本文關(guān)鍵詞：枯草芽孢桿菌對(duì)雪山雞生產(chǎn)性能、腸道健康和免疫機(jī)能的影響及機(jī)制　出處：《揚(yáng)州大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 枯草芽孢桿菌 雪山雞 生產(chǎn)性能 腸道健康 免疫機(jī)能

【摘要】：隨消費(fèi)者對(duì)食品安全和動(dòng)物生產(chǎn)過程中因抗生素使用不當(dāng)而引起畜產(chǎn)品中殘留的問題關(guān)注與日俱增,研究探索新型抗菌飼料添加劑成為熱點(diǎn)課題。以有益微生物菌群研制開發(fā)的飼用微生物添加劑,作為一類新型無公害飼料添加劑已被廣泛使用�？莶菅挎邨U菌(Bacillus subtilis,BS)是一種優(yōu)質(zhì)、安全的益生菌,它具有提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能、增強(qiáng)機(jī)體免疫、抗菌能力、改善腸道菌群、提高機(jī)體抗氧化功能等多種功能。雖然芽孢桿菌對(duì)肉雞的功效已經(jīng)得到了廣泛的認(rèn)識(shí),圍繞這一主題的研究也很多,但基本上都以快速型白羽肉雞為研究對(duì)象。以慢速型優(yōu)質(zhì)型雞為研究對(duì)象的研究甚少,而現(xiàn)在國內(nèi)慢速型優(yōu)質(zhì)雞占整體肉雞養(yǎng)殖量近50%,雪山雞為我國地方優(yōu)質(zhì)黃羽肉雞品種之一。本論文旨在闡明枯草芽孢桿菌對(duì)雪山雞的生產(chǎn)性能和免疫功能的影響及其作用機(jī)理,為慢速型優(yōu)質(zhì)型雞合理使用飼用芽孢桿菌提供理論指導(dǎo)。研究?jī)?nèi)容如下:試驗(yàn)一、研究BS對(duì)大腸桿菌(E.coli)和沙門氏菌的體外抑菌作用選擇 8 株 BS 菌株 BS044、BS048、BS050、BS075、BS090、BS155、BS281 和 BS306,以抑菌圈試驗(yàn)評(píng)估其對(duì)2株標(biāo)準(zhǔn)菌株(E.coli K88菌株)和腸炎沙門氏菌(Salmonella enteritis,SEATCC13076菌株)和61株臨床分離株(29株E.coli、32株沙門氏菌)的抑菌作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)BS048和BS155對(duì)E.coli K88菌株的抑菌圈較大(20.5 ± 0.3 mm、15.8± 1.1 mm),抑菌效果較強(qiáng),BS090 和 BS306 的抑菌圈較小(8.6 ± 0.7 mm、10.1± 0.6 mm),抑菌效果較弱;(2)BS048和BS155對(duì)SE ATCC13076的抑菌圈較大(19.2±0.7 mm、17.3 ±0.9 mm),抑菌效果較強(qiáng),BS090的抑菌圈較小(11.2 ±0.8 mm),抑菌效果較弱;(3)BS048、BS155菌株分別能夠抑制20株和12株E.coli臨床分離菌株,抑菌譜較廣,BS090、BS306菌株僅分別能抑制2株和5株,抑菌譜較窄;(4)BS048、BS155菌株均能夠抑制23株沙門氏菌臨床分離株,抑菌譜較廣,BS090僅抑制7株,抑菌譜較窄。綜合上述結(jié)果,BS048和BS155表現(xiàn)出較好的E.coli和沙門氏菌雙抑菌活性。故將BS048和BS155作為試驗(yàn)菌株進(jìn)行后續(xù)的雪山雞生長(zhǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)二、枯草芽孢桿菌對(duì)雪山雞生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化率、盲腸菌群變化、維持腸道健康作用及機(jī)理選取1470只體重相近(35.0 g± 1.0 g)的1日齡雪山公雞隨機(jī)分為對(duì)照組(基礎(chǔ)飼糧)、BS048組(添加0.1%(W/W)BS048的基礎(chǔ)日糧)和BS155組(添加0.1%(W/W)BS155的基礎(chǔ)日糧),飼養(yǎng)80d。測(cè)定了 BS048和BS155分別對(duì)雪山雞生長(zhǎng)性能、成活率、小腸食糜粘度與pH、空腸消化酶活性、盲腸揮發(fā)性脂肪酸(volatile fatty acid,VFA)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):與對(duì)照組相比,BS048組雪山雞的日增重(average daily gain,ADG)、日采食量(average daily feed intake,ADFI)、空腸消化酶(淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶)活性和盲腸VFA含量均有顯著提高(P0.05),小腸食糜粘度則顯著降低(P0.01),料肉比、小腸食糜pH則無顯著變化(P0.05),而BS155組僅ADFI、空腸淀粉酶和盲腸VFA含量顯著提高(P0.05);成活率各組間差異均不顯著。由此可見,BS048不僅能夠降低小腸食糜粘度并提高空腸消化酶活性,增強(qiáng)腸道的消化功能,而且可以促進(jìn)盲腸VFA的產(chǎn)生,維持并改善腸道健康狀況,從而提高雪山雞的生長(zhǎng)性能。雖然BS155對(duì)雪山雞腸道的作用機(jī)制和BS048相似,但沒有表現(xiàn)出明顯的促生長(zhǎng)效果。雪山雞80日齡時(shí),添加枯草芽孢桿菌處理組,雪山雞對(duì)粗蛋白質(zhì)和能量的表觀利用率顯著提高,且BS048與BS155兩組間沒有顯著性差異,對(duì)干物質(zhì)、鈣和磷的表觀利用率均沒有明顯的影響。