本文關(guān)鍵詞：硒缺乏對(duì)雞免疫器官損傷機(jī)制的研究　出處：《東北農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：營養(yǎng)微量元素硒是各種生命體正常免疫功能的重要組分之一。硒蛋白和硒在免疫系統(tǒng)中扮演重要角色。硒在雞免疫系統(tǒng)中是非常重要的,它是通過硒蛋白的形式發(fā)揮其生理功能。細(xì)胞因子是一類是由種類廣泛的造血和非造血細(xì)胞產(chǎn)生的可溶性低分子量的多肽,對(duì)細(xì)胞的增值、分化、激活和運(yùn)動(dòng)具有抑制或提升作用。熱休克蛋白具有保守性,幾乎存在于所有物種體內(nèi),并熱休克蛋白通常被作為在各種應(yīng)激條件動(dòng)物(包括禽類)的生物學(xué)標(biāo)記。自噬是一個(gè)在特定細(xì)胞和系統(tǒng)中對(duì)標(biāo)靶組分發(fā)揮影響的過程。哺乳動(dòng)物體內(nèi)的硒蛋白、細(xì)胞因子、熱休克蛋白、自噬相關(guān)基因以及免疫系統(tǒng)的超微結(jié)構(gòu)對(duì)日糧的硒水平是十分敏感的;但是,人們對(duì)于雞脾臟、法氏囊及胸腺中硒蛋白和熱休克蛋白的mRNA表達(dá)量、熱休克蛋白的蛋白水平、自噬相關(guān)基因的mRNA和蛋白水平以及硒缺乏對(duì)細(xì)胞因子、免疫器官的內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響知之甚少。本試驗(yàn)中,我們測(cè)定了硒蛋白Txnrd1、Txnrd2、Txnrd3、Dio1、Dio2、Dio3、GPx1、GPx2、GPx3、Gpx4、Sepp1、Selo、Sep15、Sepx1、Sels、Seli、Selu、Selh和SPS2的mRNA表達(dá)量,熱休克蛋白Hsp27、Hsp40、Hsp60、Hsp70和Hsp90的mRNA表達(dá)量、Hsp40、Hsp60、Hsp70和Hsp90的蛋白水平,自噬相關(guān)基因LC3-I、LC3-II、Beclin 1、Dynein、ATG5、TOR1的mRNA表達(dá)量、LC3-II、Beclin 1、Dynein的蛋白水平,細(xì)胞因子IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17、IL-1β、IFN-α、IFN-β、IFN-γ和TNF-α的含量,以及雞胸腺、脾臟、法氏囊結(jié)構(gòu)損傷變化。試驗(yàn)動(dòng)物被隨機(jī)分為2組:缺硒組飼喂含硒量為0.033mg/Kg的日糧,對(duì)照組飼喂添加硒至0.15mg/Kg的日糧。實(shí)時(shí)定量PCR用于檢測(cè)15、25、35、45和55日齡雞的硒蛋白、熱休克蛋白、自噬相關(guān)基因的表達(dá)水平,并于35、45、55日齡雞熱休克蛋白、自噬相關(guān)基因的蛋白水平是通過western blot技術(shù)檢測(cè)分析的,ELISA用于評(píng)定細(xì)胞因子在15、35、55日齡的含量,另外利用電鏡觀察雞免疫器官的超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,缺硒組雞胸腺、脾臟、法氏囊中的硒蛋白Txnrd1、Txnrd2、Txnrd3、Dio1、Dio2、Dio3、GPx1、GPx2、GPx3、Gpx4、Sepp1、Selo、Sep15、Sepx1、Sels、Seli、Selu、Selh和SPS2的mRNA水平均顯著降低。細(xì)胞因子的研究表明在缺硒組胸腺中IL-2、IL-6、IL-17、IL-1β、IFN-α的水平顯著降低,而IL-8、IL-10、IFN-β、IFN-γ和TNF-α的含量顯著升高。在缺硒組法氏囊中IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17、IL-1β、IFN-α、IFN-β、IFN-γ顯著減少,而TNF-α顯著增加。在缺硒組胸腺中可觀察到IL-2、IL-10、IL-17、IL-1β、IFN-α、IFN-β的水平顯著降低,而IL-6、IL-8、IFN-γ和TNF-α的水平顯著升高。熱休克蛋白mRNA水平的結(jié)果顯示缺硒組胸腺、脾臟、法氏囊中5種熱休克蛋白(Hsp27、Hsp40、Hsp60、Hsp70和Hsp90)均顯著增加。熱休克蛋白的蛋白水平結(jié)果與其mRNA水平結(jié)果一致。自噬相關(guān)基因表達(dá)量的結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,缺硒組脾臟中LC3-I、IL3-II。Beclin1、Dynein、ATG5、TOR1的mRNA水平和LC3-II、Beclin1、Dynein的蛋白水平更高;缺硒組法氏囊中LC3-I、LC3-II、Beclin1、Dynein、ATG5、TOR1的mRNA水平,Beclin1和Dynein的蛋白水平增加而LC3-II的蛋白水平降低;缺硒組胸腺中LC3-I、Beclin1和AGT5的mRNA水平升高,LC3-II、Dynein、TOR1的mRNA水平下降,Beclin1的蛋白水平升高而LC3-II和Dynein的蛋白水平明顯下降�？稍谌蔽M胸腺、脾臟、法氏囊中觀察到進(jìn)一步的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,如自噬泡、自噬性溶酶體以及溶酶體降解�？偠灾�,缺硒導(dǎo)致硒蛋白表達(dá)量的顯著降低以及細(xì)胞因子和自噬相關(guān)基因的變化。超微結(jié)構(gòu)的變化也進(jìn)一步驗(yàn)證了硒缺乏時(shí),免疫器官(脾臟、胸腺、法氏囊)發(fā)生了一定程度的損傷。我們的結(jié)果為缺硒對(duì)雞免疫器官影響的研究增添了數(shù)據(jù)資料。
[Abstract]:The trace element selenium nutrition is an important component of the normal immune function of all kinds of life. Protein and play an important role in the immune system of selenium. Selenium is very important in the chicken immune system, it is exerting its physiological function through selenoprotein form. Cytokine is a polypeptide produced by a wide variety of soluble low molecular the amount of hematopoietic and non hematopoietic cells, on cell proliferation, differentiation, activation and inhibit or enhance the role of exercise. Heat shock protein is conserved, exists in almost all species, and heat shock protein is usually made in various stress conditions (including animal poultry) the biological markers of autophagy is a. The target group in specific cells and systems in the play process. Effects of mammalian selenoprotein, cell factor, heat shock protein, ultra micro structure of autophagy related genes and immune system 瀵規(guī)棩綺殑紜掓按騫蟲槸鍗佸垎鏁忔劅鐨，

本文編號(hào)：1355777