇、乙醇胺、鄰磷酰乙醇胺的含量差異顯著(P0.05)。(2)酵母發(fā)酵棉粕引起了肉雞肝臟中小分子代謝物發(fā)生顯著變化,其中單酵母組在42日齡和64日齡分別有9種和11種物質(zhì)發(fā)生顯著變化,復合酵母組在42日齡和64日齡分別有9種和12種物質(zhì)發(fā)生顯著變化。這種變化涉及果糖和甘露糖代謝、半乳糖代謝、淀粉和蔗糖代謝、三羧酸循環(huán)等碳水化合物代謝途徑,絲氨酸、色氨酸、鳥氨酸、肌酸等氨基酸以及脂類代謝。脂類代謝物具體表現(xiàn)在生長前期(21-42日齡)2-單酰甘油酯和肌醇含量降低,生長前期1-單軟脂酸甘油酯和乙醇胺含量增加,而試驗組間花生四烯酸、前列腺素和β-甘油磷酸酯的變化差異顯著(P0.05)。(3)盲腸內(nèi)容物代謝組學分析表明,酵母發(fā)酵棉粕主要引起了肉雞盲腸氨基酸和2-酮羧酸代謝物(2-酮丁酸、2-酮己二酸、異亮氨酸、檸康酸)的改變,且檸康酸、異亮氨酸、硫辛酸和N-甲基-L谷氨酸的變化表明因發(fā)酵所用菌種的不同而有所差異。結(jié)論:酵母發(fā)酵棉粕對肉雞脂類代謝具有一定的調(diào)控作用,尤其是可降低生長前期(21-42日齡)的腹脂含量和生長全期(21-64日齡)血清TG濃度及提高生長后期腿肌EE含量。采食發(fā)酵飼料的肉雞在生長前期主要通過下調(diào)肝臟ACC和FAS的表達來減少肝臟脂肪合成,后期則通過上調(diào)肝臟PPAR-α和LPL的表達促進脂肪酸氧化代謝和TG分解利用。血清、肝臟和盲腸內(nèi)容物小分子代謝分析表明,酵母發(fā)酵棉粕可以引起果糖和甘露糖代謝、半乳糖代謝、糖酵解、三羧酸循環(huán)等碳水化合物代謝途徑,脂肪酸、甘油脂和甘油磷脂等脂類代謝以及絲氨酸、酪氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸等氨基酸代謝過程的改變,同時也增強了腸道微生物代謝,主要表現(xiàn)為增加了能量、氨基酸代謝和脂質(zhì)利用,這揭示了發(fā)酵飼料對肉雞脂類代謝的調(diào)控是一個涉及多個生化代謝途徑的復雜過程,且這種調(diào)控作用因發(fā)酵所用菌種的不同有所差異。
【學位單位】:石河子大學
【學位級別】:博士
【學位年份】:2015
【中圖分類】:S831.5
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要縮略詞
圖表索引
前言
    1 研究目的和意義
    2 論文理論依據(jù)
    3 論文總體研究思路
第一章 文獻綜述
    1 益生菌固態(tài)發(fā)酵棉粕的研究進展
        1.1 棉粕脫毒及營養(yǎng)價值評定
        1.2 發(fā)酵棉粕在畜禽生產(chǎn)中的應用
    2 肉雞脂類代謝及其營養(yǎng)調(diào)控
        2.1 肉雞脂類代謝
        2.2 營養(yǎng)素對肉雞脂類代謝的調(diào)控
    3 代謝組學在動物營養(yǎng)及其飼料中的研究進展
        3.1 代謝組學在營養(yǎng)學中的應用概述
        3.2 代謝組學在豬營養(yǎng)研究中的應用
        3.3 代謝組學在雞營養(yǎng)研究中的應用
        3.4 代謝組學在奶牛營養(yǎng)研究中的應用
        3.5 代謝組學在飼料開發(fā)中的應用
第二章 試驗研究
    第一部分 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞脂類代謝的影響
        試驗一 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞生產(chǎn)性能及消化代謝的影響
            1 材料與方法
                1.1 試驗材料
                1.2 酵母發(fā)酵棉粕飼料制備
                1.3 試驗方法
                1.4 數(shù)據(jù)分析
            2 結(jié)果與分析
                2.1 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞生產(chǎn)性能的影響
                2.2 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞表觀消化率的影響
            3 討論
            4 小結(jié)
        試驗二 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞屠宰性能及胴體營養(yǎng)成分的影響
            1 材料與方法
                1.1 試驗材料
                1.2 酵母發(fā)酵棉粕制備
                1.3 試驗方法
                1.4 數(shù)據(jù)分析
            2 結(jié)果與分析
                2.1 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞屠宰性能的影響
                2.2 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞胸肌常規(guī)營養(yǎng)成分的影響
                2.3 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞腿肌常規(guī)營養(yǎng)成分的影響
                2.4 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞胸肌主要脂肪酸組成的影響
                2.5 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞胸肌主要脂肪酸組成的影響
            3 討論
                3.1 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞肌肉屠宰性能和常規(guī)養(yǎng)分的影響
                3.2 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞肌肉主要脂肪酸組成的影響
            4 小結(jié)
        試驗三 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞脂類代謝物及酶活性、激素水平的影響
            1 材料與方法
                1.1 試驗材料
                1.2 酵母發(fā)酵棉粕的制備
                1.3 試驗方法