在20、40日齡時(shí),添加枯草芽孢桿菌BS048和BS155活菌制劑后均提高了雪山雞盲腸菌群多樣性,并且BS048表現(xiàn)優(yōu)于BS155。綜合本節(jié)3個(gè)試驗(yàn),BS048的功效相比BS155更好,故后續(xù)章節(jié)僅研究BS048的免疫調(diào)節(jié)和抗感染機(jī)理。試驗(yàn)三、研究BS048對(duì)雪山雞抗沙門氏菌(Salmonella)感染防御能力的影響選取240只體重相近(35.0 g± 1.0 g)的1日齡雪山雞(公,SE陰性)隨機(jī)分為四組,對(duì)照組、對(duì)照感染組、BS組和BS感染組(前兩組飼喂基礎(chǔ)日糧,后兩組飼喂添加0.1%(W/W)BS048的基礎(chǔ)日糧),每組設(shè)3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20只,飼養(yǎng)14天;兩個(gè)感染組在5-7日齡時(shí)每天以1x108CFU SE感染試驗(yàn)雞只。觀察BS048對(duì)正常和SE感染雪山雞盲腸粘膜、肝臟、腎臟SE荷菌量、空腸粘膜結(jié)構(gòu)、血液Ig、空腸分泌型IgA(secretory IgA,sIgA)、空腸粘膜堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、抗氧化功能以及緊密連接蛋白、Toll樣受體(Toll-like receptor,TLR)和炎癥因子基因表達(dá)的影響。結(jié)果顯示:(1)對(duì)于正常雪山雞,BS048能夠顯著促進(jìn)空腸粘膜發(fā)育及其sIgA分泌(P0.05),提高空腸粘膜ALP活性(P0.05)和小腸抗氧化功能(P0.05),誘導(dǎo)空腸粘膜細(xì)胞的緊密連接蛋白(CLDN-1、OCLN、ZO-1)、TLR2和炎癥因子(IL-6、IL-10)(P0.05)表達(dá);(2)對(duì)于SE感染雪山雞,BS048能夠顯著減少SE感染雪山雞盲腸粘膜、肝臟和腎臟中的SE數(shù)量(P0.01),促進(jìn)小腸粘膜結(jié)構(gòu)的損傷恢復(fù)以及生長(zhǎng)發(fā)育,促進(jìn)血液Ig和腸道sIgA分泌(P0.05),提高空腸粘膜ALP活性(P0.05)并降低MPO活性(P0.01),提高小腸抗氧化功能(P0.05),上調(diào)空腸粘膜的緊密連接蛋白(CLDN-1、OCLN、ZO-1)基因表達(dá)并下調(diào)TLR(TLR2、TLR4)與炎癥因子(IL-6、IFN-γ、IL-10)的基因表達(dá)。由此可見,BS048能夠增強(qiáng)雪山雞的腸粘膜屏障功能、機(jī)體免疫和抗SE感染能力,包括:(1)促進(jìn)小腸粘膜發(fā)育以及感染后的恢復(fù);(2)增強(qiáng)機(jī)體的體液免疫和腸道粘膜免疫;(3)增強(qiáng)腸道抗氧化功能,緩解因細(xì)菌感染引起的氧化應(yīng)激,保護(hù)組織及其正常功能;(4)增強(qiáng)腸粘膜物理屏障;(5)增強(qiáng)空腸粘膜對(duì)病原體的識(shí)別和防御能力。試驗(yàn)四、研究BS048對(duì)雞巨噬細(xì)胞免疫功能的影響本研究以108CFU/mL BS048處理HD11雞巨噬細(xì)胞系,并以LPS處理(100 ng/mL)為陽性對(duì)照,觀察BS048對(duì)HD11細(xì)胞活化以及吞噬殺菌、細(xì)胞因子分泌和NO合成等功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)BS048對(duì)胞外乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase,LDH)活性沒有顯著影響(P0.05),其具有良好的安全性;(2)BS048能夠顯著提高HD11細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶和LDH活性(P0.05),表明其導(dǎo)致了 HD11細(xì)胞活化;(3)BS048能夠顯著增強(qiáng)HD11細(xì)胞的吞噬功能以及其殺傷胞內(nèi)SE的能力(P0.01);(4)BS048能夠顯著上調(diào)HD11細(xì)胞的促炎因子IL-1β、IL-6,抑炎因子IL-10、TGF-β1,抗病毒因子IFN-β的基因表達(dá)(P0.01),表明BS048具有很強(qiáng)的抗炎能力;(5)BS048能夠顯著上調(diào)HD11細(xì)胞的iNOS基因表達(dá)(P0.01),增加iNOS活性和胞外NO含量(P0.01),表明其能夠顯著增強(qiáng)HD11細(xì)胞的NO合成能力。由上可見,BS048不僅對(duì)雞巨噬細(xì)胞有良好的安全性,而且能夠活化雞巨噬細(xì)胞以增強(qiáng)雪山雞的免疫功能和抗SE感染能力。綜合上述研究獲得結(jié)論:(1)BS048對(duì)標(biāo)準(zhǔn)及臨床分離的E.coli和沙門氏菌菌株均有較好的體外抑制作用;(2)BS048通過增強(qiáng)腸道消化功能和改善腸道健康,提高雪山雞的生長(zhǎng)性能;(3)BS048通過增強(qiáng)巨噬細(xì)胞功能、腸道粘膜屏障、機(jī)體免疫,改善雪山雞的腸道健康和抗沙門氏菌感染能力。可見,BS048是一株適用于雪山雞的優(yōu)質(zhì)益生菌。
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S831.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡海紅;石愛琴;胡艷華;李敏;丁明;趙輔昆;;枯草芽孢桿菌整合載體的構(gòu)建及基因組的改造[J];浙江理工大學(xué)學(xué)報(bào);2010年01期

