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棉花抗冷性鑒定及相關(guān)基因的表達研究

發(fā)布時間:2018-03-25 13:50

  本文選題:棉花 切入點:低溫脅迫 出處:《中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院》2016年博士論文


【摘要】:1.陸地棉萌發(fā)至幼苗期抗冷性鑒定研究建立了萌發(fā)期、芽期、子葉期相應(yīng)抗冷評價體系。0℃處理4d,正常條件下(溫度28℃、光照/黑暗為14h/10h)恢復(fù)7d的相對子葉平展率可以做為萌發(fā)期抗冷鑒定指標(biāo);4℃處理5d,恢復(fù)正常生長的7d的子葉平展率可以作為芽期抗冷鑒定指標(biāo);4℃處理24h,恢復(fù)正常生長7d的抗冷指數(shù)可以作為子葉期抗冷鑒定指標(biāo)。不同材料在不同生育時期的抗冷性是有差異的,篩選出萌發(fā)期耐冷材料有7份;芽期耐冷材料有4份;子葉期抗冷材料有7份。棉花芽期抗冷性與酶活力有關(guān)。2.低溫對棉花幼苗的影響及抗冷相關(guān)基因的表達4℃低溫處理24h對冷敏感材料生長抑制大于抗冷材料,對根系生長抑制大于地上部分;葉片細胞膜對低溫脅迫敏感,抗冷材料葉片細胞膜穩(wěn)定性大于冷敏感材料,根系細胞膜在受到低溫脅迫后相對比較穩(wěn)定;低溫脅迫24h后,兩個材料的根系中POD、SOD、CAT活性均降低了,但抗冷材料下降幅度小于冷敏感材料;低溫脅迫后5個與抗冷相關(guān)的基因在抗冷材料葉片中上調(diào)表達基因多于下調(diào)基因,在根中下調(diào)表達基因多于上調(diào)表達的,這與根系的生長受抑制明顯結(jié)果是一致的。3.陸地棉苗期響應(yīng)低溫脅迫的全基因組轉(zhuǎn)錄分析4℃低溫處理陸地棉抗冷材料三葉期幼苗24h前后進行轉(zhuǎn)錄組測序,篩選差異基因數(shù)2487,上調(diào)表達45.64%,下調(diào)表達54.36%。極端上調(diào)表達的的基因包括:類似乙烯響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子ERF109,類似稻內(nèi)酯A合成酶,15kD類似油質(zhì)蛋白,δ-8鞘脂類脫氫酶,類似抗病蛋白At1g12280,NBS-LRR抗病蛋白,多藥抗性泵,生長類響應(yīng)蛋白等。顯著富集的代謝通路主要有植物激素信號傳導(dǎo)、晝夜節(jié)律-植物、植物-病菌相互作用、脂肪酸延伸等。差異基因中共鑒定出被低溫誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子有31類,主要包括AP2/ERF,Zinc figure,DREB1,NAC和MYB等基因家族的成員。4.棉花CIPK基因家族的全基因組分析及響應(yīng)低溫脅迫反應(yīng)在棉花D基因組和A基因組分別鑒定出41個和38個CIPK基因,分為內(nèi)含子豐富型和無內(nèi)含子型兩種類型,對CIPK基因成員抗逆功能分析表明,低溫、干旱、鹽分脅迫均可以誘導(dǎo)CIPK基因表達,但是對不同脅迫響應(yīng)不同。A基因組中響應(yīng)逆境脅迫表達上調(diào)的CIPK基因數(shù)目要多于D基因組。5.棉花脫水素基因GhDHN1的克隆和其響應(yīng)低溫脅迫的表達分析在陸地棉中克隆了GhDHN1,該基因全長為726bp,開放閱讀編碼框為636bp,編碼211個氨基酸,該蛋白為K2S型脫水素蛋白;GhDHN1主要定位在細胞膜上,GhDHN1響應(yīng)低溫脅迫,在抗冷材料和冷敏感材料中表達差異顯著,其表達量與棉花抗冷性呈正相關(guān),可以作為篩選不同抗冷材料的分子標(biāo)記,可以作為候選基因培育棉花抗冷材料。
[Abstract]:1. Identification of cold resistance of upland cotton from germination to seedling stage. The corresponding cold resistance evaluation system of germinating stage, bud stage and cotyledon stage was established for 4 days under normal condition (temperature 28 鈩,

本文編號:1663406

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