【摘要】：農(nóng)業(yè)是人類社會(huì)賴以生存的基本生活資料的來源,是國民經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要基礎(chǔ)。在農(nóng)藥的保駕護(hù)航下,我國農(nóng)業(yè)已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了“十二年增”。獲得可喜成績的同時(shí),農(nóng)藥帶來的環(huán)境污染問題也日益凸顯,給人類健康造成了諸多方面的威脅。植物次級(jí)代謝產(chǎn)物是其在適應(yīng)環(huán)境、對(duì)抗自然界病蟲害侵?jǐn)_的過程中,逐漸發(fā)展、形成的,具有資源豐富、可再生和與環(huán)境相容性好等優(yōu)點(diǎn),是篩選綠色農(nóng)藥的重要資源。本文以紫莖澤蘭中倍半萜類化合物為研究對(duì)象,研究其在控制植物病原菌方面的活性及作用機(jī)理,并初步探討了倍半萜化合物在紫莖澤蘭植株中的分布積累動(dòng)態(tài)及其水解規(guī)律。獲得的主要結(jié)論如下:1、通過甲醇浸提、乙酸乙酯萃取、硅膠柱層析,獲得紫莖澤蘭葉油。氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)對(duì)葉油成分進(jìn)行分離和鑒定,以色譜峰面積歸一化法計(jì)算了各成分的相對(duì)含量。從紫莖澤蘭葉油中共鑒定了12個(gè)化合物,占葉油總含量的99.15%。主要物質(zhì)有9-羰基-10Hβ澤蘭酮(37.03%)、9-羰基-10Hα澤蘭酮(37.73%)、9-羰基-10,11-去氫澤蘭酮(23.41%),這3種化合物占葉油總量的98.17%。2、用含毒介質(zhì)培養(yǎng)法研究紫莖澤蘭葉油體外抗菌活性。紫莖澤蘭葉油對(duì)群結(jié)腐霉(Pythium myriotylum)和辣椒疫霉(Phytophthora capsici)的抑制活性較高,測得的最小抑菌濃度分別為0.1mg/mL和0.5mg/mL;對(duì)細(xì)極鏈格孢(Alternaria tenuissima)、腐皮鐮刀(Fusarium solani)和麥根腐平臍蠕孢(Bipolaris sorokiniana)抑制活性一般。通過光學(xué)顯微鏡觀察了紫莖澤蘭葉油對(duì)P.myriotylum菌絲形態(tài)的影響,P.myriotylum在葉油的影響下菌絲直徑變粗、細(xì)胞壁破裂、細(xì)胞質(zhì)分布不均勻、細(xì)胞質(zhì)凝結(jié)且變少。人工接種P.myriotylum實(shí)驗(yàn)表明,紫莖澤蘭葉油在0.2mg/m L時(shí)可有效防止P.myriotylum侵染生姜。3、以P.myriotylum和P.capsici為防治對(duì)象,紫莖澤蘭葉油分別與精甲霜靈、代森錳鋅、異菌脲混用表現(xiàn)出良好的增效作用。4、以P.myriotylum為研究對(duì)象,測定了紫莖澤蘭葉油對(duì)菌體中可溶性蛋白、可溶性糖及丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和蘋果酸脫氫酶(MDH)活性的影響。以P.capsici和P.myriotylum為研究對(duì)象,采用透射電鏡觀察了紫莖澤蘭葉油對(duì)卵菌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響,采用電導(dǎo)率法測定了葉油對(duì)P.capsici細(xì)胞膜通透性的影響。結(jié)論如下:紫莖澤蘭葉油抑制了P.myriotylum細(xì)胞中SOD、CAT、POD和SDH等四種酶的活性,增加了MDH的活性,表明紫莖澤蘭葉油降低了P.myriotylum細(xì)胞清除活性氧自由基的能力,影響了三羧酸循環(huán)(TCA)。紫莖澤蘭葉油導(dǎo)致P.myriotylum細(xì)胞內(nèi)MDA含量增加,說明菌體細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化增加。0.06mg/mL和0.08mg/mL紫莖澤蘭葉油減少了P.myriotylum菌體可溶性糖的含量,可溶性蛋白含量的動(dòng)態(tài)變化趨勢則呈現(xiàn)為先增加后減少,說明紫莖澤蘭葉油影響了P.myriotylum細(xì)胞內(nèi)生物合成。紫莖澤蘭葉油導(dǎo)致P.capsici和P.myriotylum細(xì)胞出現(xiàn)典型的凋亡癥狀,如細(xì)胞破裂、細(xì)胞器解體、細(xì)胞內(nèi)含物減少、細(xì)胞空腔化。葉油改變了P.capsici細(xì)胞膜的通透性,導(dǎo)致菌液中電導(dǎo)率值變大。5、從紫莖澤蘭葉片中分離得到了兩種杜松烷型倍半萜,分別為9-羰基-10Hβ澤蘭酮和9-羰基-10,11去氫澤蘭酮,它們均能較好的抑制細(xì)極鏈格孢(Alternaria tenuissima)、尖孢鐮刀(Fusarium oxysporum)、層出鐮刀(Fusarium proliferatum)、麥根腐平臍蠕孢(Bipolaris sorokiniana)和群結(jié)腐霉(Pythium myriotylum)的菌絲生長及F.oxysporum孢子萌發(fā)。掃描電鏡觀察結(jié)果表明,9-羰基-10Hβ澤蘭酮和9-羰基-10,11去氫澤蘭酮破壞了菌絲正常結(jié)構(gòu),加速了菌絲和分生孢子的衰老凋亡。倍半萜單體化合物對(duì)P.myriotylum的抑制活性明顯低于倍半萜混合物——紫莖澤蘭葉油的抑菌活性。6、采用微量稀釋法測定兩種倍半萜化合物對(duì)R.solanacearum的最小抑菌濃度(MIC)。9-羰基-10Hβ澤蘭酮和9-羰基-10,11去氫澤蘭酮對(duì)R.solanacearum四號(hào)生理小種的抑制活性較低,但9-羰基-10,11去氫澤蘭酮對(duì)R.solanacearum一號(hào)生理小種(R4)抑制作用較好,MIC值為0.25mg/mL。7、建立了紫莖澤蘭中9-羰基-10Hβ澤蘭酮和9-羰基-10,11去氫澤蘭酮的UPLC-MS/MS分析方法,測定了兩種化合物在紫莖澤蘭植株中的分布積累動(dòng)態(tài)及其水解規(guī)律。結(jié)果表明兩種化合物主要分布在紫莖澤蘭葉片中,且在植株體營養(yǎng)期含量高于生殖期含量;在pH值為7和9的條件下極易水解,且水解速率受溫度影響較小。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S482.292