2 彭霞;;枯草芽孢桿菌在養(yǎng)豬生產(chǎn)上的應(yīng)用[J];廣東飼料;2010年02期

3 王曉閣;;枯草芽孢桿菌研究進(jìn)展與展望[J];中山大學(xué)研究生學(xué)刊(自然科學(xué).醫(yī)學(xué)版);2012年03期

4 劉曄;王斌;王龍祥;王維才;張付云;;枯草芽孢桿菌的生物活性及其應(yīng)用進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年14期

5 仇麗;枯草芽孢桿菌在養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J];漁業(yè)現(xiàn)代化;2002年04期

6 姚震聲,陳中義,陳志誼,鄭小波,張杰,黃大f ;綠色熒光蛋白基因標(biāo)記野生型生防枯草芽孢桿菌的研究[J];生物工程學(xué)報(bào);2003年05期

7 陳蕾,申麗,陳官營(yíng),常維山;枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)[J];山東畜牧獸醫(yī);2003年06期

8 崔京春,吳俊罡,劉吉華,王梅雪;枯草芽孢桿菌發(fā)酵過程的優(yōu)化[J];飼料工業(yè);2004年07期

9 王振華;潘康成;;不同濃度中藥對(duì)枯草芽孢桿菌體外生長(zhǎng)的影響[J];中國獸醫(yī)雜志;2007年10期

10 尹敬芳;周向陽;李健強(qiáng);李永紅;侯紅利;張文華;;綠色熒光蛋白標(biāo)記檢測(cè)枯草芽孢桿菌在水體中的存活動(dòng)態(tài)[J];分析化學(xué);2007年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 亓雪晨;齊俊生;王琦;梅汝鴻;;枯草芽孢桿菌啟動(dòng)子片段的克隆及其在綠色熒光蛋白標(biāo)記中的應(yīng)用[A];中國植物病理學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

