發(fā)布時(shí)間：2018-03-31 19:06

  本文選題：番茄織球殼萎蔫病　切入點(diǎn)：生物學(xué)特性　出處：《沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：番茄(Solanum lycopersicum Mill.)是我國重要的蔬菜作物之一。由黃瓜織球殼菌(Plectosphaerella cucumerina (Lindf.) W. Gams)侵染引起的番茄織球殼萎蔫病是嚴(yán)重影響番茄產(chǎn)量的新病害,目前在遼寧省番茄產(chǎn)區(qū)均有不同程度發(fā)生,尤其保護(hù)地發(fā)病更為嚴(yán)重,重病棚室發(fā)病率高達(dá)100%,甚至絕產(chǎn)。該病害在國內(nèi)外未見相關(guān)研究報(bào)道,其發(fā)病規(guī)律不清及防控措施缺乏,導(dǎo)致病害加速蔓延,是目前番茄生產(chǎn)上亟待解決的問題。本文針對(duì)番茄生產(chǎn)上出現(xiàn)的新病害問題,采用植物病理學(xué)和分子生物學(xué)相結(jié)合的技術(shù),對(duì)番茄織球殼萎蔫病的病害癥狀、病原學(xué)、病菌致病性、病菌種群分布和品種抗病性等方面進(jìn)行系統(tǒng)研究,并建立了病害的早期分子檢測技術(shù)體系,以期為病害的預(yù)警監(jiān)測和有效防控提供科學(xué)依據(jù)。主要的研究結(jié)果如下：1.明確了番茄織球殼萎蔫病為我國番茄上的新病害,并鑒定其病原菌為黃瓜織球殼菌(Plectosphaerella cucumerina)針對(duì)遼寧省葫蘆島番茄產(chǎn)區(qū)首次發(fā)現(xiàn)的新病害—番茄織球殼萎蔫病,依據(jù)柯赫氏法則證病試驗(yàn)和病菌形態(tài)學(xué)鑒定,并結(jié)合rDNA-ITS序列分析和特異性引物檢測結(jié)果,鑒定明確其致病菌為黃瓜織球殼菌[P. cucumerina (Lindf.) W. Gams],分類地位歸屬于真菌界,子囊菌門,盤菌亞門,糞殼菌綱,肉座菌亞綱,織球殼科,織球殼屬。通過田間調(diào)查和人工接種試驗(yàn)觀察,系統(tǒng)查明了該病害的癥狀：病株前期無異常表現(xiàn),坐果后漸顯癥狀,葉片自下而上逐漸褪綠、變黃；隨病情加重,植株萎蔫,逐漸干枯,死亡。病株莖稈中空,維管束不褐變；其根系發(fā)育不良,側(cè)根和次生根極少,主根呈黃褐色、組織壞死。病株果實(shí)少而小,重病者無果實(shí)或果實(shí)不能正常成熟。該病害癥狀與一些生理病害及番茄鐮孢菌枯萎病有相似之處。2.系統(tǒng)研究了番茄織球殼萎蔫病菌的生物學(xué)特性、寄主范圍和病害初侵染來源病原菌生物學(xué)特性測定結(jié)果表明,菌絲生長最適宜的培養(yǎng)基為PDA、PSA和MEA；適宜生長的碳源為蔗糖、葡萄糖和甘露糖；適宜的氮源為蛋白胨和酵母膏。病菌在5～35℃溫度范圍均可生長,以27℃為最適；分生孢子在5～35℃內(nèi)均可萌發(fā),24℃萌發(fā)率最高；病菌的致死溫度為50℃,10min;病菌在pH4～11范圍均可生長,適宜范圍為pH6-pH8,以pH6為最適。在人工接種條件下寄主范圍測定結(jié)果表明,該病菌可侵染茄子、辣椒、番茄、生菜、苦苣、甜瓜、黃瓜、大白菜和油菜等作物。番茄病殘?bào)w、種子以及病田土壤帶菌檢測結(jié)果表明,棚室地表病殘?bào)w和土壤是病害初侵來源,種子并非病原菌攜帶體。土壤濕度與病菌存活時(shí)間關(guān)系密切,但是存活的孢子量隨時(shí)間增加而降低。在濕度為0%和25%的土壤中,病菌可分別存活22個(gè)月和18個(gè)月,在濕度為50%、75%、100%、150%和純水中存活時(shí)間相對(duì)較長,在水中存活的時(shí)間最長,兩年后病菌孢子量仍保持102CFU/mL的水平。根據(jù)該病菌生物學(xué)研究結(jié)果和田間調(diào)查情況,構(gòu)建了病害侵染循環(huán)圖。3.研究明確了我國番茄織球殼萎蔫病菌種群分布利用分子生物學(xué)和植物病理學(xué)技術(shù),對(duì)我國10省29市采集的847份番茄根部樣品進(jìn)行病菌分離和檢測,結(jié)果表明,遼寧、黑龍江、吉林、河北山東、山西和河北6個(gè)省分離獲得了黃瓜織球殼菌(P. cucumerina);不同地區(qū)樣品間病菌分離頻率不同,遼寧省病菌分離頻率為10%～82.78%；黑龍江、吉林、山東和山西省的分離頻率為4.80%～32.0%。4.建立了番茄織球殼萎蔫病早期診斷的分子檢測技術(shù)體系依據(jù)番茄織球殼萎蔫病菌以及土壤中常見病菌的rDNA-ITS序列差異,成功設(shè)計(jì)出具有高度特異性的巢式PCR引物PcF1/PcR1和PcNF1/PcNR1,準(zhǔn)確地從番茄織球殼萎蔫病菌DNA中擴(kuò)增出一條195bp的特異性片段,可以與其他供試病菌區(qū)分開,從而建立了該病害的巢式PCR檢測體系。經(jīng)過兩輪的PCR擴(kuò)增,引物靈敏性大大增加,檢測最低濃度可達(dá)到1fg/μL。應(yīng)用建立的巢式PCR檢測體系對(duì)人工接種不同潛育期的番茄根部及葉片檢測結(jié)果表明,接種植株根部及基部葉片均可檢測到病原菌。田間隨機(jī)采集100份番茄基部葉片組織樣品進(jìn)行檢測,病菌檢出率為56%,后期植株實(shí)際發(fā)病率為49%。利用該檢測技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)番茄織球殼萎蔫病早期診斷,為病害的預(yù)測預(yù)報(bào)提供了技術(shù)支撐,也為番茄工廠化育苗中菌源的有效控制提供了理論指導(dǎo)。5.建立了番茄對(duì)織球殼菌萎蔫病的抗性鑒定技術(shù)通過三年的試驗(yàn),研究出番茄抗織球殼萎蔫病鑒定的接種體制備、田間鑒定、病情調(diào)查、抗性評(píng)價(jià)等方法,建立了番茄抗織球殼萎蔫病鑒定技術(shù)體系；利用該技術(shù),對(duì)我國北方廣泛種植的46個(gè)番茄品種進(jìn)行了抗性測定,從中篩選出表現(xiàn)高抗(HR)的品種6份,占鑒定品種總數(shù)的13.0%；抗病品種(R)10份,占21.7%；中抗品種(MR)12份,占26.1%；感病品種(S)11份,占23.9%；高感品種(HS)7份,占15.2%。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S436.412

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本文編號(hào)：1692044