中國(guó)針屬線(xiàn)蟲(chóng)分類(lèi)和致病性研究及半卡盧斯屬新種描述
發(fā)布時(shí)間:2018-03-30 02:13
本文選題:針屬線(xiàn)蟲(chóng) 切入點(diǎn):半卡盧斯屬線(xiàn)蟲(chóng) 出處:《華南農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文
【摘要】:針屬線(xiàn)蟲(chóng)(Paratylenchus Micoletzky,1922)是針科(Paratylenchidae Raski,1962)中最大的一個(gè)屬,包括100多個(gè)種,我國(guó)已報(bào)道的針屬線(xiàn)蟲(chóng)約有20多種。針屬線(xiàn)蟲(chóng)寄主廣泛,在多種農(nóng)作物、果樹(shù)、林木和草類(lèi)根際均發(fā)現(xiàn)有高密度的該屬線(xiàn)蟲(chóng),有些針屬種類(lèi)已證明是寄主植物的病原物。半卡盧斯屬(Hemicaloosia RayDas,1978)線(xiàn)蟲(chóng)隸屬于鞘總科(Hemicycliophoroidea Skarbilovich,1959)中的卡盧斯科(Caloosiinae Siddiqi,1980),目前共有9個(gè)有效種,但我國(guó)并未有該屬線(xiàn)蟲(chóng)的報(bào)道。本研究采集了我國(guó)多個(gè)省份的植物根際土壤樣品,主要對(duì)其中的針屬線(xiàn)蟲(chóng)進(jìn)行了分離鑒定,共確定了針屬線(xiàn)蟲(chóng)的16個(gè)種,其中4個(gè)為針屬線(xiàn)蟲(chóng)新種,6個(gè)為針屬線(xiàn)蟲(chóng)的中國(guó)新紀(jì)錄種,在此基礎(chǔ)上對(duì)針屬線(xiàn)蟲(chóng)相關(guān)種類(lèi)和鑒定特征進(jìn)行了修訂,同時(shí)發(fā)現(xiàn)和證實(shí)了一個(gè)由深圳針線(xiàn)蟲(chóng)新種引起的紅掌新病害——紅掌慢速衰退病,此外,發(fā)現(xiàn)并描述了一個(gè)半卡盧斯屬線(xiàn)蟲(chóng)新種。具體研究結(jié)果如下:1.從重慶市麥冬草根和根際土壤分離并鑒定針屬線(xiàn)蟲(chóng)一新種:重慶針線(xiàn)蟲(chóng)新種(Paratylenchus chongqingensis n.sp.)。該針線(xiàn)蟲(chóng)的形態(tài)特征如下:雌蟲(chóng)體長(zhǎng)為262(243 274.5)μm,口針長(zhǎng)為23(21 24.5)μm,側(cè)線(xiàn)3條,唇區(qū)縊縮,略呈盤(pán)狀,陰門(mén)側(cè)膜大,尾端尖圓;雄蟲(chóng)頭前端略圓,口針和食道腺退化,有短的交合刺管,尾末端呈短絲狀。本研究還獲得了3條重慶針線(xiàn)蟲(chóng)新種的ITS-rDNA序列,序列長(zhǎng)度均為990bp。重慶針線(xiàn)蟲(chóng)新種的ITS序列的種內(nèi)變異為2 6 bp(0.2 0.6%)。2.從廣東省廣州市的竹子根和根際土壤分離并鑒定針屬線(xiàn)蟲(chóng)一新種:廣州針線(xiàn)蟲(chóng)新種(Paratylenchus guangzhouensis n.sp.)。該新種的形態(tài)特征如下:雌蟲(chóng)體長(zhǎng)為233(217 247)μm,口針長(zhǎng)為47(43 49.5)μm,側(cè)線(xiàn)3條,頭部圓,不縊縮,側(cè)器口呈蝴蝶結(jié)狀,陰門(mén)側(cè)膜小,不明顯,尾端細(xì)圓到鈍圓;雄蟲(chóng)頭部圓,口針和食道腺退化,有短的交合刺管,尾端略尖;4齡幼蟲(chóng)有口針。本研究還獲得了2條廣州針線(xiàn)蟲(chóng)新種的ITS-rDNA序列,序列長(zhǎng)度分別為1034 bp、1035 bp,2條序列間差異為1 bp;獲得3條28S rDNA D2-D3區(qū)序列,序列長(zhǎng)均為771 bp,且3條序列間變異為0 bp。3.從江蘇省南京市的馬尾松根和根際土壤分離并鑒定針屬線(xiàn)蟲(chóng)一新種:南京針線(xiàn)蟲(chóng)新種(Paratylenchus nanjingensis n.sp.)。該新種的形態(tài)特征如下:雌蟲(chóng)體長(zhǎng)為259(243 279)μm,口針長(zhǎng)為66(64 68)μm,側(cè)線(xiàn)4條,頭不縊縮,有略突出的亞中唇結(jié)構(gòu),排泄孔位于口針基部球水平位置以前,有小的但明顯的陰門(mén)側(cè)膜,尾端細(xì)圓或亞尖;雄蟲(chóng)頭截錐形,口針及食道腺退化,交合刺管短,尾端略尖。本研究獲得了3條南京針線(xiàn)蟲(chóng)新種的its-rdna序列,序列長(zhǎng)度為1032bp,3條序列間的差異為0 2bp;獲得2條28srdnad2-d3區(qū)序列,序列長(zhǎng)度均為771bp,且2條序列間無(wú)差異,相似度為100%。4.從廣東省深圳市的紅掌根和根際土壤分離檢測(cè)到高密度的針屬線(xiàn)蟲(chóng),經(jīng)鑒定該線(xiàn)蟲(chóng)為一針屬線(xiàn)蟲(chóng)新種,命名為深圳針線(xiàn)蟲(chóng)新種(paratylenchusshenzhenensisn.sp.)