2 徐琳琳;高潔;;生防菌枯草芽孢桿菌的分離鑒定和抑菌譜測(cè)定[A];公共植保與綠色防控[C];2010年

3 張麗霞;李榮禧;王琦;梅汝鴻;;枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化[A];中國植物病理學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)暨植物病理學(xué)報(bào)創(chuàng)刊50周年紀(jì)念會(huì)論文摘要集[C];2005年

4 賈宇;張樹斌;王立安;;一株具廣譜抗植物病原真菌效果的枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用[A];2009’環(huán)保農(nóng)藥新技術(shù)、新產(chǎn)品暨生物農(nóng)藥技術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

5 劉曉華;王肆玖;錢云國;金爾光;程蕾;夏瑜;杜小華;陳江榮;肖金庭;;一起飼喂枯草芽孢桿菌產(chǎn)品引起鮮奶不能發(fā)酵的原因分析[A];中國奶業(yè)協(xié)會(huì)第24次繁殖學(xué)術(shù)年會(huì)暨國家奶牛/肉牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系第一屆全國牛病防治學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

6 劉桂君;孟佑婷;楊素玲;尚宏忠;;生防菌枯草芽孢桿菌的輻射誘變研究[A];公共植保與綠色防控[C];2010年

7 張麗霞;李榮禧;王琦;梅汝鴻;;枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化[A];中國植物病理學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)暨植物病理學(xué)報(bào)創(chuàng)刊50周年紀(jì)念會(huì)論文集[C];2005年

8 張麗霞;李榮禧;齊俊生;王琦;梅汝鴻;;枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化[A];中國植物病理學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)暨植物病理學(xué)報(bào)創(chuàng)刊50周年紀(jì)念會(huì)論文集[C];2005年

9 劉輝;魏祥法;井慶川;劉雪蘭;劉瑞亭;石天虹;;一株枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化[A];第三屆第八次全國學(xué)術(shù)研討會(huì)暨動(dòng)物微生態(tài)企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略論壇論文集[C];2006年

10 任建軍;高美娟;胡旭松;劉柳;師光祿;王有年;;枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis RN-61)發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件的優(yōu)化[A];中國園藝學(xué)會(huì)2013年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院;一種枯草芽孢桿菌制劑的發(fā)酵生產(chǎn)方法將有效降低成本[N];中國漁業(yè)報(bào);2014年

2 ;淺談枯草芽孢桿菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用[N];中國海洋報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 姬生躍;新型抗菌糖肽-sublancin的增量表達(dá)及其生物學(xué)活性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

2 章博;枯草芽孢桿菌戊糖與半纖維素的高效利用及乙偶姻的生產(chǎn)[D];天津大學(xué);2014年

3 周平蘭;春蘭炭疽病致病菌生物學(xué)特性及其生防菌抑菌活性研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 朱沛霽;枯草芽孢桿菌對(duì)雪山雞生產(chǎn)性能、腸道健康和免疫機(jī)能的影響及機(jī)制[D];揚(yáng)州大學(xué);2017年

5 韓斌斌;枯草芽孢桿菌基因組尺度代謝網(wǎng)絡(luò)重構(gòu)[D];天津大學(xué);2013年

6 李晶;黃瓜枯萎病高效拮抗枯草芽孢桿菌的篩選及生防機(jī)制研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2010年

7 任建軍;枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis RN-61）抗菌蛋白的純化及鑒定[D];北京林業(yè)大學(xué);2013年

8 陳曉月;禽流感重組枯草芽孢桿菌的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)免疫研究[D];吉林大學(xué);2008年

9 劉永鋒;枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）Bs-916胞外抗菌蛋白質(zhì)的純化及其鑒定[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

10 張清霞;甘露寡糖誘導(dǎo)抗病反應(yīng)初步研究及枯草芽孢桿菌甘露聚糖酶基因的克隆與表達(dá)[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李小連;醋糟發(fā)酵生產(chǎn)飼用微生物產(chǎn)品的研究[D];河北大學(xué);2015年

2 鄭U，

本文編號(hào)：1324844