胚胎期外源性營養(yǎng)物質(zhì)介入對鵝胸肌及腸道發(fā)育規(guī)律的影響研究
本文選題:鵝 切入點:二糖 出處:《吉林農(nóng)業(yè)大學》2016年博士論文
【摘要】:本研究以吉林白鵝為試驗動物,對孵化后期胚胎及雛鵝(1周齡)胸肌和小腸的發(fā)育規(guī)律進行研究,針對胚胎后期和雛鵝階段機體能量和營養(yǎng)物質(zhì)缺乏導致的胸肌發(fā)育緩慢現(xiàn)象,采用胚胎后期外源性營養(yǎng)物質(zhì)介入的方法(胚蛋給養(yǎng)),探討其對雛鵝胸肌和小腸發(fā)育規(guī)律的影響。1.鵝胚胎后期和雛鵝胸肌與腸道發(fā)育規(guī)律研究選擇100枚發(fā)育良好的胚蛋,在孵化第23 d(E23)、27 d(E27)、出雛當天(0 d)、1 d、4 d和7d,分別采集胸肌、肝臟和小腸組織樣(n=6),測定胸肌和小腸重量、肌糖原和肝糖原含量、十二指腸、空腸和回腸的蔗糖酶與麥芽糖酶活性;胸肌纖維直徑和小腸各段絨毛高度、寬度、隱窩深度以及肌層厚度;對胸肌成肌因子5(Myf5)基因和小腸二糖酶(SI)、葡萄糖轉(zhuǎn)運載體1(SGLT1)以及葡萄糖轉(zhuǎn)運載體2(GLUT2)基因進行克隆測序,用熒光定量PCR法檢測胸肌Myf5和肌肉生長抑制素(MSTN)基因,以及小腸各段SI、SGLT1和GLUT2基因mRNA相對表達量的變化規(guī)律。結果表明:胚胎后期和雛鵝階段由于機體能量和營養(yǎng)物質(zhì)缺乏促使胸肌發(fā)生了分解代謝,導致胸肌纖維直徑降低和胸肌發(fā)育緩慢,可通過提高Myf5和降低MSTN的mRNA相對表達量促進胸肌發(fā)育。胚胎后期和雛鵝階段小腸迅速發(fā)育,通過絨毛高度增加來增大吸收面積,同時顯著提高粘膜二糖酶活性,以及提高了SI、SGLT1和GLUT2 mRNA相對表達量來促進小腸發(fā)育,其中十二指腸和空腸發(fā)育優(yōu)于回腸,也表明空腸是碳水化合物吸收的主要部位。2.胚胎期外源性營養(yǎng)物質(zhì)介入對鵝胸肌和腸道發(fā)育規(guī)律的影響選擇發(fā)育良好吉林白鵝胚蛋600枚,分為4組,于孵化第24 d(E24)進行胚蛋給養(yǎng),每枚胚蛋注射1.5 ml給養(yǎng)液,對照組(CON)不進行給養(yǎng),3個試驗組給養(yǎng)液如下:二糖組(DS)營養(yǎng)液為25 g·L-1麥芽糖,25 g·L-1蔗糖,7.5 g L-1NaCl;蛋氨酸組(Met)營養(yǎng)液為Met 5 g·L-1,NaCl 7.5 g L-1;復合組(DS+Met)的營養(yǎng)液為25 g·L-1麥芽糖,25 g·L-1蔗糖,5 g·L-1Met,7.5 g L-1 NaCl。孵化出雛后,根據(jù)體重每個處理隨機分為3個重復,每個重復30只雛鵝進行飼養(yǎng),飼養(yǎng)期為28 d。于E23、E27、出雛當天(0 d)、1 d、4 d、7 d、14 d、21 d和28 d進行樣品采集,各組選取胚蛋或健康鵝雛各6枚/羽稱重后采血。分別采集胸肌、肝臟和空腸組織樣(n=6)。測定胸肌纖維直徑、空腸絨毛高度和寬度;肌糖原和肝糖原含量;肝臟葡萄糖-6-磷酸酶活性,空腸二糖酶、堿性磷酸酶、鈉鉀ATP酶、還原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px);測定胸肌中Myf5和MSTN基因,空腸SI、SGLT1和GLUT2 mRNA相對表達量。結果表明:胚蛋給養(yǎng)DS能通過提高出雛前后肌糖原和肝糖原含量來提高機體的糖原儲備,緩解胸肌蛋白質(zhì)動員;并通過提高小腸絨毛表面積、促進腸上皮細胞成熟、提高二糖酶活性和提高SGLT1、GLUT2和SI mRNA相對表達量來促進腸道的發(fā)育和提高腸道對營養(yǎng)物的消化和吸收能力。胚蛋給養(yǎng)Met可通過調(diào)節(jié)Myf5和MSTN mRNA的相對表達量來促進胸肌發(fā)育,提高腸道GSH含量和GSH-Px活性來增強腸道的氧化還原能力促進腸道的發(fā)育。胚蛋給養(yǎng)DS和Met在出雛前后可緩解機體能量緊缺狀態(tài)和促進胸肌發(fā)育,二者對空腸絨毛高度和表面積的增加以及GLUT2 mRNA的表達量的增高有顯著的交互作用。3.胚胎期外源性營養(yǎng)物質(zhì)介入對孵化率及雛鵝生產(chǎn)性能的影響在孵化結束,測定出殼時間、孵化率、助產(chǎn)率。并于出雛當天(0 d)、7 d和28 d從每組選取6羽(每個重復2羽)雛鵝稱重,進行血液樣品采集,測定血清中生化指標、GSH、GSSG、GSH-Px活性和丙二醛(MDA)含量。測定卵黃囊重量(n=6)和相關生產(chǎn)性能指標。結果表明:胚蛋給養(yǎng)DS和Met縮短了雛鵝整體出殼時間,減少了能源的消耗,提高了雛鵝早期蛋白質(zhì)沉積和機體的抗氧化能力,促進了卵黃囊的吸收,提高了飼養(yǎng)期間雛鵝的增重速度。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S835
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本文編號:1662623
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