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櫻桃果肉中抗氧化和免疫調(diào)節(jié)活性物質(zhì)的分離與結(jié)構(gòu)鑒定

發(fā)布時間:2017-03-31 12:06

  本文關(guān)鍵詞:櫻桃果肉中抗氧化和免疫調(diào)節(jié)活性物質(zhì)的分離與結(jié)構(gòu)鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:我國櫻桃栽培歷史悠久,種質(zhì)資源豐富,目前果樹產(chǎn)業(yè)栽培的有甜櫻桃(Prunus avium)、酸櫻桃(Prunus cerasus)、中國櫻桃(Prunus pseudocerasus)和毛櫻桃(Prunus tomentosa)。本論文對四種櫻桃的果實品質(zhì)、物質(zhì)組成、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)活性進(jìn)行了評估,主要結(jié)果如下:1.在本研究所用的4種櫻桃共8個品種中,果實品質(zhì)和物質(zhì)組成具有顯著的種間差異。結(jié)合HPLC和質(zhì)譜方法,共鑒定出25種酚類物質(zhì),包括5種羥基桂皮酸類物質(zhì)、2種黃烷-3-醇、7種花色苷和11種黃酮醇;2個甜櫻桃和2個酸櫻桃品種酚類物質(zhì)以花色苷(主要是矢車菊素糖苷)為主;中國櫻桃的黃酮醇種類豐富;毛櫻桃以黃酮醇(主要是槲皮素鼠李糖苷和山奈酚鼠李糖苷)為主;2.對櫻桃果肉進(jìn)行系統(tǒng)分離,并評估了4種櫻桃果肉中酚類提取物、脂溶性提取物和水溶性多糖的抗氧化和免疫調(diào)節(jié)活性,結(jié)果表明:酚類物質(zhì)是櫻桃中最主要的抗氧化成分;櫻桃水溶性多糖能誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7的活化,其活性由高到低依次為‘黑珍珠’‘黑皮’‘紅毛櫻桃’‘奧德’;3.將甜櫻桃‘黑珍珠’的酚類物質(zhì)進(jìn)一步分離,得到富含花色苷、羥基桂皮酸和黃酮醇的組分,分別對3種組分及其主要單體化合物進(jìn)行活性評估,結(jié)果表明:矢車菊素蕓香糖苷對抗氧化活性的貢獻(xiàn)率最大;富含羥基桂皮酸的組分能抑制多糖誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞NO釋放;單體化合物中,矢車菊素葡萄糖苷、綠原酸和山奈酚蕓香糖苷能不同程度地抑制甜櫻桃多糖誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞活化,其中山奈酚蕓香糖苷活性最高;4.將甜櫻桃‘黑珍珠’的水溶性多糖進(jìn)一步分離純化,得到2種分子量均一的多糖PAPS-1和PAPS-2,根據(jù)單糖組分分析、紅外光譜掃描、甲酯化度和乙酰化度分析、高碘酸氧化-Smith降解、1H-NMR和13C-NMR等結(jié)果推斷,PAPS-1和PAPS-2均為I型鼠李半乳糖醛酸聚糖(RG-I)果膠,富含阿拉伯半乳聚糖(AG)支鏈,主鏈被不同程度甲酯化和乙酰化,其中,PAPS-2的糖醛酸含量高于PAPS-1。兩個多糖組分均顯著誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞的活化,TNFα、IL6、IL10、GCSF、iNOS、 COX-2等基因的表達(dá)以及TNFα、IL6、IL10等細(xì)胞因子的釋放。本研究結(jié)果可以為我國櫻桃的科學(xué)消費和綜合開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:櫻桃 果實品質(zhì) 酚類物質(zhì) 多糖 抗氧化 免疫調(diào)節(jié)活性
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S662.5
【目錄】:
  • 致謝6-8
  • 摘要8-9
  • Abstract9-11
  • 縮略語表11-17
  • 1 緒論17-34
  • 1.1 櫻桃的分類地位及其目前的栽培分布情況17-18
  • 1.1.1 櫻桃的分類地位和全球的栽培分布17
  • 1.1.2 我國櫻桃栽培分布17-18
  • 1.2 櫻桃的理化性質(zhì)研究進(jìn)展18-28
  • 1.2.1 外觀和風(fēng)味品質(zhì)19-20
  • 1.2.2 果肉酚類物質(zhì)20-26
  • 1.2.3 類胡蘿卜素26
  • 1.2.4 其他活性成分26-28
  • 1.3 櫻桃生物活性研究進(jìn)展28-33
  • 1.3.1 抗氧化活性29-30
  • 1.3.2 抗腫瘤活性30-31
  • 1.3.3 降血糖活性31
  • 1.3.4 抗炎以及相關(guān)活性31-33
  • 1.3.5 其他活性33
  • 1.4 研究目的意義與內(nèi)容33-34
  • 2 櫻桃果實理化特性分析34-52
  • 2.1 材料與方法34-39
  • 2.1.1 果實材料34-35
  • 2.1.2 試劑35