。該新種的形態(tài)特征如下:雌蟲(chóng)體長(zhǎng)為275(249 302)μm,口針長(zhǎng)為19(17 21)μm,側(cè)線(xiàn)4條,頭部圓,不縊縮,有4個(gè)亞中唇瓣,側(cè)唇小,口孔附近略凹陷,有明顯的陰門(mén)側(cè)膜,尾端細(xì)圓或略呈指狀;雄蟲(chóng)在泄殖腔口前向腹面彎曲,從泄殖腔口后向背面彎曲;口針和食道腺退化;有明顯的交合刺管;幼蟲(chóng)有口針。本研究還獲得了16條深圳針線(xiàn)蟲(chóng)的its序列,序列長(zhǎng)度為1047 1049bp,序列間差異為0 33bp;獲得9條28srdna的d2-d3區(qū)序列,序列間差異為0 6bp。運(yùn)用柯赫氏法則研究證明,深圳針線(xiàn)蟲(chóng)侵染紅掌根系導(dǎo)致一種新病害——紅掌慢速衰退病,受害紅掌表現(xiàn)為生長(zhǎng)發(fā)育不良,根通常呈現(xiàn)褐色,深褐色或黑色病斑。本研究建立了使用胡蘿卜愈傷組織培養(yǎng)繁殖深圳針線(xiàn)蟲(chóng)的方法,確定了該線(xiàn)蟲(chóng)在胡蘿卜愈傷組織上的最適培養(yǎng)溫度為25°c。5.鑒定描述了6個(gè)針屬線(xiàn)蟲(chóng)的中國(guó)新紀(jì)錄種,分別為:具緣針線(xiàn)蟲(chóng)(p.costatus)、盤(pán)唇針線(xiàn)蟲(chóng)(p.discocephalus)、長(zhǎng)尾針線(xiàn)蟲(chóng)(p.longicaudatus)、鋸尾針線(xiàn)蟲(chóng)(p.serricaudatus)、變化針線(xiàn)蟲(chóng)(p.variabilis)和變異針線(xiàn)蟲(chóng)(p.variatus)。并提出錨針線(xiàn)蟲(chóng)和具緣針線(xiàn)蟲(chóng)可能是艾達(dá)利摩斯針線(xiàn)蟲(chóng)的同物異名;胚軸針線(xiàn)蟲(chóng)(p.epicotylus)可能是盤(pán)唇針線(xiàn)蟲(chóng)的同物異名;變異針線(xiàn)蟲(chóng)和水生針線(xiàn)蟲(chóng)應(yīng)是兩個(gè)有效種。6.從廣東省廣州市木荷根和根際土壤采集分離并鑒定半卡盧斯屬線(xiàn)蟲(chóng)一新種:廣州半卡盧斯線(xiàn)蟲(chóng)新種(hemicaloosiaguangzhouensisn.sp.)。該新種的形態(tài)特征為:雌蟲(chóng)體長(zhǎng)為906(798 961)μm,體環(huán)數(shù)為298(282 313),口針長(zhǎng)65.5(59 69)μm,蟲(chóng)體外側(cè)覆蓋一層膜狀體鞘,側(cè)區(qū)有一條縱線(xiàn),受精囊中無(wú)精子,尾長(zhǎng)130(115 145)μm,陰門(mén)到尾端體環(huán)數(shù)為63(58 69);肛門(mén)到尾端體環(huán)數(shù)為53(49 59);陰門(mén)和肛門(mén)間體環(huán)數(shù)為9(7 11);雄蟲(chóng)未知。本研究獲得了2條廣州半卡盧斯線(xiàn)蟲(chóng)新種的its-rdna序列,序列長(zhǎng)度均為805bp,序列的差異為0bp;獲得2條28s-rdna的d2-d3區(qū)序列,序列長(zhǎng)度均為769bp,序列間差異為1bp;獲得2條18s-rdna序列,序列長(zhǎng)度為882bp,序列間差異為1bp。采用六種限制性?xún)?nèi)切酶分別對(duì)廣州半卡盧斯線(xiàn)蟲(chóng)新種itsrdna的pcr純化產(chǎn)物進(jìn)行酶切反應(yīng),酶切片段大小分別為:avai-805bp;bsh1236i-805bp;DraI-805 bp;HinfI-625,132,48 bp;Hin6I-586,130,78,11 bp;MspI-424,303,78 bp。7.本研究分別采用ITS-rDNA序列和28S-rDNA的D2-D3區(qū)序列重建了針屬線(xiàn)蟲(chóng)的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。
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【學(xué)位授予單位】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:S432.45
【參考文獻(xiàn)】
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1 裴艷艷;駱愛(ài)麗;謝輝;楊再福;程曦;徐春玲;;中國(guó)不同地區(qū)水稻干尖線(xiàn)蟲(chóng)種群的繁殖特性研究[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年06期
,本文編號(hào):1683896
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