結(jié)球甘藍(lán)蠟質(zhì)缺失基因cgl-1的精細(xì)定位與分析
本文關(guān)鍵詞:結(jié)球甘藍(lán)蠟質(zhì)缺失基因cgl-1的精細(xì)定位與分析 出處:《中國農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年博士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:結(jié)球甘藍(lán)(Brassica oleraceaL.var.capitata L.)簡稱甘藍(lán),為十字花科蕓薹屬甘藍(lán)種的一個變種,是我國主要栽培蔬菜之一,在我國蔬菜的周年供應(yīng)和出口貿(mào)易中占有重要的地位。葉球是甘藍(lán)的食用器官,球顏色綠是甘藍(lán)育種中一項非常重要的商品品質(zhì)指標(biāo)。普通甘藍(lán)的葉色為綠色、灰綠色或藍(lán)綠色,外葉表面一般具有一層蠟質(zhì)覆蓋,甘藍(lán)蠟質(zhì)缺失突變體由普通甘藍(lán)突變而來,植株表面無蠟質(zhì)或蠟質(zhì)嚴(yán)重缺失,其顏色亮綠,有光澤。蠟質(zhì)缺失突變體的發(fā)現(xiàn)對于豐富甘藍(lán)種質(zhì)資源和亮綠甘藍(lán)品種的選育都具有十分重要的意義。研究蠟質(zhì)缺失性狀的遺傳規(guī)律并確定其突變基因可為今后該性狀在生產(chǎn)中的應(yīng)用和其突變基因的功能驗(yàn)證奠定基礎(chǔ)。本研究通過對蠟質(zhì)缺失突變體10Q-961和g21-3的研究,探索了蠟質(zhì)缺失突變體的特征特性,明確了蠟質(zhì)缺失性狀的遺傳規(guī)律,分別對蠟質(zhì)缺失突變體10Q-961的突變基因cgl-1.1和g21-3的突變基因cgl-1.2進(jìn)行了定位和分析,并針對突變基因cgl-1.1和cgl-1.2分別開發(fā)了基因內(nèi)標(biāo)記。主要研究結(jié)果如下:1.蠟質(zhì)缺失突變體10Q-961和g21-3在整個生長發(fā)育過程葉色與其對應(yīng)的野生型有顯著差異,突變體葉表蠟質(zhì)并沒有完全缺失還有少量存在,其蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)也與其野生型不同,蠟質(zhì)缺失的主要成分為烷烴和酮。2.蠟質(zhì)缺失突變體10Q-961和g21-3的蠟質(zhì)缺失性狀均為隱性單基因遺傳,且二者控制蠟質(zhì)缺失表型的位點(diǎn)相同。3.通過圖位克隆的方法將甘藍(lán)蠟質(zhì)缺失突變體10Q-961蠟質(zhì)缺失基因Cgl-1.1定位于甘藍(lán)C08染色體上標(biāo)記C08SSR61與染色體末端的188.7 kb區(qū)間內(nèi),對定位區(qū)間進(jìn)行共線性和同源性分析后將區(qū)間內(nèi)與擬南芥蠟質(zhì)相關(guān)基因CER1同源的Bol018504定為cgl-1.1的候選基因,分析發(fā)現(xiàn)Bol018504基因第一個內(nèi)含子上2,722 bp的堿基的插入導(dǎo)致cgl-1.1喪失脂肪醛脫羰酶活性從而使突變體10Q-961表現(xiàn)出蠟質(zhì)缺失表型。4.根據(jù)cgl-1.1的定位結(jié)果對蠟質(zhì)缺失突變體g21-3蠟質(zhì)缺失基因cgl-1.2進(jìn)行了同源克隆,序列分析結(jié)果表明其候選基因Bol018504的編碼區(qū)的第827個堿基G到C的突變可能是該突變體蠟質(zhì)缺失的原因。5.根據(jù)cgl-1.1和cgl-1.2基因的突變位點(diǎn)分別開發(fā)了與蠟質(zhì)缺失突變體10Q-961和g21-3的亮綠性狀共分離的基因內(nèi)分子標(biāo)記ISP1和Dcgl-1.2,該標(biāo)記應(yīng)用于亮綠甘藍(lán)材料篩選的準(zhǔn)確率為100%。
【學(xué)位授予單位】:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:S635.1
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,本文編號:1308148
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