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 華勁松;;幾種優(yōu)質(zhì)牧草替代種植對(duì)紫莖澤蘭的防控效果分析[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年10期

2 張梅;周忠玉;任慧;譚建文;萬方浩;;紫莖澤蘭中的酚類化學(xué)成分[J];熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào);2013年01期

3 于文清;劉萬學(xué);桂富榮;劉文志;萬方浩;張利莉;;外來植物紫莖澤蘭入侵對(duì)土壤理化性質(zhì)及叢枝菌根真菌(AMF)群落的影響[J];生態(tài)學(xué)報(bào);2012年22期

4 張妙直;田兆豐;劉佳磊;謝響明;;紫莖澤蘭提取物對(duì)幾種植物病原真菌的抑制作用[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年12期

5 李會(huì)娜;劉萬學(xué);戴蓮;萬方浩;曹遠(yuǎn)銀;;紫莖澤蘭入侵對(duì)土壤微生物、酶活性及肥力的影響[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年11期

6 張玉玉;王以明;徐進(jìn)勇;劉光燦;;固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)分析紫莖澤蘭中揮發(fā)性成分[J];成都理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2009年05期

7 曹坳程;田宇;郭美霞;王秋霞;陳耕;張育森;曾溢曦;;除草劑涂抹紫莖澤蘭不同部位的效果[J];雜草科學(xué);2008年04期

8 蔣智林;劉萬學(xué);萬方浩;李正躍;;紫莖澤蘭與本地植物群落根際土壤酶活性和土壤肥力的差異[J];農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào);2008年02期

9 鐘聲;段新慧;奎嘉祥;;紫莖澤蘭對(duì)16種牧草發(fā)芽及幼苗生長的化感作用[J];草業(yè)學(xué)報(bào);2007年06期

10 程麗坤;任琴;劉小俠;果春山;騰兆乾;張青文;;棉蚜和七星瓢蟲對(duì)紫莖澤蘭揮發(fā)物的行為反應(yīng)及揮發(fā)物化學(xué)成分初步分析[J];昆蟲學(xué)報(bào);2007年11期

，

本文編號(hào)：2356639