  • 2.1.3 質(zhì)指標(biāo)測定35-36
  • 2.1.4 總酚和總花色苷含量測定36-37
  • 2.1.5 抗氧化活性測定37
  • 2.1.6 酚類組分的制備與HPLC-ESI-MS/MS檢測37-38
  • 2.1.7 酚類組分的HPLC定量分析38
  • 2.1.8 縮合單寧測定38-39
  • 2.1.9 統(tǒng)計學(xué)分析39
  • 2.2 結(jié)果39-49
  • 2.2.1 果實品質(zhì)指標(biāo)39-41
  • 2.2.2 總酚含量和總抗氧化活性41-43
  • 2.2.3 酚類物質(zhì)組分的鑒定和含量測定43-49
  • 2.3 討論49-52
  • 2.3.1 果實品質(zhì)分析49-50
  • 2.3.2 酚類物質(zhì)組成50-52
  • 3 櫻桃提取物的系統(tǒng)分離及其抗氧化和免疫調(diào)節(jié)活性分析52-64
  • 3.1 材料和方法52-56
  • 3.1.1 果實材料52
  • 3.1.2 試劑52
  • 3.1.3 櫻桃果肉提取物的系統(tǒng)分離52-54
  • 3.1.4 總糖、總酚、蛋白含量測定54
  • 3.1.5 抗氧化活性測定54-55
  • 3.1.6 免疫調(diào)節(jié)活性測定55-56
  • 3.1.7 統(tǒng)計學(xué)分析56
  • 3.2 結(jié)果56-61
  • 3.2.1 櫻桃果肉提取物的系統(tǒng)分離56-58
  • 3.2.2 不同提取組分的抗氧化活性58-60
  • 3.2.3 不同提取組分的免疫調(diào)節(jié)活性60-61
  • 3.3 討論61-64
  • 3.3.1 不同提取組分的抗氧化活性61-62
  • 3.3.2 不同提取組分的免疫調(diào)節(jié)活性62-64
  • 4 甜櫻桃酚類物質(zhì)的分離與抗氧化、免疫調(diào)節(jié)活性分析64-74
  • 4.1 材料與方法64-65
  • 4.1.1 材料64
  • 4.1.2 試劑64
  • 4.1.3 酚類提取物的分離64-65
  • 4.1.4 酚類組分含量測定65
  • 4.1.5 抗氧化活性測定65
  • 4.1.6 免疫調(diào)節(jié)活性測定65
  • 4.1.7 統(tǒng)計學(xué)分析65
  • 4.2 結(jié)果65-71
  • 4.2.1 酚類物質(zhì)的分離65-67
  • 4.2.2 不同酚類組分的抗氧化能力67-70
  • 4.2.3 同酚類組分的免疫調(diào)節(jié)活性70-71
  • 4.3 討論71-74
  • 4.3.1 酚類物質(zhì)的分離71-72
  • 4.3.2 不同酚類組分的抗氧化活性72
  • 4.3.3 同酚類組分的免疫調(diào)節(jié)活性72-74
  • 5 甜櫻桃多糖的純化、結(jié)構(gòu)與免疫調(diào)節(jié)活性分析74-93
  • 5.1 材料與方法74-79
  • 5.1.1 材料74
  • 5.1.2 試劑74
  • 5.1.3 離子交換層析分級74-75
  • 5.1.4 分子篩層析分級75
  • 5.1.5 總糖、總酚、蛋白含量測定75
  • 5.1.6 紫外-可見光譜掃描75
  • 5.1.7 紅外光譜(R)分析75
  • 5.1.8 分子量測定75
  • 5.1.9 單糖組成分析75-76
  • 5.1.10 甲酯化和乙酰化程度分析76-77
  • 5.1.11 高碘酸氧化-Smith降解77-78
  • 5.1.12 核磁共振分析(NMR)78
  • 5.1.13 不同多糖組分對RAW264.7細(xì)胞NO的誘導(dǎo)作用78
  • 5.1.14 不同多糖組分對RAW264.7細(xì)胞基因表達(dá)的作用78-79
  • 5.1.15 不同多糖組分對RAW264.7細(xì)胞因子釋放的作用79
  • 5.1.16 統(tǒng)計學(xué)分析79
  • 5.2 結(jié)果79-91
  • 5.2.1 水溶性多糖的層析分級79-81
  • 5.2.2 PAPS-1和PAPS-2的結(jié)構(gòu)特征比較分析81-91
  • 5.3 討論91-93
  • 5.3.1 PAPS-1和PAPS-2的結(jié)構(gòu)特征91-92
  • 5.3.2 PAPS-1和PAPS-2的免疫調(diào)節(jié)活性92-93
  • 6 總結(jié)與展望93-95
  • 6.1 總結(jié)93-94
  • 6.2 展望94-95
  • 參考文獻(xiàn)95-112
  • 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果112

  本文關(guān)鍵詞:櫻桃果肉中抗氧化和免疫調(diào)節(jié)活性物質(zhì)的分離與結(jié)構(gòu)鑒定,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:279568

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