                1.4 數(shù)據(jù)分析
            2 結(jié)果與分析
                2.1 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞血清脂類代謝物的影響
                2.2 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞血清脂類代謝相關酶活和激素含量的影響
                2.3 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞肝臟脂類代謝相關酶活和激素含量的影響
                2.4 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞脂肪組織中脂類代謝相關酶活和激素含量的影響 .. 29
            3 討論
                3.1 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞血清脂類代謝物的影響
                3.2 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞酶活和激素水平的影響
            4 小結(jié)
        試驗四 酵母發(fā)酵棉粕對肉雞脂類代謝基因表達的影響
            1 材料與方法
                1.1 試驗材料與試劑
                1.2 酵母發(fā)酵棉粕制備
                1.3 試驗方法
                1.4 數(shù)據(jù)分析
            2 結(jié)果與分析
            3 討論
            4 小結(jié)
    第二部分 基于酵母發(fā)酵棉粕飼料的肉雞代謝組學研究
        試驗五 采食酵母發(fā)酵棉粕后肉雞血清代謝組學研究
            1 材料與方法
                1.1 試驗材料與試劑
                1.2 酵母發(fā)酵棉粕制備
                1.3 試驗方法
                1.4 數(shù)據(jù)分析
            2 結(jié)果與分析
                2.1 采食發(fā)酵棉粕飼料后肉雞血清GC-MS分析
                2.2 不同酵母發(fā)酵棉粕對肉雞血清代謝組分的聚類分析
                2.3 ZD-3 酵母發(fā)酵棉粕對42日齡肉雞血清小分子差異代謝物的影響
                2.4 復合酵母發(fā)酵棉粕對42日齡肉雞血清小分子差異代謝物的影響
                2.5 ZD-3 酵母發(fā)酵棉粕對64日齡肉雞血清小分子差異代謝物的影響
                2.6 復合酵母發(fā)酵棉粕對64日齡肉雞血清小分子差異代謝物的影響
            3 討論
                3.1 酵母發(fā)酵棉粕飼料與碳水化合物代謝
                3.2 酵母發(fā)酵棉粕飼料與含氮小分子代謝
                3.3 酵母發(fā)酵棉粕飼料與脂類代謝
                3.4 酵母發(fā)酵棉粕飼料與維生素代謝
                3.5 酵母發(fā)酵棉粕飼料與微生物代謝
            4 小結(jié)
        試驗六 采食酵母發(fā)酵棉粕后肉雞肝臟代謝組學研究
            1 材料與方法
                1.1 試驗材料與試劑
                1.2 酵母發(fā)酵棉粕制備
                1.3 試驗方法
                1.4 數(shù)據(jù)分析
            2 結(jié)果與分析
                2.1 采食發(fā)酵棉粕飼料肉雞肝臟GC-MS分析
                2.2 不同酵母發(fā)酵棉粕對肉雞肝臟代謝組分的聚類分析
                2.3 ZD-3 酵母發(fā)酵棉粕對42日齡肉雞肝臟小分子差異代謝物的影響
                2.4 復合酵母發(fā)酵棉粕對42日齡肉雞肝臟小分子差異代謝物的影響
                2.5 ZD-3 酵母發(fā)酵棉粕對64日齡肉雞肝臟小分子差異代謝物的影響
                2.6 復合酵母發(fā)酵棉粕對64日齡肉雞肝臟小分子差異代謝物的影響
            3 討論
                3.1 酵母發(fā)酵棉粕與肝臟碳水化合物代謝
                3.2 酵母發(fā)酵棉粕與肝臟脂類代謝
                3.3 酵母發(fā)酵棉粕與肝臟含氮小分子代謝
            4 小結(jié)
        試驗七 采食酵母發(fā)酵棉粕后肉雞盲腸內(nèi)容物代謝組學研究
            1 材料與方法
                1.1 試驗材料與試劑
                1.2 酵母發(fā)酵棉粕制備
                1.3 試驗方法
                1.4 數(shù)據(jù)分析
            2 結(jié)果與分析
                2.1 采食發(fā)酵棉粕飼料肉雞盲腸內(nèi)容物GC-MS分析
                2.2 不同酵母發(fā)酵棉粕對肉雞盲腸內(nèi)容物代謝組分的聚類分析
                2.3 ZD-3 酵母發(fā)酵棉粕對42日齡肉雞盲腸內(nèi)容物小分子差異代謝物的影響 73
                2.4 復合酵母發(fā)酵棉粕對42日齡肉雞盲腸內(nèi)容物小分子差異代謝物的影響 . 74
                2.5 ZD-3 酵母發(fā)酵棉粕對64日齡肉雞盲腸內(nèi)容物小分子差異代謝物的影響 74
                2.6 復合酵母發(fā)酵棉粕對64日齡肉雞盲腸內(nèi)容物小分子差異代謝物的影響 . 75
            3 討論
            4 小結(jié)
第三章 全文結(jié)論與建議
    1 全文結(jié)論
    2 創(chuàng)新點
    3 有待進一步研究的問題
參考文獻
致謝
作者簡介
博士研究生期間發(fā)表文章情況
導師評閱表

【參考文獻】

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本文編號:2832020

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